做sds-page时,tbe缓冲液配方 会蒸发吗

关于电泳液TAE和TBE(电泳液,电泳缓冲液,配制)
20:06:57&&&来源:&&&评论:&&
[关于电泳液TAE和TBE(电泳液,电泳缓冲液,配制)] 请问各位高手: 电泳缓冲液TAE和TBE有什么区别?各自的应用范围是什么?我要检测RNA应该用那种?配制和应用时有什么注意事项么?请不吝赐教! 关键词:[电泳液 电泳缓冲液 配制]…
请问各位高手: 电泳缓冲液TAE和TBE有什么区别?各自的应用范围是什么?我要检测RNA应该用那种?配制和应用时有什么注意事项么?请不吝赐教!
回复TBE的主要成分:Tris,硼酸,TAE的主要成分:Tris,乙酸,TAE价格低,但是缓冲能力低,长时间电泳阴极变碱阳极变酸,使用需要定期更新。TBE缓冲能力强.但是也有人说TAE的分离效果会比TBE的高一点,所以,具体还要靠你的实验寻求了.回复都是跑胶用的 TAE 的缓冲能力低于TBE,长时间电泳会导致电泳槽阴极变为碱性,阳极变为酸性,使缓冲能力丧失,所以TAE电泳需在两个电泳槽之间用蠕动泵进行循环,且TAE需时常更新。TAE易于回收大概是这样的
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&&&&&&&&&5×TBE&缓冲液
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名  称:
5×TBE&缓冲液
规  格:
价  格:
CAS  #:
Tris0.5M EDTA
1L54g&&& Tris
&&&&&&&&&&&&&&&&& 27.5g&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&&&& 20ml&&&&&&&& 0.5M EDTApH8.0
100.5PAGE1/510ml2ml0.510
点击数:3577& 修改时间:&【】&【】
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.电话:027-。E-mail:公司地址:湖北省武汉市新洲区邾城街道黄茂里170号SDS-PAGE电极缓冲液pH应为多少
14:20:28&&&来源:&&&评论:&&
[SDS-PAGE电极缓冲液pH应为多少] 最近做SDS-PAGE,查阅大量文献,均记载电极缓冲液应为Tris-甘氨酸系统,混合后调pH至8.3 但做得时候发现,用不调pH的Tris-甘氨酸电极缓冲液(pH8.8),跑出来的电泳结果非常好,Marker的六个条带均清晰明显。按文献上调到8.3后条带反而分得不好,Marker也只跑出来四五条带。 这是怎么回事呢?大家平时做SDS-PAGE调不调电极缓冲液pH? 关键词:[电极 缓冲液 SDS-PAGE 条带 甘氨酸 电泳]…
最近做SDS-PAGE,查阅大量文献,均记载电极缓冲液应为-甘氨酸系统,混合后调pH至8.3 但做得时候发现,用不调pH的-甘氨酸电极缓冲液(pH8.8),跑出来的电泳结果非常好,Marker的六个条带均清晰明显。按文献上调到8.3后条带反而分得不好,Marker也只跑出来四五条带。 这是怎么回事呢?大家平时做-PAGE调不调电极缓冲液pH?
好像我从来没有调过pH
今天问了几个做过-PAGE的前辈,也说没调过pH
我们是调到8.3的,电泳好像没有问题。
都不要调PH值,药品质量好,称量准确,一般配成的PH值都在8.3左右,所以根本不用调PH值
我们也从不调pH
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SDS-PAGE电泳的电极缓冲液可以重复使用么?
SDS-PAGE电泳的电极缓冲液能重复用多久?我用的那个是半年多前用过几次的,之后一直在室温放着,现在有点浑浊了,不过跑了次电泳效果也不是很差,想问一下大家如果重复使用次数多了会有什么结果?
反复使用次数多了会导致你的电泳速度变慢,电泳时看起来泡泡就是很脏的那种。最后跑出来的胶也不好看 缓冲液换的时间不太确定,因为情况不一样换的时间也不一样,有的实验室跑电泳比较频繁,就不存在这样的问题。平时肉眼看看,如果感觉比较浑浊了再换,但是如果要切胶纯化呀或者要求高一点那么最好用新的缓冲液;缓冲液肯定影响跑出来的条带了。如做胶回收,跑RNA都要用新的缓冲液, 我们实验室一直都是重复使用的,一般不会有太大问题,不过可以定期检测PH,反正就是个为了导电,应该影响不大蛋白质page电泳时,电泳缓冲液可以重复使用吗?
17:07:54&&&来源:&&&评论:&&
[蛋白质page电泳时,电泳缓冲液可以重复使用吗?] 各位战友:
在蛋白质sds-page或者native-page中,所使用的电泳缓冲液Tris-甘氨酸是否可以重复使用。因为甘氨酸比较贵而且用量也很多,所以是否可以重复用呢??先谢谢了! 关键词:[电泳缓冲液 蛋白质 电泳 甘氨酸 sds-page]…
各位朋友:
在蛋白质sds-page或者native-page中,所使用的电泳缓冲液-甘氨酸是否可以重复使用。因为甘氨酸比较贵而且用量也很多,所以是否可以重复用呢??先谢谢了!
自己试一下不就知道了?别人说的不可全信,自己试验就知道了。可以的,不过多了电泳效果不好。如果你是用bio-rad或类似的那套装置,可以大盒里面的装上次用过的液体,挨着样品的小池里面装新的buffer。详细地,外面的用250mL足够没住电极铂金丝,里面的,如果我没有记错的话,150ml刚好够。每次跑完电泳,外面的倒掉100多mL,再加上这次的150ml一起保存。下次用的时候,只需要新的150mL加在里面小池就可以了。
上槽液尽量用新的下槽液可以多用两次
支持二楼的用法.其实用3-4次不影响结果.我经常用4次才换掉.
我用7.8次发现比较混了才换,电泳结果也没什么影响
各位朋友:
在蛋白质sds-page或者native-page中,所使用的电泳缓冲液-甘氨酸是否可以重复使用。因为甘氨酸比较贵而且用量也很多,所以是否可以重复用呢??先谢谢了!
可以重复使用。我做的情况是,新配的电泳液可以让溴酚兰在分离胶中压成一条很细的线,随着使用次数的增多,溴酚兰就慢慢变粗了。起初我怕影响结果,但是染色后发现与新鲜配置的没有多大区别。
还发现一个现象,用久了,恒压时的电流会比新鲜配置的大。可能是使用时间长了,离子强度也增强的缘故。
有道理,还是这样节省一些
非常感谢以上各位朋友的答复!现在我已经试过了,重复使用没有什么影响!
重复使用应该没什么问题,我也是两三次才换,不过用过之后的有点发粘,是正常状况吧?
我们实验室一般是用3次然后倒掉,用4次也没有问题啊
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