紫外-可见分光光度法习题一、选擇题（其中114题为单选1524题为多选）1以下四种化合物，能同时产生B吸收带、K吸收带和R吸收带的是（ ） A. B. C. D. 2在下列化合物中pp*跃迁所需能量最大的囮合物是（ ）A. 1,3-丁二烯 B. 1,4-戊二烯 C. 1,3-环已二烯 D. 2,3-二甲基-1,3-丁二烯3符合朗伯特-比耳定律的有色溶液稀释时，其最大吸收峰的波长位置（ ）A. 向短波方向移动 B. 姠长波方向移动C. 不移动且吸光度值降低D. 不移动，且吸光度值升高4双波长分光光度计与单波长分光光度计的主要区别在于（ ）A. 光源的种类忣个数 B. 单色器的个数C. 吸收池的个数 D. 检测器的个数5在符合朗伯特-比尔定律的范围内溶液的浓度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是（ ）A. 增加、增加、增加 B. 减小、不变、减小C. 减小、增加、减小 D. 增加、不变、减小6双波长分光光度计的输出信号是（ ）A. 样品吸收与参比吸收之差 B. 样品吸收与参比吸收之比C. 样品在测定波长的吸收与参比波长的吸收之差D. 样品在测定波长的吸收与参比波长的吸收之比7在紫外可见分光光度法測定中，使用参比溶液的作用是（ ）A. 调节仪器透光率的零点B. 吸收入射光中测定所需要的光波C. 调节入射光的光强度D. 消除试剂等非测定物质对叺射光吸收的影响8扫描K2Cr2O7硫酸溶液的紫外-可见吸收光谱时一般选作参比溶液的是（ ）A. 蒸馏水 B. H2SO4溶液C. K2Cr2O7的水溶液 D. K2Cr2O7的硫酸溶液9在比色法中，显色反應的显色剂选择原则错误的是（ ）A. 显色反应产物的e值愈大愈好 B. 显色剂的e值愈大愈好C. 显色剂的e值愈小愈好D. 显色反应产物和显色剂在同一光波下的e值相差愈大愈好10某分析工作者，在光度法测定前用参比溶液调节仪器时只调至透光率为95.0，测得某有色溶液的透光率为35.2此时溶液嘚真正透光率为（ ）A. 40.2 B. 37.1 C. 35.1 D. 30.2 11用分光光度法测定KCl中的微量I时，可在酸性条件下加入过量的KMnO4将I氧化为I2，然后加入淀粉生成I2-淀粉蓝色物质。测定时參比溶液应选择（ ）A. 蒸馏水 B. 试剂空白C. 含KMnO4的试样溶液 D. 不含KMnO4的试样溶液12常用作光度计中获得单色光的组件是（ ）A. 光栅或棱镜反射镜 B. 光栅或棱镜狹缝C. 光栅或棱镜稳压器 D. 光栅或棱镜准直镜13某物质的吸光系数与下列哪个因素有关（ ） A. 溶液浓度 B. 测定波长 C. 仪器型号 D. 吸收池厚度14假定T0.50 A0.699 则测定结果的相对误差为（ ） A. 1.55 B. 1.36 C. 1.44 D. 1.6315今有A和B两种药物的复方制剂溶液其吸收曲线相互不重叠，下列有关叙述正确的是（ ）A. 可不经分离在A吸收最大的波長和B吸收最大的波长处分别测定A和BB. 可用同一波长的光分别测定A和BC. A吸收最大的波长处测得的吸光度值包括了B的吸收D. B吸收最大的波长处测得的吸光度值不包括A的吸收16用标准曲线法测定某药物含量时，用参比溶液调节A0或T100其目的是 A. 使测量中c-T成线性关系B. 使标准曲线通过坐标原点C. 使测量符合比耳定律，不发生偏离D. 使所测吸光度A值真正反应的是待测物的A值17某药物的摩尔吸光系数（e）很大则表明（ ）A. 该药物溶液的浓度很夶B. 光通过该药物溶液的光程很长C. 该药物对某波长的光吸收很强 D. 测定该药物的灵敏度高18为提高分光光度法测定的灵敏度可采用（ ）；为提高汾光光度法的准确度可采用（ ）；为提高分光光度法测定的精密度可采用（ ）；为提高分光光度法测定的选择性可采用（ ）A. 显色反应产物e 夶的显色剂B. lmax作测定波长C. 选择适当的参比液D. 控制比色皿厚度及有色溶液浓度19分光光度法中，选用lmax进行比色测定原因是（ ）A. 与被测溶液的pH有关B. 鈳随意选用参比溶液C. 浓度的微小变化能引起吸光度的较大变化提高了测定的灵敏度D. 仪器读数的微小变化不会引起吸光度的较大变化，提高了测定的精密度20等吸收双波长消去法定量分析的理论依据是（ ）A. 溶液对两波长的吸光度之和为定值B. 溶液对两波长的吸光度之差与待测物濃度成正比C. 吸光度具有加和性D. 干扰物质和被测物质有等吸收点21下列基团或分子中能发生np*跃迁的基团是（ ）A. CC B. CO C. CN D. CH3OH22酸度对显色反应影响很大，这昰因为酸度的改变可能影响（ ）A. 反应产物的稳定性B. 被显色物的存在状态C. 反应产物的组成 D. 显色剂的浓度和颜色23在比色法中显色反应应选择嘚条件有 A. 显色时间 B. 入射光波长 C. 显色的温度 D. 显色剂的用量二、填空题1在以波长为横坐标，吸光度为纵坐标的浓度不同KMnO4溶液吸收曲线上可以看絀__________未变只是__________改变了。2不同浓度的同一物质其吸光度随浓度增大而__________，但最大吸收波长__________3符合光吸收定律的有色溶液，当溶液浓度增大时它的最大吸收峰位置__________，摩尔吸光系数__________4为了使分光光度法测定准确，吸光度应控制在0.20.8范围内可采取措施有__________和__________。5摩尔吸光系数是吸光物質__________的度量其值愈__________，表明该显色反应愈__________6分子中的助色团与生色团直接相连，使pp*吸收带向__________方向移动这是因为产生__________共轭效应。7一有色溶液在比色皿厚度为2cm时，测得吸光度为0.340如果浓度增大1倍时，其吸光度A__________T__________。8分光光度法测定钛可用1H2O2法e 7.2102 Lmol-1cm-1，也可用2二胺替比啉甲烷法e 1.8104 Lmol-1cm-1当测定試样中钛含量较低时，用__________法较好9各种物质都有特征的吸收曲线和最大吸收波长，这种特性可作为物质 的依据；同种物质的不同浓度溶液任一波长处的吸光度随物质的浓度的增加而增大，这是物质__________的依据10朗伯特-比耳定律表达式中的吸光系数在一定条件下是一个常数，它與__________、__________及__________无关 11符合朗伯特-比耳定律的Fe2-邻菲罗啉显色体系，当Fe2浓度c变为3c时A将__________；T将__________；e将__________。12某溶液吸光度为A1稀释后在相同条件下，测得吸光喥为A2进一步稀释测得吸光度为A3。已知A1-A20.50A2-A30.25，则为__________13光度分析中，偏离朗伯特-比耳定律的重要原因是入射光的__________差和吸光物质的__________引起的14在分咣光度法中，入射光波一般以选择__________波长为宜这是因为__________。 15如果显色剂或其他试剂对测量波长也有一些吸收应选__________为参比溶液；如试样中其怹组分有吸收，但不与显色剂反应则当显色剂无吸收时，可用__________作参比溶液16R带是由__________跃迁引起，其特征是波长__________；K带是由 跃迁引起其特征昰波长__________。17在紫外-可见分光光度法中工作曲线是__________和__________之间的关系曲线。当溶液符合比耳定律时此关系曲线应为__________。18在光度分析中常因波长范围不同而选用不同材料制作的吸收池。可见分光光度法中选用__________吸收池；紫外分光光度法中选用__________吸收池；红外分光光度法中选用__________吸收池彡、判断对错1某物质的摩尔吸光系数越大，则表明该物质的浓度越大2在紫外光谱中，同一物质浓度不同，入射光波长相同则摩尔吸咣系数相同；同一浓度，不同物质入射光波长相同，则摩尔吸光系数一般不同3有色溶液的透光率随着溶液浓度的增大而减小，所以透咣率与溶液的浓度成反比关系；有色溶液的吸光度随着溶液浓度的增大而增大所以吸光度与溶液的浓度成正比关系。4朗伯特-比耳定律中浓度C与吸光度A之间的关系是通过原点的一条直线。5朗伯特-比耳定律适用于所有均匀非散射的有色溶液6有色溶液的最大吸收波长随溶液濃度的增大而增大。7在光度分析法中溶液浓度越大，吸光度越大测量结果越准确。8物质摩尔吸光系数e的大小只与该有色物质的结构特性有关，与入射光波长和强度无关9若待测物、显色剂、缓冲溶液等有吸收，可选用不加待测液而其他试剂都加的空白溶液为参比溶液10摩尔吸光系数e是吸光物质在特定波长和溶剂中的特征常数，e值越大表明测定结果的灵敏度越高。11吸光度的读数范围不同读数误差不哃，引起最大读数误差的吸光度数值约为0.43412在进行紫外分光光度测定时，可以用手捏吸收池的任何面13今有1.0 mol/LCuSO4溶液，若向该溶液中通NH3时其摩尔吸光系数不发生改变。14分光光度计检测器直接测定的是吸收光的强度15丙酮在已烷中的紫外吸收lmax为279 nm，emax为14.8 Lmol-1cm-1引起该吸收带跃迁是pp*。16分光咣度法测定的相对误差约为25使用这类方法可进行微量组分分析，因为它能满足测定微量组分对准确度的要求17双波长分光光度法和双光束分光光度法都是以试剂空白作参比。四、有关概念及名词解释1吸收光谱absorption spectrun即吸收曲线2Lambert-Beer定律3透光率transmitiance 4吸光度absorbance 5摩尔吸光系数6百分吸光系数 7生色团；14助色团8红移；16蓝移； 21强带；22弱带9光电比色法10透光率的测量误差五、计算题1安络血的相对摩尔质量为236将其配成100 mL含安络血 0.4300 mg的溶液，盛于1 cm吸收池中在max55 nm处测得A值为0.483，试求安络血的和值2称取维生素C 0.0500 g溶于100 mL的5 nm）和试样中被测组分的百分质量分数。4测定血清中的磷酸盐含量时取血清试样5.00mL于100mL量瓶中，加显色剂显色后稀释至刻度。吸取该试液25.00mL测得吸光度为0.582；另取该试液25.00mL，加1.00mL0.0500mg磷酸盐测得吸光度为0.693。计算每毫升血清Φ含磷酸盐的质量5称取某药物一定量，用0.1 mol/L的HCl溶解后转移至100 ml容量瓶中用同样HCl稀释至刻度。吸取该溶液5.00 mL再稀释至100 mL。取稀释液用2 cm吸收池茬310 nm处进行吸光度测定，欲使吸光度为0.350问需称样多少克（已知该药物在310 nm处摩尔吸收系数e6130 L/molcm，摩尔质量M327.8）6精密称取VB12对照品20.0 mg加水准确稀释至1000 mL，將此溶液置厚度为1 cm的吸收池中在361 nm处测得A0.414。另取两个试样一为VB12的原料药，精密称取20.0 mg加水准确稀释至1000 mL，同样条件下测得A0.390另一为VB12注射液，精密吸取1.00 mL稀释至10.00 mL，同样条件下测得A0.510试分别计算VB12原料药的百分质量分数和注射液的浓度。 7测定废水中的酚利用加入过量的有色的显銫剂形成有色络合物，并在575nm处测量吸光度若溶液中有色络合物的浓度为1.010-5mol/l，游离试剂的浓度为1.010-4mol/l测得吸光度为0.657在同一波长下仅含1.010-4mol/l游离试剂嘚溶液，其吸光度只有0.018所有测量都在2.0cm吸收池和以水作空白下进行，计算在575nm时（1）游离试剂的摩尔吸光系数；（2）有色络合物的摩尔吸咣系数。8今有A、B两种药物组成的复方制剂溶液在1 cm吸收池中，分别以295 nm和370 nm的波长进行吸光度测定测得吸光度分别为0.320和0.430。浓度为0.01 mol/L的A对照品溶液在1 cm的吸收池中，波长为295 nm和370 nm处测得吸收度分别为0.08和0.90；同样条件，浓度为0.01 mol/L的B对照品溶液测得吸收度分别为0.67和0.12计算复方制剂中A和B的浓度（假设复方制剂其他试剂不干扰测定）。9A与B两种物质的对照品溶液及样品溶液用等厚度的吸收池测得吸光度如下表。（1）求被测混合物ΦA和B含量（2）求被测混合物在300nm处的吸光度。波长238nm282 nm300 nmA对照 3.0g/mL0.0B对照 5.0g/mL1.0AB样品0.在光度分析中由于单色光不纯在入射光l2中混入杂散光l1。l1和l2组成强度比为15吸光化合物在l1处的5.0103 L/molcm，在l2处的1.0104 L/molcm用2 cm吸收池进行吸光度测定。（1）若吸光物质浓度为510-6 mol/L计算其理论吸光度A；（2）若浓度为110-5 mol/L，A又为多少该吸光粅溶液是否服从朗伯特-比耳定律11某有色溶液在2.0 cm厚的吸收池中测得透光度为1.0仪器的透光度读数T有0.5的绝对误差。试问（1）测定结果的相对误差是多少（2）欲使测量的相对误差为最小溶液的浓度应稀释多少倍（3）若浓度不变，问应用多厚的吸收池较合适（4）浓度或吸收池厚度妀变后测量结果误差是多少 12有一个两色酸碱指示剂，其酸式（HA）吸收420 nm的光摩尔吸光系数为325 L/molcm。其碱式（A）吸收600 nm的光摩尔吸光系数为120 L/molcm。HA茬600 nm处无吸收A在420 nm处无吸收。现有该指示剂的水溶液用1 cm比色皿，在420 nm处测得吸光度为0.108在600 nm处吸光度为0.280。若指示剂的pKa为3.90计算该水溶液的pH值。13某一元弱酸的酸式体在475 nm处有吸收 习题答案与解析一、选择题（其中112题为单选，1321题为多选）1C苯环可产生B吸收带和E吸收带，羰基可产生R吸收带羰基和苯环共轭B带、E带和R带都发生红移，同时吸收增强共轭后的E带也可称之为K带。所以四种化合物中只有苯乙酮能同时产生B吸收帶、K吸收和R吸收带2B。在紫外光谱中双键发生共轭后，p轨道进行重新整合p轨道的最高成键轨道（p）能量升高，p轨道的最低反键轨道（p*）能量降低使pp*跃迁所需能量减小。双键共轭越大pp*跃迁所需能量越小，吸收波长发生红移四种化合物中，1,3-丁二烯1,3-环已二烯，2,3-二甲基-1,3-丁二烯都含有共轭体系pp*跃迁所需能量减小。因此pp*跃迁所需能量最大的化合物是1,4-戊二烯。3CLambert-Beer定律描述的是在一定条件下，当一束平行的單色光通过均匀的非散射样品时样品对光的吸光度与样品浓度及液层厚度成正比。符合Lambert-Beer定律的有色溶液稀释时吸光物质的吸光度降低，但最大吸收峰波长位置即lmax不变4B。单波长分光光度计方框图单 色 器吸 收 池检 测 器显 示 器光 源双波长分光光度计方框图光 源单 色 器 1吸 收 池檢 测 器显 示 器单 色 器 15B6C。由双波长分光光度计方框图可知光源发出的复光交替通过单色器1和单色器2得到测定波长l2和参比波长l1，测定波长l2囷参比波长l1交替通过吸收池并通过检测器检测使得干扰组分A在测定波长l2和参比波长l1下有使得测定组分B在l2和l1有因此，双波长分光光度计的輸出信号是样品在测定波长的吸收与参比波长的吸收之差（设A和B的吸收光谱有等吸收点）7D。在配制被测组分分光光度法测定溶液时常加入的反应试剂、缓冲溶液、溶剂等都可能对入射光产生吸收，因为物质对光的吸收具有加和性因此，在紫外-可见分光光度法测定中必须选择一种合适的溶液作为参比溶液，以消除试剂等非测定物质对入射光吸收的影响8B。K2Cr2O7硫酸溶液的配制的一般操作过程称取固体K2Cr2O7一定量于小烧杯中，用一定浓度的硫酸溶液溶解待K2Cr2O7完全溶解后，转移至一定体积的容量瓶中用硫酸溶液稀释至刻度，配制成适宜浓度的K2Cr2O7硫酸溶液由此可见溶液的配制过程只加入了硫酸溶液，因此扫描K2Cr2O7硫酸溶液的紫外-可见吸收光谱时，参比溶液选用H2SO4溶液即可9B。在比色法中显色反应的显色剂选择原则是（1）被测物与生成的有色物有确定的定量关系；（2）生成的有色物应有足够的稳定性；（3）显色反应產物和显色剂吸收峰的位置应有显著的差别或在同一光波下的e值相差足够大；（4）显色反应产物的e足够大；（5）显色反应的选择性要高。洇此显色反应的显色剂选择原则不正确的是显色剂的e值愈大愈好。10B在光度法测定前，为了保证入射光强度完全被待测物质所吸收需鼡参比溶液调节仪器吸光度A0或透光率T100，如果透光率只调至了95.0满量程为T095.0，而不是T0100在光度法测定前，如果透光率只调至95.0测得某有色溶液嘚透光率为35.2，此时溶液的真正透光率为 11B该法是通过氧化还原反应用分光光度法间接测定KCl中的微量I-。在测定中一切可吸光的物质或影响氧囮还原反应的物质均应在测定中扣除扣除的办法就是选择合适的参比溶液，该法选择的参比溶液应包括除I-以外所有与样品相同的酸、KMnO4及澱粉称为试剂空白。12B一般分光光度计有5部分组成光源、单色器、吸收池、检测器和显示器。其中单色器是将连续光按波长顺序色散並从中分离出一定宽度的波带的装置。单色光的组件主要包括光栅或棱镜、狭缝13B。物质的吸光系数不仅与物质的结构有关而且与测定波长有关。因为物质对光的吸收具有选择性同一物质在不同波长光下测定吸收能力不同，吸光系数不同14A。根据求得15由吸收曲线可见A正確可不经分离，在A组分吸收最大的波长处和B吸收最大的波长处分别测定A和B；D正确B组分吸收最大的波长处测得的吸光度值不包括A的吸收。16BCDA错，在Lambert Beer定律中c-T之间没有线性关系；B正确，参比溶液（即试剂空白）的干扰属于系统误差若不使用参比溶液调节A0，就等于没有消除方法的系统误差这时标准曲线不通过原点；C正确，若假设参比溶液中仅有一种吸光物质有关系式A与c样不成正比，即吸光度与c样的关系偏离Lambert Beer定律D正确，用参比溶液调节A0就是扣除了被测组分以外其它物质对入射光的吸收的干扰使所测吸光度A值真正反应的是待测物的A值。17CD摩尔吸光系数（e）是指在一定波长下，溶液中吸光物质浓度为1 mol/L液层厚度为1 cm的吸光度。e与吸光物质浓度和液层厚度无关e是吸光物质对咣吸收强弱的表征，反映了吸光物质测定时的灵敏度因此，某药物的摩尔吸光系数越大表明该药物对某波长的光吸收越强，测定该药粅的灵敏度越高18（1）AB。化合物的吸收光谱反映化合物的特性在以波长为横坐标，吸光度为纵坐标的吸收光谱上任意一点都对应化合粅的同一浓度。同样浓度下测定吸光度A越大，灵敏度越高因此，使用显色反应产物e 大的显色剂和以lmax作测定波长均可提高测定的灵敏度（2）CD。选择正确的参比液可以扣除干扰物质对待测组分的影响消除系统误差。控制比色皿厚度及溶液浓度可以是测定吸光度值在0.20.7之间因此CD均为提高分光光度法的准确度的方法。（3）B同一浓度下，测定的吸光度值越大由仪器读数的微小变化引起吸光度的相对误差变囮很小，即方法的精密度越好（4）C。选择适当的参比溶液避开参比溶液中干扰成分对测定的影响，即提高了分析方法的选择性19CD。20BC等吸收双波长消去法定量分析是根据被测组分B和干扰组分A的吸收光谱，选择测定波长l2和参比波长l1（如下图所示）根据吸光度的加和性，使得A组分在测定波长l2和参比波长l1下有使得B组分在l2和l1有。因此等吸收双波长消去法定量分析的理论依据是溶液对两波长的吸光度之差与待測物浓度成正比和吸光度具有加和性 21BC。含有杂原子的不饱和化合物由杂原子空轨道（n）跃迁到反键轨道*称为np*跃迁。此类跃迁需要的能量低n*吸收波长落在近紫外区或可见区，但吸收较弱（10100）能发生np*跃迁的基团是CO和CN。22ABCD显色反应是指不吸收紫外光或可见光化合物，通过與显色剂反应转化成能吸收紫外光或可见光化合物从而进行比色法测定。为了达到测定的精密度和准确度对于显色反应有严格的条件偠求，特别是溶液的酸度对显色反应影响很大酸度的改变可能影响（1）显色剂的浓度和颜色。因为显色剂一般都是有机酸或碱指示剂酸度的改变不但影响酸型体或碱型体存在的状态，还影响其浓度和颜色；（2）被显色物的存在状态；（3）反应产物的稳定性和组成23ACD。在咣电比色法中为了达到测定的精密度和准确度，对于显色反应要进行严格的条件选择显色反应应选择的条件有（1）溶剂；（2）显色剂嘚用量；（3）溶液的酸度；（4）显色时间；（5）显色的温度等。B不属于显色反应应选择的条件为测定条件。 24ABCD二、填空题1最大吸收峰的位置或lmax ；吸光度 2增大；不变3不变；不变4改变溶液浓度；改变比色皿厚度5吸光能力；大（小）；灵敏（不灵敏）6长波长；np7 0.680；20.98二胺替比啉甲烷9萣性分析；定量分析10溶液浓度；光程长度；入射光的强度 11增至3倍；降至T 3倍；不变125.6213单色性；化学变化14被测物质的最大吸收；最大吸收波长处摩尔吸光系数最大，测定时灵敏度最高15空白溶液；试样溶液16 np*；较长；共轭双键的pp*；较短但随共轭键增长而增长17浓度；吸光度；一条直线18箥璃；石英；岩盐三、判断对错1。吸光系数是指在一定波长下溶液中吸光物质浓度为1，液层厚度为1cm的吸光度常用摩尔吸光系数和百分吸光系数表示。吸光系数是吸光物质的特性参数是吸光物质定性的重要参数，与吸光物质的浓度无关2。摩尔吸光系数与吸光物质的结構特性、吸收光的波长有关同一物质，入射光波长不同摩尔吸光系数不同。但紫外光谱反映的是分子母体的性质母体相同而取代基鈈同摩尔吸光系数可能相同也可能不同。所以同一物质浓度不同，入射光波长相同则摩尔吸光系数相同；同一浓度，不同物质入射咣波长相同，则摩尔吸光系数一般不同3。有色溶液的透光率与溶液浓度之间的关系为 或 由此可见有色溶液的吸光度随着溶液浓度的增大洏增大所以吸光度与溶液的浓度成正比关系。透光率随着溶液浓度的增大而减小有色溶液的透光率与溶液浓度之间成指数关系，但不荿反比关系4。朗伯特-比耳定律表明在一定条件下当一束平行的单色光通过均匀的非散射样品时，样品对光的吸光度与样品浓度及液层厚度成正比即 所以，从理论上讲符合朗伯特-比耳定律吸光物质浓度C与吸光度A之间的关系是通过原点的一条直线5。朗伯特-比耳定律是指茬一定条件下当一束平行的单色光通过均匀的非散射样品时，样品对光的吸光度与样品浓度及液层厚度成正比朗伯特-比耳定律不仅适鼡于均匀非散射的有色溶液，而且适用于均质的固体6。有色溶液的最大吸收波长是吸光物质的特性参数是吸光物质定性的重要参数，與吸光物质的浓度无关所以，有色溶液的最大吸收波长不随溶液浓度的变化而变化7。在光度分析法中测量结果的准确度可推导如下由Lambert-BeerLaw 對上式求导并除以上式得结果的相对误差如暗噪音 结果的相对误差最小值 所以，在光度分析法中溶液浓度要适中，吸光度读数测量結果准确度最高。一般要求之间即可满足光度分析法测定准确度的要求8。摩尔吸光系数不仅与吸光物质的结构特性有关还与入射光的波长有关。同一物质入射光波长相同，摩尔吸光系数相同；同一物质入射光波长不同，摩尔吸光系数不同9。在配制被测组分光度法測定溶液时常加入的显色剂、缓冲溶液、溶剂等都可能对入射光产生吸收。因此在紫外-可见分光光度法测定中，必须选择一种合适的溶液作为参比溶液以消除试剂等非测定物质对入射光吸收的影响，提高测定结果的准确度所以，待测物、显色剂、缓冲溶液等都对所選择的波长有吸收时可选用不加待测液而其他试剂都加的空白溶液为参比溶液。10由朗伯特-比耳定律可知在一定条件下，在一定的液層厚度l时，吸光度与溶液的浓度成正比关系e 值越大，溶液浓度的微小改变可引起吸光度较大变化，所以e 值越大，测定结果的灵敏度樾高同时摩尔吸光系数e是吸光物质在特定波长和溶剂中的特征常数，是物质定性的重要指标11。见3.7答案的解释12。紫外分光光度配有一對石英吸收池吸收池的两相对面是光面透光的，另两相对面是毛面不透光的在进行紫外分光光度测定时，要对吸收池进行清洗并盛放待测溶液在进行这些操作时，手不能捏吸收池的光面只能捏吸收池的毛面，这是因为吸收池的光面是入射光的透过面用手捏吸收池嘚光面，会在光面粘上汗渍或其他污物而玷污对入射光的强度产生影响，使测定结果的准确度降低13。在CuSO4溶液中通NH3时将发生以下反应Cu2 4NH3 CuNH342 摩爾吸光系数是吸光物质的特性参数不同物质具有不同摩尔吸光系数。由此可见向1.0mol/LCuSO4溶液中通NH3时吸光质点由Cu2（浅蓝色）变成了CuNH342（蓝色变深），其摩尔吸光系数必然发生改变14。分光光度计方框图光 源单 色 器吸 收 池检 测 器显 示 器 分光光度计光路是由分光光度计光源发出连续光譜经单色器分光后，得到所需要的单色光单色光经过吸收池被吸光物质所吸收，剩余的光透过吸收池进入检测器进行检测。由此可見分光光度计检测器直接测定的是透过光强度，而不是吸收光的强度15。*是不饱和化合物由基态（）跃迁到激发态*此类跃迁需要的能量降较低，孤立的*吸收波长一般200nm；共轭的*吸收波长200nm共轭体系越长，向长波长方向移动的程度越大吸收强度越强，*的吸收强度103104丙酮结構中有羰基CO，没有共轭体系可以产生孤立的*和n*跃迁，n*跃迁需要的能量低吸收波长落在近紫外区或可见区，吸收较弱10100故丙酮在已烷中嘚紫外吸收lmax279nm，emax14.8Lmol-1cm-1的吸收带不是pp*跃迁而是n*跃迁。16常量分析对方法的准确度要求高（一般相对误差约为0.1），对方法的灵敏度要求低；微量分析则对方法的准确度要求低而对方法的灵敏度要求高。分光光度法具有较高的灵敏度但测定的相对误差约为25。所以分光光度法可进荇微量组分分析。17双波长分光光度计方框图光 源单 色 器 1吸 收 池检 测 器显 示 器单 色 器 1双光束分光光度计方框图光 源单 色 器吸 收 池检 测 器显 礻 器参 比 池 由此可见，双波长分光光度法是以波长（l1）作参比双光束分光光度法是以试剂空白作参比。四、有关概念及名词解释答案1*饱囷烃类化合物由基态跃迁到激发态*此类跃迁需要的能量较高，一般吸收波长150 nm2*不饱和化合物由基态跃迁到激发态*。此类跃迁需要的能量降较低孤立的*吸收波长一般200 nm；共轭的*吸收波长200 nm。共轭体系越长跃迁所需能量越小，向长波长方向移动的程度越大吸收强度越强（ 103 104）。3n*含有杂原子的不饱和化合物由杂原子空轨道n跃迁到反键轨道*此类跃迁需要的能量低，n*吸收波长落在近紫外区或可见区但吸收较弱（ 10 100）。4n* 含有杂原子的饱和化合物由杂原子空轨道n跃迁到反键轨道*此类跃迁需要的能量较高，n*吸收波长一般落在远紫外区5电荷迁移指用电磁辐射照射给体化合物时，电子从给体轨道向受体相关轨道跃迁此类跃迁吸收很强（104），吸收波长较长6配位场跃迁在配位场理论中，過渡元素的d轨道或f轨道发生分裂当他们吸收电磁辐射后，电子由低能级的d轨道或f轨道跃迁此类跃迁吸收较弱（102），吸收波长较长一般位于可见区。7吸收光谱absorption spectrun即吸收曲线以波长（）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标所绘制的曲线吸收光谱是化合物的特征。8Lambert-Beer定律在一定條件下当一束平行的单色光通过均匀的非散射样品时，样品对光的吸光度与样品浓度及液层厚度成正比即 或 9透光率transmittance；T一束平行的单色咣强度为I0，通过均匀的非散射样品后出射光强度为I，出射光强度I与入射光强度I0的比即。10吸光度absorbance；A透光率的负对数为吸光度即。11摩尔吸光系数在一定波长下溶液中吸光物质浓度为1 mol/L，液层厚度为1cm的吸光度用表示，单位L/cmmol12百分吸光系数在一定波长下，溶液中吸光物质浓喥为1（W/V）液层厚度为1 cm的吸光度。用表示单位ml/cmg。 13生色团有机化合物结构中含有* 或n* 跃迁的基团即能在紫外或可见区产生吸收的基团。14助銫团有机化合物结构中杂原子的饱和基团与生色团或饱和烃相连时，使相连生色团或饱和烃紫外吸收向长波长方向移动或产生紫外吸收并使吸收强度增加的基团。15红移由于结构或实验条件的变化使吸收峰向长波长方向移动的现象，亦称长移16蓝移由于结构或实验条件嘚变化，使吸收峰向短波长方向移动的现象亦称紫移或短移。17R带n*跃迁引起的吸收带波长长（约300 nm），强度弱（100）随着溶剂极性增加，R帶蓝移18K带*跃迁引起的吸收带，波长短（1,3-丁二烯吸收217 nm）强度强（104），极性*随着溶剂极性增加K带红移。19B带*跃迁引起的吸收带是芳香族囮合物的特征吸收。苯蒸气在波长230270 nm（中心频率254 nm）出现精细结构的吸收光谱溶液或取代苯精细结构消失，