骨痹止痛液对兔膝骨性关节炎软骨中IL‐1、TNF‐α表达影响的实验研究--《甘肃中医学院》2014年硕士论文
骨痹止痛液对兔膝骨性关节炎软骨中IL‐1、TNF‐α表达影响的实验研究
【摘要】：目的：建立新西兰大白兔膝骨性关节炎模型，观察骨痹止痛液对实验性动物模型关节软骨细胞中IL-1、TNF-α因子的影响，来探讨其治疗骨性关节炎的作用机制，为其治疗骨性关节炎提供理论依据。
方法：将50只体重2.5kg-3kg，雌雄不限的健康新西兰大白兔按随机数字分为5组。分别为骨痹止痛液低、中、高剂量组，盐酸氨基葡萄糖片组，模型组，每组各10只。均参考Hulth法建立骨性关节炎模型。造模后，给予不同剂量的骨痹止痛液灌胃，盐酸氨基葡萄糖片灌胃，模型组给予生理盐水灌胃，连续灌胃8周。分别于造模后4周、8周取样，处死各组兔，切取关节软骨标本，肉眼观察形态学改变和光镜观察HE染色的病理切片。采取RT-PCR检测兔膝关节软骨中IL-1、TNF-α因子含量的表达。所得数据采用spss19.0软件进行统计分析。
结果：1.肉眼观察：正常膝关节表面应光滑，色泽透明，无增生。4周后模型组关节软骨色泽暗淡无光泽，关节表面不光滑，部分成米黄色，无明显缺损，滑膜增厚。骨痹止痛液组及盐酸氨基葡萄糖片组软骨透明度较模型组高，无缺损及骨赘新生物。8周后模型组关节软骨变黄，软骨层面出现不同程度的缺损，软骨透明度明显降低，有明显骨赘形成，软骨甚至出现糜烂。而骨痹止痛液组及盐酸氨基葡萄糖片组较前无明显变化。
2. HE染色镜下观察：4周模型组软骨组织表层变薄甚至出现部分消失,部分区域呈绒毛状的,表面粗糙、可见一些裂隙或者剥脱。软骨细胞密度分布不均一,存在细胞簇集现象，软骨细胞无明显排列顺序,潮线多不完整;骨痹止痛液高、中、低剂量组和盐酸氨基葡萄糖片组软骨组织损伤情况好于模型组,软骨细胞排列不规则现象在部分区域仍可见，但相比模型组明显少见,各层界限欠清楚,镜下个别区域有簇集现象,潮线个别不完整。8周模型组表现可见软骨结构破坏，骨赘形成。各治疗组较前无明显差异。
3.RT-PCR：骨痹止痛液低剂量组与模型组第8周比较，骨痹止痛液低剂量组第8周大白兔软骨标本中IL-1mRNA、TNF-αmRNA表达量明显降低（P＜0.05），骨痹止痛液中、高剂量组及盐酸氨基葡萄糖片组第8周大白兔软骨标本中IL-1mRNA、TNF-αmRNA表达量显著降低（P＜0.01）；与骨痹止痛液低剂量组第8周比较，骨痹止痛液中、高剂量组及盐酸氨基葡萄糖片组第8周大白兔软骨标本中IL-1mRNA、TNF-αmRNA表达量明显降低（P＜0.05）；与盐酸氨基葡萄糖片组第8周比较，骨痹止痛液中、高剂量组第8周大白兔软骨标本中IL-1mRNA、TNF-αmRNA表达量无明显差异（P＞0.05）；与第4周骨痹止痛液低、中、高剂量组及盐酸氨基葡萄糖片组比较，第8周骨痹止痛液低、中、高剂量组及盐酸氨基葡萄糖片组大白兔软骨标本中IL-1mRNA、TNF-αmRNA表达量明显降低（P＜0.05）。
结论：骨痹止痛液能有效延缓新西兰大白兔膝关节软骨的退变，骨痹止痛液较好的表达出对软骨细胞中IL-1、TNF-α因子调控作用，其机制可能是通过减少促炎因子（IL-1、TNF-a）的表达，来抑制炎症反应，发挥其抗炎作用，从而减轻关节损伤，而为临床运用骨痹止痛液提供依据；也将进一步体现中医药在疑难疾病治疗方面的优势，为OA的中医药临床研究提供了新的课题和方向。
【关键词】：
【学位授予单位】：甘肃中医学院【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2014【分类号】：R274.9【目录】：
中文摘要5-7ABSTRACT7-10英文缩略词表10-11前言11-13一、立题依据13-21 1 KOA 的研究现状13-19
1.1 KOA 的中医学认识13-16
1.1.1 病因病机13-14
1.1.2 中医症候分析14
1.1.3 中医治疗KOA进展14-16
1.2 现代医学对 KOA 的认识与研究16-19
1.2.1 KOA 概述16
1.2.2 KOA 发病机制16
1.2.3 KOA 的病理研究进展16-18
1.2.4 KOA 的治疗进展18-19 2 本实验的研究目的及意义19-21
2.1 研究的目的19-20
2.2 研究的意义20-21二、实验研究21-32 1 技术路线图21-22 2 实验材料22-23
2.1 实验动物22
2.2 实验用药22
2.3 实验仪器与耗材22-23 3 实验方法23-27
3.1 实验动物模型建造23-24
3.2 分组和喂养24
3.3 干预方法24
3.4 标本处理24-25
3.5 HE 切片制作25
3.6 反转录-多聚酶链反应（RT-PCR）25-27
3.7 数据统计方法27 4 实验结果27-32
4.1 肉眼大体观察27
4.2 HE 染色光镜观察27-28
4.3 RT-PCR 检测结果28-32三.讨论32-37 1 KOA 概况32 2 Hulth 造模法与 KOA32-33 3 细胞因子与 KOA33 4 药物的选择和治疗KOA机理的探讨33-37四．结语37-38 1 结论37 2 问题与展望37-38参考文献38-44致谢44-45附录 1 膝关节肉眼大体观察图45-47附录 2 HE 染色图47-49附录 3 动物造模及工作场景图49-50附录 4 实验动物质量合格证50-51附录 5 参研课题、学术论文及参加学术会议情况51
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问题分析：中医认为,食醋性温,味酸苦,有开胃,养肝,散淤,止痛等功效.鸡蛋味甘,性平,有补中益气,养阴定惊等作用.蜂蜜味甘,性平,可补中,润燥,止痛,解毒.三者合用,可以滋阴养肝,补中开胃.意见建议：醋蛋液有降血脂,增强肌体抗自由基的作用,对预防动脉硬化有帮助,也有一定的通便,降低体重,提高免疫力和抗疲劳作用.服用醋蛋液,除可能会偶尔泛胃酸之外,没有其他副作用,可以长期服用.服用醋蛋液时,不要与小苏打,胃舒平等碱性药物,磺胺类药物同用.每天服用不宜过多.胃酸过多,胃十二指肠溃疡患者,则宜限量或不用为佳.
职称：医师
专长：中医科
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指导意见：你好，这个容易导致骨质疏松的现象，所以不可以长期食用的。多样化的饮食对于健康才有帮助作用的。
问长期的服用雪莲菌有没有害处？
职称：医生会员
专长：小儿内科
&&已帮助用户：9233
病情分析： 您好，雪莲菌具有增强人体抵抗力，治疗心脏病，改善动脉硬化，降血压，降低胆固醇，治疗肝，胆，胰等疾病。缓解胃溃疡，十二指肠溃疡，延缓衰老，消除疲劳。长期服用一般没有什么害处。就是太浪费了。意见建议：建议您平衡饮食注意休息。经常锻炼。保持心情好。可以听听音乐打打太极拳等等。。。都有助于您的身体健康。希望我的回答对您有所帮助。祝健康。
问我得高血脂，高胆固醇二年了，今天高压140，低压95，
职称：医师
专长：内科、糖尿病、
&&已帮助用户：37978
问题分析：由于患者存在的高脂血症只要通过合理的饮食以及药物治疗就是就会逐渐好转的。意见建议：所以患者需要继续饮食长期生活饮食治疗的，比如低盐低脂饮食，给予降低血脂以及血压药物治疗，比如氨氯地平，辛发他汀等。
问高血压高血脂高胆固醇！
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专长：高血压，心脏病，糖尿病及胃肠道疾病的诊断和治疗
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问题分析：您好,血压高多于动脉硬化等因素有关,平时应注意禁烟酒及高脂高糖高盐食物,多喝水,适当活动,可适当应用些卡托普利,硝苯地平缓释片,脑络通等药物治疗.定期检查测量血压意见建议：平时注意合理运动，尽量不吃或少吃含胆固醇高的食物，常吃多纤维的蔬菜、瓜果。可以口服：藻酸双脂钠,脂必妥等治疗。
问高血压和高血脂； 高胆固醇吃什么药
职称：医师
专长：内科疾病,心脏病
&&已帮助用户：148277
你好,需要服用降血脂降血压的药物治疗,降压首选钙离子拮抗剂如尼群地平.降血脂主要是烟酸类
问高血压，高血脂，高胆固醇吃什么药
职称：医生会员
专长：儿科常见疾病。
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主要是与生活习惯饮食习惯有关系的.建议低脂饮食低胆固醇饮食和戒烟酒和多吃蔬菜和降低血脂治疗.
问你好医生，我喝醋蛋液不是为了治尿酸高，而是有其？
职称：医师
专长：胆石性肠绞塞综合征,急性胆囊炎,慢性胰腺炎,肝纤维化,肝脓肿
&&已帮助用户：39341
病情分析： 你好，你的高尿酸血症可以吃醋蛋液，并无联系，发病原因是血液中的尿酸浓度过高，形成尿酸结晶沉积在组织中形成的。意见建议：你食用的各种高营养的食物，如果含有的嘌呤过多而没有完全的排出体外，就可以造成了嘌呤的代谢物尿酸增高，所以您饮食清淡就可以了。
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