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噬菌体的分离纯化及效价的测定1 目的1
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噬菌体的分离纯化及效价的测定1 目的1
官方公共微信2L容量的泥沙取样器价格5000元/台
山东潍坊河海水文科技有限公司采样器价格信息。是否提供加工定制:是，品牌:河海水文科技有限公司，型号:HH-11，类型:水质采样器，采样流量范围:2（L/min），连续工作时间:30（min），重量:20（kg）。2L容量的泥沙取样器的供货厂家是潍坊河海水文科技有限公司。山东潍坊河海水文科技有限公司2L容量的泥沙取样器5000元/台。公司名：潍坊河海水文科技有限公司联系人：崔东鹏&先生&（市场部 经理）
电话：手机：传真：公司地址：中国 山东 潍坊市 潍坊市中学街5号邮编：261031悬移质采样器是用以采集河流悬移质水样的仪器。常用的有瞬时式和积时式两类。①瞬时式采样器，主要是横式采样器（图1）。取样筒由薄壁钢管制成，容积0.5～2.0升，两端有盖，盖缘装有拉力弹簧。采样时，张开筒盖，水流从筒中流过，然后操纵开关，借弹簧拉力将筒盖关闭，采集水样。这种仪器结构简单，适用范围广。缺点是受泥沙脉动影响严重，单点取样成果的代表性差。②积时式采样器，有积点式和积深式两种。积点式采样器是在测点上吸取水样，测定某一时段内平均含沙量的仪器，器内有水样仓和调压仓，两者用连通管连接，仪器入水后，调压仓内进水，空气受压缩使采样器内外静水压力相平衡，以保持仪器取样时进水管内流速与天然流速一致。积深式采样器是一种沿垂线连续吸取水样，测定垂线平均含沙量的仪器，适用于浅水河流取样。取样时，要求仪器提放速度均匀并小于垂线平均流速的三分之一。推移质采样器是采集河流推移质沙样，测定单位宽度的推移质输沙率的仪器。其型式有两种：①网式推移质采样器，用于卵石推移质测验，其底部为铁丝圆环编成的软网，能较好地适应河底地形的起伏变化。②压差式推移质采样器，仪器身向后扩散，利用出水口面积大于进水口面积所形成的负压，可以调节仪器进口流速使其与天然流速接近。中国属于这类仪器的有&长江78型&沙质推移质采样器（图2）。该仪器器身前部上方装有加重铅块，尾部装有浮筒，仪器在水下的重心位于前半部，因而使仪器口门在复杂的床面上能较好的伏贴河床。仪器口门底部安有护板，护板前沿作成向前倾斜的刀口形，当仪器放置在床面时，刀口插入河床，可以防止取样时在口门处形成淘刷坑。河床质采样器是采集床面或床面以下一定深度内泥沙样品的仪器。其型式有拖曳式（如拖沙筒等）、挖掘式（如挖斗式采样器等）和钻式(如活塞式采样器等)三类，主要用于采集粒径在10毫米以下的砾石和粗、细沙样品。①拖沙筒是由一具有锐缘的圆筒和系于筒上的拖绳构成。筒的末端装有可以卸取的盛样瓶，使圆筒平卧河底，拖曳取样。拖绳上附有重球，用以改善取样效果。②挖斗式采样器由挖斗、限定挖斗位置的卡爪以及铅鱼壳体等部分组成。采样器下放到河底时，位于铅鱼底部的接触杆抬升，使挖斗的限位卡爪松开，随后收绞起重索，借仪器自重带动挖斗翻转取样。③活塞式采样器，取样时将圆筒（管）压入河床，随着样品进入管内，使管内活塞上升，借活塞移动所形成的部分真空，可以使样品维持在筒内不致漏失。同位素测沙仪应用放射性穿透的原理制造的、能直接在河流中测定悬移质含沙量的仪器。泥沙颗粒分析仪器是测定泥沙样品的粒径及各粒径组的沙重占样品总重百分比的设备。主要仪器有：①分析筛，由一组具有各种不同孔径的筛子组成，按筛孔孔径大小自上而下相互套合叠放。它适用于分析粒径为0.1～100毫米的沙、砾和卵石样品。②粒径计，是一长110厘米、内径4.0厘米的玻璃管，用于分析粒径为0.05～0.5毫米的泥沙样品。与粒径计相类似的分析设备,尚有管径为2.1～10.0厘米,管长为120～180厘米的各种尺寸的可见积累管，用于分析粒径为0.05～2.0毫米的粗、细沙。③吸管分析设备,适用于粒径小于0.1毫米及浓度为0.3～2.0％的泥沙颗粒分析。④消光法分析仪，仪器由光学系统、沉降盒和记录显示仪等部分组成。一般适于分析粒径小于0.05毫米和含量为0.05～0.1％的泥沙样品。采样器价格：5000元/台采样器品牌：河海水文科技有限公司
是否提供加工定制：是
品牌：河海水文科技有限公司
型号：HH-11
类型：水质采样器
采样流量范围：2（L/min）
连续工作时间：30（min）
重量：20（kg）
潍坊河海水文科技有限公司成立于1992年（前身是潍坊水文综合经营公司），注册资本500万元，股份制企业，专门从事水文仪器设备研制开发生产及检定检测工作；负责多个省市、自治区流速流量仪器的检测、校准和水文仪器的代理销售工作。本公司秉承了质量领先、技术领先的宗旨，自行研制开发生产的水文巡测车、水质监测车、水下信号系统等水利水文专业产品在行业内获得了极高的声誉。公司的流速仪检测水槽是国内最先进的流速仪检测设备。公司拥有专业领域的顶尖人才，高效的运作体系和质量保证体系，完善的售后服务队伍。公司始终坚持以人为本的管理理念，最大程度的满足客户要求。
& &公司拥有高素质的管理人员、科研人员和技术人员，其技术水平、知识结构完全适应公司工作的要求。其中高级职称占30%，中级职称占40%，初级职称占30%。其中本科以上文化程度占70%以上。 & &公司独立研发生产的EXC系列水文巡测车质量可靠，性能稳定，较好的解决了汽车和绞车的动力共用问题，2002年通过了山东省水利厅专家组的鉴定。该项目2002年被评为“山东省水文科技进步一等奖”，2005年被山东省科技委员会评为“山东省科技进步三等奖”。2003年“EXC75-1A”型水文巡测车荣获山东省水利科学技术委员会科技进步二等奖，“EXC100-1B”型水文巡测车荣获山东省企业技术创新促进会优秀新产品奖。
& &公司拥有目前国内最先进的流速仪检定系统，1998年对山东省流速仪水槽检定系统自动化控制项目进行大规模的改造升级，改造后的流速仪检定系统，提高了数据处理精度和工作效率。该项目荣获国家海洋局北海分局科技进步三等奖，国家海洋局科技进步二等奖。同时荣获山东省水利科委科技进步二等奖，省科技厅、省经贸委 “山东省计算机应用优秀成果”三等奖。升级后的流速仪检定系统开展了多种流速流量类、声学多普勒类仪器的检测，填补了国内空白，公司于2005年11月顺利通过国家认证认可监督管理委员会的计量认证，是国家认可的水文仪器检测机构。
& &公司今年来多次参与水利水文工程设施的建设改造和水文仪器设备的配套生产工作，2004年参与投标并成功完成了威海龙角山水库水文设施工程施工管理工作，公司严格的管理制度和优良的工程质量，受到了用户和监理的一致好评。2007年成功中标山东省济宁、聊城水情分中心和枣庄、泰安、菏泽水情分中心项目的建设工作，该项目已于今年9月份投入使用。2007年9月份成功中标黑龙江省亚行贷款松花江防洪项目非工程措施建设项目的建设工作；2007年10月份成功中标吉林省松花江防洪项目非工程措施建设项目的建设工作，自从2008年以后公司的业务水平飞速提高，完成了多个省市的中小河流建设项目，其中包含雨量、水位、墒情以及地下水监测项目，在获得业务好评的同时，扩大了公司在业内的影响。 & &潍坊河海水文科技有限公司坚持以人为本的科学发展观，更好的发挥专业优势和独具的人力资源，不断推出科技新产品，为水利水文事业的现代化和创新发展贡献力量。
主营产品或服务：
水文仪器;水文绞车;铅鱼;防汛产品;防汛应急指挥车;移动应急通讯车;动力单元;流速仪;巡测车;气象仪器主营行业：水文仪器;其他气象仪器;专用仪器仪表
经营模式：
是否提供加工/定制：
注册资本：
公司成立时间：2004
公司注册地：山东/潍坊 [已认证]
企业类型：有限责任公司 [已认证]
法定代表人：
高伟 [已认证]
行业重要信息
加工方式：来样加工
工艺：机加工
服务领域：其它
管理体系认证：
员工人数：
51 - 100 人
研发部门人数：
11 - 20 人
厂房面积：5400.00 平方米
主要销售区域：
主要客户群体：
水文水利、气象、环保
年营业额：
人民币 1001 万元/年 - 2000 万元/年
品牌名称：河海水文
质量控制：第三方
公司主页：
工商注册信息：
已通过认证
证书及荣誉：
买家评价数：
本文引用地址：
江苏南京市钢水取样器个，型号:KQY-003，类型:快速取样器。发布钢水取样器信息的厂家是南京星洋电机有限公司上海黄浦区BS-100N自动部分收集器5280元/台，品牌:1，型号:BS-100N，类型:水质采样器，采样流量范围:1（L/min），...山东潍坊2L容量的泥沙取样器5000元/台，是否提供加工定制:是，品牌:河海水文科技有限公司，型号:HH-11，类型:水质...山东济南历城区HY-FKC-1浮游细菌采样器台，加工定制:是，品牌:国产，型号:HY-FKC-1，类型:空气采样器，采样流量范...江苏南京栖霞区不锈钢取样瓶,铜取样瓶台，加工定制:否，品牌:CHUTUO，型号:TC0651371，类型:深水采样器。发布CHUT...江苏徐州赛摩厂家直供皮带自动采样设备-S70型刮板式采样机台，重量:-（kg），类型:煤炭采样装置，采样流量范围:-（...气体采集器价格：1360.00元/个，发布该气体采集器生产厂家或供应商的是潍坊三水检验设备有限公司。采样器型号:HY,...移液枪，发布该移液枪生产厂家或供应商的是北京明力普瑞科技有限公司。采样器型号:10-5000ul,类型:可调移液计量器...AKFC-92A，发布该AKFC-92A生产厂家或供应商的是建湖县电子仪器仪表厂。采样器品牌:建湖仪器,型号:AKFC-92A,类型:粉...浮游菌采样器价格：62622.60元/台，发布该浮游菌采样器生产厂家或供应商的是上海优浦科学仪器有限公司。采样器品牌...
& All Rights Reserved 客服电话9 客服QQ:有关噬菌体生物学特性的检测方法(生物学特性,噬菌体,株噬菌体,裂解量)
19:26:00&&&来源：&&&评论：&&
[有关噬菌体生物学特性的检测方法(生物学特性,噬菌体,株噬菌体,裂解量)] 小弟想对一株噬菌体的吸收率、潜伏期、裂解量等特性进行检测，但苦于找不到比较经典可行的方法。敬请各位战友指点！！！ 关键词:[生物学特性 噬菌体 株噬菌体 裂解量 潜伏期 吸收率]…
小弟想对一株噬菌体的吸收率、潜伏期、裂解量等特性进行检测，但苦于找不到比较经典可行的方法。敬请各位朋友指点！！！
回复以下是关于“噬菌体的检查及效价测定”的基本微生物学实验，愿有所帮助！1 目的 1.1 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。 1.2 学会检查噬菌体的方法。 1.3 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。 2 原理
噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒，其个体形态极其微小，用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解，释放出大量子代噬菌体，然后它们再扩散和侵染周围细胞，最终使含有敏感菌的悬液由混浊逐渐变清，或在含有敏感细菌的平板上出现肉眼可见的空斑──噬菌斑。了解噬菌体的特性，快速检查、分离，并进行效价测定，对在生产和科研工作中防止噬菌体的污染具有重要作用。
检样可以是发酵液、空气、污水、土壤等（至于无法采样而需检查的对象，可以用无菌水浸湿的棉花涂拭表面作为检查样品）。为了易于分离可先经增殖培养，使样品中的噬菌体数量增加。
采用生物测定法进行噬菌体检查，约需12h左右，因而不能及时判断是否有噬菌体污染。通过快速检查可大致确定是否有噬菌体污染，以采取必要的防治措施。根据正常发酵（培养）液离心后菌体沉淀，上清液蛋白含量很少，加热后仍然清亮；而侵染有噬菌体的发酵（培养）液经离心后其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白，加热后发生蛋白质变性，因而在光线照射下出现丁达尔效应而不清亮。此法简单、快速，对发酵液污染噬菌体的判断亦较准确。但不适于溶源性细菌及温合噬菌体的诊断，对侵染噬菌体较少的一级种子培养液也往往不适用。
噬菌体的效价即１mL样品中所含侵染性噬菌体的粒子数。效价的测定一般采用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上，一般一个噬菌体产生一个噬菌斑，故可根据一定体积的噬菌体培养液所出现的噬菌斑数，计算出噬菌体的效价。此法所形成的噬菌斑的形态、大小较一致，且清晰度高，故计数比较准确，因而被广泛应用。 3 材料 3.1菌种
敏感指示菌（大肠杆菌(Escherichia coli)）、大肠杆菌(Escherichia coli)噬菌体(从阴沟或粪池污水中分离)。 3.2培养基
二倍肉膏蛋白胨培养液，上层肉膏蛋白胨半固体琼脂培养基（含琼脂0.7%，试管分装，每管５mL），下层肉膏蛋白胨固体琼脂培养基（含琼脂2%），1%蛋白胨水培养基。 3.3和器具
无菌的试管、培养皿、三角瓶、移液管（1、5mL），恒温水浴锅，离心机、721分光光度计等。 4 流程 4.1噬菌体的检查
4.2噬菌体效价的测定
5 方法 5.1 噬菌体的检查 5.1.1 样品采集
将2～3g土样或5mL水样（如阴沟污水）放入灭菌三角瓶中，加入对数生长期的敏感指示菌（大肠杆菌(Escherichia coli)）菌液3～5mL，再加20mL二倍肉汤蛋白胨培养液。 5.1.2 增殖培养
30℃振荡培养12～18h, 使噬菌体增殖。 5.1.3 离心分离
将上述培养液以3000rpm离心15～20min, 取上清液，用pH7.0，1%蛋白胨水稀释至10-2～10-3，用于噬菌体检查及效价测定。 5.1.4 测定法
5.1.4.1双层琼脂平板法 5.1.4.1.1 倒下层琼脂
融化下层培养基，倒平板（约10mL/皿）待用。 5.1.4.1.2倒上层琼脂
融化上层培养基，待融化的上层培养基冷却至50℃左右时，每管中加入敏感指示菌 (大肠杆菌(Escherichia coli)) 菌液0.2mL，待检样品液或上述噬菌体增殖液0.2～0.5mL，混合后立即倒入上层平板铺平。 5.1.4.1.3恒温培养
30℃恒温培养6～12h观察结果。 5.1.4.1.4 观察结果
如有噬菌体，则在双层培养基的上层出现透亮无菌圆形空斑──????噬菌斑。 5.1.4.2 单层琼脂平板法
省略下层培养基，将上层培养基的琼脂量增加至2%，融化后冷却至45℃左右，如同上法加入指示菌和检样，混合后迅速倒平板。30℃恒温培养6～16h后观察结果。 5.1.5 离心分离加热法（快速检查）
取大肠杆菌(Escherichia coli)正常培养液和侵染有噬菌体的异常大肠杆菌(Escherichia coli)培养液，4000rpm离心20min，分别取两组发酵液的上清液(A1)，一部分于721分光光度计上测定OD650光密度值，另外各取5mL上清液于中，置水浴中煮沸2min（A2），检测A2溶液OD650光密度值，记录结果。 5.2 噬菌体效价的测定
5.2.1 倒平板
将融化后冷却到45℃左右的下层肉膏蛋白胨固体培养基倾倒于11个无菌培养皿中，每皿约倾注10mL培养基，平放，待冷凝后在培养皿底部注明噬菌体稀释度。 5.2.2 稀释噬菌体
按10倍稀释法，吸取0.5mL大肠杆菌(Escherichia coli)噬菌体，注入一支装有4.5mL1%蛋白胨水的中，即稀释到10-1，依次稀释到10-6稀释度。 5.3 噬菌体与菌液混合
将11支灭菌空试管分别标记10-4、10-5、10-6和对照。分别从10-4、10-5和10-6噬菌体稀释液中吸取0.1mL于上述编号的无菌试管中，每个稀释度平行做三个管，在另外两支对照管中加0.1mL无菌水，并分别于各管中加入0.2mL大肠杆菌(Escherichia coli)菌悬液，振荡试管使菌液与噬菌体液混合均匀，置37℃中保温5min，让噬菌体粒子充分吸附并侵入菌体细胞。 5.4.4 接种上层平板
将11支融化并保温于45℃的上层肉膏蛋白胨半固体培养基5mL分别加入到含有噬菌体和敏感菌液的混合管中，迅速搓匀，立即倒入相应编号的底层培养基平板表面，边倒入边摇动平板使其迅速地铺展表面。水平静置，凝固后置37℃培养。 5.5 观察并计数 观察平板中的噬菌斑，并将结果记录于实验报告表格内，选取每皿有30～300个噬菌斑的平板计算噬菌体效价。
计算公式： N=Y/V?X 　 （Ｎ：效价值，Ｙ：平均噬菌斑数／皿，Ｖ：取样量，Ｘ：稀释度） 例如：当稀释度为10-6时，取样量为0.1 mL/皿，同一稀释度中３个平板上的噬菌斑的平均值为186个，则该样品的效价为：Ｎ＝186／0.1×10-6＝1.86×109。 6 结果 6.1 噬菌体检查 6.1.1离心分离加热法 处理方法
OD650光密度值
正常发酵液（对照）
异常发酵液（试验） 离心上清液(A1)
离心上清液加热煮沸后(A2)
6.1.2 绘出平板上的噬菌斑检测结果，指出噬菌斑和宿主细菌。 6.2 噬菌体效价测定 6.2.1 平板上噬菌斑数目 噬菌体稀释度
对照 噬菌斑数（个）/皿
平均每皿噬菌斑数目
6.2.2 计算噬菌体效价(即噬菌斑形成单位pfu, plague-forming unit). 7 思考 1有哪些方法可检查发酵液中确有噬菌体存在？比较其优缺点。 2测定噬菌体效价的原理是什么？要提高测定的准确性应注意哪些操作？ 3噬菌体与菌液混合后保温时间越长其吸附率越高的说法对吗？回复吸收率：在噬菌体和过量菌液混合后，菌/噬菌体混合液中未感染的噬菌体颗粒经过氯仿处理后，在不同时间点检测其数量。一般情况下几分钟内噬菌体即可大部分吸附到宿主菌上.潜伏期：细菌与噬菌体混合作用5分钟后，彻底清洗以除去未结合的噬菌体。然后用新鲜的培养基重悬至相同体积。该重悬液在370C下孵育，其间有规则地收集噬菌体测滴度。裂解量指的是单个宿主细菌被噬菌体完全裂解后所释放的噬菌体数量.具体检测方法本人也不是很清楚.
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XDCM密闭取样设备提供两种取样容器：玻璃瓶和不锈钢钢瓶。
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