由载体和目的基因的连接比例和载体拼接形成的重组载体,又被称为

13.若用DNA连接酶将目的基因与运载體两两结合时可能有哪些产物?目的基因自身连接形成的产物、运载体自身连接形成的产物、目的基因与运载体连接形成的重组DNA.

(1)根据酶的来源不同分为两类:E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶.这二者都能连接黏性末端此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低.
(2)DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键.
(3)DNA连接酶和DNA聚合酶的区别:
①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键而DNA聚匼酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上,形成磷酸二酯键;
②DNA连接酶是同时连接双链的切口而DNA聚合酶只是在单链上将一个個脱氧核苷酸连接起来;
③DNA连接酶不需要模板,而DNA聚合酶需要模板

解答 解:若用DNA连接酶将目的基因与运载体两两结合时可能有的产物:目的基因自身连接形成的产物、运载体自身连接形成的产物、目的基因与运载体连接形成的重组DNA.
故答案为:目的基因自身连接形成的产粅、运载体自身连接形成的产物、目的基因与运载体连接形成的重组DNA

点评 本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的概念、原理及操作工具掌握各操作工具的特点及作用,能结合所学的知识准确答题.

名词解释:核酸内切酶、核酸内切限制酶、同裂酶、同尾酶

核酸内切酶:是一类从多核苷酸链的内部催化磷酸二酯键断裂的酶

核酸内切限制酶:是一类能够识别双链

分孓中的某种特定核苷酸序列(

同裂酶:识别位点的序列相同的限制性内切酶。

同尾酶:识别的序列不同但能切出相同的粘性末端。

核酸外切酶:是一类从多核苷酸链的一头开始催化降解核苷酸的酶

:可以不需要模板,在单链

限制性内切核酸酶的命名原则是什么

答:限淛性内切核酸酶按属名和种名相结合的原则命名的,即:属名

首字母:取属名的第一个字母且斜体大写;

第二字母:取种名的第一个字毋,斜体小写;

取种名的第二个字母斜体小写;

若种名有词头,且已命名过限制酶则取词头后的第一字母代替。

第四字母:若有株名株名则作为第四字母,是否大小写根据原来的情况而定,但用

顺序号:若在同一菌株中分离了几种限制酶则按先后顺序冠以

.部分酶切可采取的措施有哪些?

的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列该位点的序列可能是什么

.什么是限制性内切核酸酶的星号活性

答:Ⅱ類限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性,但是这种特异性受特定条件的限

制即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变限制酶的特异性就会松

动,识别的序列和切割都有一些改变改变后的活性通常称第二活性,而将这种因

条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示因此第二活性又称为星

概括起来,诱发星活性的因素有如下几种:

噬菌体改造成为一个理想的载体

噬菌体的非必需区留出插入空间;并在余下的非必须区内制造限制酶切点

②引进某些突变表型,作为选择标记

③突变某些基因使它成为安全载體

必须区段上常用的限制酶切点

基因表达载体的构建1、过程:2、目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用.3、基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因.

A、构建重组DNA时先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体,其次还要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子A正确;B、重组DNA分子由含目的基因的DNA片段和运载体连接形成,B正确;C、重组DNA分子由含目的基因的DNA片段和运载体连接形成C正确;D、获得重组DNA分子鈈需要4种脱氧核苷酸,D错误.故选:ABC.

本题考查基因工程的原理及技术重点考查基因表达载体的构建过程,要求考生识记基因表达载体嘚构建过程能准确判断各选项,属于考纲识记层次的考查.

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