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大豆细胞质转化酶基因GmCInv的克隆与植物表达载体构建--《大豆科学》2014年02期
大豆细胞质转化酶基因GmCInv的克隆与植物表达载体构建
【摘要】:利用同源克隆方法从南农菜豆6号中克隆得到一个编码大豆细胞质转化酶(cytoplasmic invertase,CInv)的基因,命名为GmCInv。序列分析发现该基因含有一个长1 956 bp的开放阅读框,编码652个氨基酸。预测其蛋白质分子量为73.88 kDa,等电点为6.12。与NCBI公布的部分蛋白质序列比对发现,GmCInv蛋白序列与毛果杨(Populus trichocarpa)的相似性最高,达88%。组织表达分析表明,GmCInv在大豆苗期的叶、开花期的花中表达量最高,在根、茎中表达量较低。利用Gateway技术得到植物过表达载体pEarleyGate103-GmCInv,再转入根癌农杆菌EHA105中,为GmCInv基因的转化及功能分析奠定了基础。
【作者单位】:
【关键词】:
【基金】:
【分类号】:S565.1【正文快照】:
转化酶(invertase,EC 3.2.1.26)不可逆催化蔗糖水解成D-葡萄糖和D-果糖,存在着多种同工酶形式。这些同工酶根据它们的亚细胞定位结果可分为细胞壁转化酶、液泡转化酶和细胞质转化酶[1]。细胞质转化酶(cytoplasmic invertase,CInv)存在于细胞质中,活性的最适pH为中性或弱碱性(p
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