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【求助】请教压力反复波动问题
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仪器：Agilent 1200用乙腈水（A、B通道）冲洗柱子时，压力从40多bar几分钟后变为20多bar,几分钟后又变为40多bar，如此反复波动，但是换了缓冲盐乙腈（B、D)平衡时，压力又变回正常；直接接双通用乙腈水冲洗压力没波动，属于正常。在排查原因的时候，检测了A通道的流速正常，怀疑是柱子进气泡了，但是换了同品牌的另一根柱子，也会出现上述的压力波动情况，请问各位能帮忙解答问题可能所在哪吗？谢谢！
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楼主请说明用不同通道时每个通道用什么流动相。
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A通道的是纯化水，B通道的是乙腈，D通道的是磷酸缓冲盐
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冲柱方法有问题，长期如此，D通道会被盐堵死的，用的哪个通道就需要冲选哪个通道，而不是仅仅冲洗柱子。
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楼上说冲柱方法有问题？！我们每天做完实验都会把D通道的缓冲盐用纯化水替换的，并且把D通道的过滤头放到A通道的纯化水中，这样的操作存在问题？因为我是刚进这行业没多久，有些细节的操作还需要慢慢学习，希望前辈们指导指导。
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minkeyhe 仪器：Agilent 1200用乙腈水（A、B通道）冲洗柱子时，压力从40多bar几分钟后变为20多bar,几分钟后又变为40多bar，如此反复波动，但是换了缓冲盐乙腈（B、D)平衡时，压力又变回正常；直接接双通用乙腈水冲洗压力没波动，属于正常。在排查原因的时候，检测了A通道的流速正常，怀疑是柱子进气泡了，但是换了同品牌的另一根柱子，也会出现上述的压力波动情况，请问各位能帮忙解答问题可能所在哪吗？谢谢！ 直接用双通时压力小，会看不出波动。排查原因时A通道应该是没接柱子，那么也是不一定能看出压力波动的。判断是A通道有气泡。用有机相小流速冲一冲吧。
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楼上果然是高手！
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换流动相的时候最好都要排一下气
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换流动相的时候都会先排气的，今天用20%乙腈水冲了好几个小时，压力波动在1bar左右,属于正常的。明天试试 你给出的方法，谢谢！还没有排查出原因，希望有经验的前辈指导指导。
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看看是不是比例阀的问题
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waters高效液相流速设置过高时，柱子下端的接口每次被顶开而露液，这是什么原因
使用waters高效液相过程中老是出现露液的现象，如果我把流速设置为1.0时，柱子下端的接口老是被顶开（亲眼观察到顶开），此时柱压大概在3000psi左右（我所设置的压力上限是4000psi），而后我又将流速设置为0.6和0.8，柱压2500psi左右，但是没有出现顶开柱子而露液的情况。另外我试了下扭松或扭紧单通阀，发现一旦拧紧一点单通阀后，压力会迅速上升，本来好好的冲柱子，结果压力迅速下降到500psi，打开发现，柱子下端又露液了（注：柱子下端为流动相进口），这到底是什么原因造成的？？？每天做液相都花好几个小时在解决这个屁问题，人都要烦死。另外：使用的柱子是迪马科技的C18柱。
应该不是柱子没接好的原因，我试了下其他的柱子，如果同样的使用1.0纯甲醇冲甲醇，都会被顶开。另外，刚开始我也一直以为是下端的peak管没拧好的原因，后来我更换了peak管，并且特别注意拧好了，流速一旦过大，马上下端露液
但是冲完柱子我用流动相冲的时候，一下就露液了，本来冲柱子流速搞低一点没什么影响，流动相也能慢慢升流速么？？那样岂不是很耗时间啊
我觉得你这个似乎不是流速升降快慢的原因了，有没有注意过柱接头被冲开瞬间压力有多大？如果是纯甲醇，压力有接近3000的话，压力太高了！
流动相是甲醇：水=65：35，准备用的流速是1.0。柱子长度250mm,内径4.6mm,粒径是5um。你说的堵头是那个柱子上下端那二个接口么？？已经更换过了，试了二根柱子都出现下端露液的情况
大哥，这点常识我还是有的，可不要当我是小白啊，每次接柱子，我都很小心看哪边朝上。:D
是用流动相吸柱子的时候冲开的（纯甲醇冲的时候，柱压1000psi左右），差不多3200psi左右，然后马上柱压下降到500psi，我就知道肯定又TM露液了~~
3000psi确实有些高了，可能是柱子堵了。如果是PEEK材质的接头，耐5000psi没有问题。
额，等过几天新柱子回来我看看还有没有这样的情况~~这逼破玩意真是坑死人啊，已经出现二次这样的情况了
O(∩_∩)O哈哈~，好嘛~~~善意的提醒，莫见怪，我的学生偶尔为之，看来是我管理有问题~~~
是这种接头吗？换新的，买质量好点的。再就是不锈钢管接入的部分一定要直。
特别是反相柱子，接反了说不定柱子就报废了~
对啊，具体尺寸应该差不多颜色也一样~~~你可能说的也有点对，我注意了下那个不锈钢管接口有点弯曲，没办法，前面人用的时候已经把那根管子卡在一个特定的位置，钢管已经弯了一点点，但是也不是特别明显，这应该不是主因吧，不然，我调节流速的时候，变化怎么那么明显~
应该是有一定关系的，你把它弄直了试试。
管子弯了就有了空隙，压力超过一定大小可能就会崩开。
这个难度很大啊，那么硬的钢管，就一点点弯曲，估计有点悬啊
这个……弯那么一点点，应该影响不是很大吧，再说用手也不好掰直啊，那个金贵货，又怕搞坏了。
嗯，就流速改了一点点而已~~~压力也没变多少啊
单向阀超声清洗下，过滤芯清洗下，peek换一个试试，然后就是柱子冲一天，最好同样的条件换换别的柱子看看是不是因为柱子的原因，我是这几天都在搞仪器清理。。。效果还是不太理想。准备换新柱子~
哦哦 以前我柱压高到那个出泵到六通阀那个地方漏液，结果我就是把白头换了 还是漏液 最后我就把保护柱拆 就好了 原来就是一个破保护柱堵了 最近公司有人去培训 因为我用的流动相是盐 有一天没反应过来 摸条件 把盐浓度调到150mM了 结果管道里堵了 解决方法就是卸掉柱子，用温水冲洗管道 因为仪器出问题 真的很恶心 特别是还有一大堆事情等着检测 祝好 希望问题解决的时候 可以再告诉我一下
换柱子后，就可以了
我今天用水冲了一天柱子，还是没什么效果，对了，我想更换那个白头，但是不知道白头在哪里，我们机子有很多白头配件，。
手段上没那种不锈钢接头，，我现在真的是怀疑柱子坏了
拧的可好啦~~不是那个的问题，已经换过新的接头了。
对啊，现在几天都是在检查仪器问题，柱子也在慢慢摸索是不是堵了
貌似有点道理，最近有试过这类方法，我真怀疑机器坏了，接上柱子，纯乙腈冲，流速才0.2，压力都有1000psi，什么玩意嘛，气死个人
把泵头拆了超声一下，然后不接柱子，不进检测器把管路用你配的清洗用溶液冲洗一下，不知道你做的什么实验，如果是较复杂的产物，你的系统很可能被污染了，或者是被盐堵了，需要细心严格地处理：
我没接柱子上端的时候压力很低啊，刚开始我也以为是仪器里面管路堵了，然后没接柱子，一直用水、乙腈（不同比例）冲洗了一天
泵头是哪个部位？？目前为止，我超声了在线过滤器（单进样阀附近的一个六棱柱）、流动相瓶子里面那个过滤芯……让我大拆，老师非把我劈了不可。对了，你知道那个白头在哪个部位么，百度上有可能是那玩意要更换，但是我不晓得它在哪里。。。请理解我这小白~~
我公司用的是安捷伦1260&&白头就是泵前面 就是选择排气与过柱子的那个地方
嗯，谢了哈，我还是得拿着操作手册好好研究下
冲了一夜都没效果~~~预柱好像被拆走了。。。坑死人啊，得自己查手册配溶液清洗管路了
已经超声过了，效果还是一般，我就用0.2ml/min的100%乙腈冲柱子，压力都有1000psi，大型仪器就是坑，不知道哪个傻逼把那些配件全拿走了，麻痹，要那玩意又没什么用，净在那害其他人。
对啊，我也知道压力超级高了，昨天0.2速度跑纯乙腈过夜，草，速度都有1000psi，杀了我算了。管路我没接柱子，4个通道都分别用水、乙腈（不同混比）大流量冲过了，大概冲了有1个小时吧，现在效果还不咋滴
如果是导师的东西，建议你还是请教身边高手一下，拆卸也要专业工具，有些零件更换挺贵的！如果是公司的那就看你和公司的关系而定，
waters仪器没有过滤白头（Agilent的过滤白头相当于waters的在线过滤器滤芯）。
额，总得来说是学院的，管这台仪器的老师也不太懂，让我自己摸索
填料颗粒5um的，长250mm，内径4.6mm，C18柱
:o:o不会把~~~我看配件里面有好多很小的白色的玩意，我还以为是白头咧
是柱子二端的那个接头么？？要用扳手拆开吧，对里面填料影响大不大啊，哥？？？？我就怕拆开把柱子搞报废了
流动相有缓冲盐肯定要特别注意堵塞管路，我这流动相就是甲醇水，都能堵成这鬼样，还有，我好像找不到白头在哪，今天一个大神跟我说waters的液相没有白头~~~
关键手头上现在没有柱子啊，然后新柱子还不知道什么时候到货，所以只能别清洗机器，边冲柱子，然后看看情况，烦人啊，做一半换柱子的话，测定数据全部没用了
流动相没有缓冲盐类，样品里面可能含有微量钠盐，准备用30%磷酸清洗下管路，试试看结果怎么样。对了反相柱子，反着接，低流速冲柱子，对柱子影响很大吧，不会让柱子直接报销吧
啊，预柱拆了也要换个新的呀，这对柱子多不好呀
还是请教一下你的师长们，我当时做反应液检测就是这种情况，有个封闭垫阀需要更换，可能要请专业人士，柱子应该是没多大问题
你看到的那个白色的应该是进样器那边用的 我看了你的问题 3000psi在可耐受范围内 漏液是在peak管与接头之间吧？还是在接头与色谱柱之间？我猜测是前者 你可以尝试换一截peak管或者换个接头试试 应该是peak管与接头不匹配所致
以前经常拆，要不你用甲醇，水梯度洗脱，时间长点，先用大部分水洗，再用90%甲醇保存，一般做液相时候，都是从低流速开始0.5，慢慢上升，不然一下子就堵了
找老师，老师让我自己解决。我没法了，只能求助小木虫了
现在露液解决了，压力还是降不下去咧，已经冲洗管路一天了~~~
拆开后，柱头超声就搞定了么？？？现在无法梯度洗脱啊，流速稍微高一点，压力高的吓死人，。，，
你要确认一下 到底是管路压力还是色谱柱压力 如果是管路压力 那说明管路里有堵塞 建议根据可能堵塞原因 用稀硝酸、DMF、热水冲洗管路 如果是色谱柱压力高 可以尝试用DMF、DMSO等强溶剂进行清洗 需要注意的是 清洗的时候不要接检测器 避免污染检测池
如果是管路问题会出现什么样的情况？？？我现在如果不接柱子的话，用配置的清洗液清洗了一遍，跑各种大流速的有机相压力都很低，一旦接上柱子，流速高于0.5就不行了，由于没有其他的柱子实验，不知道到底是不是柱子的原因。
那应该是管路有问题了，可能是某个地方堵了，如果用纯乙腈用0.2的流速的话最多也就300psi，你还是得继续排查原因，会不会是检测器堵了？流通池有没有问题？接双通的话压力多高？
额，我看就柱子上端进入了检测器，要是真是检测器堵了，检测器也不好拆啊~~~
如果不接色谱柱 以双通管连接 压力很低的话 那只能说你的色谱柱堵塞了
啊啊啊啊，今天终于找到原因了，检测器进样管堵塞了，换了一根备用管就ok了，大神啊，为什么没有早点遇到你咧，……顺便小白一下，刚开始很多人说接双通管试一试，我是真不知道双通管长啥样的，今天去找了找配件，看了看百度上双通管的图片，才 发现啊。。。。接上后按照大家的提示，立刻知道原因出在哪了
呵呵 解决了就好 HPLC说简单不简单 说难也不难 多想想 问题自然就能解决
呵呵，问题已经解决了，是柱子末端进去检测器的那一段管子堵住了，超声后已经好了~~
哦哦 那就好 谢谢你还记得告诉我
呵呵，必须的啊，重在交流啊，谁没遇到点困难啊，下次说不定你遇到这种情况，就多知道一种可能的原因了
恩恩&&说的太对了
大神你不会现在还做高效液相吧？？？？难道还没毕业？？
工作了 可是工作也是面对高效液相
高科技啊，轻松，自在的工作咧，工资高不高？？？
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磷酸析出堵塞C18柱
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这个帖子发布于10年零120天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
急问各位老师
安捷伦1100色谱仪，流动相中含有磷酸，分析完毕水洗柱子时间过短，大概15min，之后换作甲醇冲洗过夜，结果发现甲醇压力超高，若换作流动相，压力达到300bar，维护人员建议水洗，5h后仍无改观。请教各位老师，上述情况是否为磷酸析出堵塞色谱柱，该如何处理，万分焦急，望各位帮忙！！！十分感谢！！！
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1、有预柱么？换个新的或者干脆不要预柱。2、分段检查管路，看哪里的压力比较大就可以反冲来做或换了3、这个应该没什么大的问题，用10%的硝酸把滤头（流动相瓶子里的）给超声清洗再水、甲醇依次冲洗干净，各20分钟。4、可以的话换个新柱子，你先把柱子断开观察压力的变化。如果压力很大的话就要检查管路和超声清洗滤头了。如果压力不大的话就是柱子的问题，这个可以换个新柱子或者填补柱头，这个你可以SEARCH本版面，很详细的。柱子的再生也可以，但是实际效果不是很好。
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回版主没有预柱，以前的预柱太旧，造成峰拖尾，故拿掉了。检查过柱前压力，很正常，猜测是色谱柱堵塞。买新柱子要花money，而且没办法向老板交代，不知道反冲危险系数有多大，用纯水冲洗吗，多长时间呢？
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首先：用水冲：开始0.1ml，慢慢冲，不要着急；（可以将水适当加热，有助于溶解），一段时间观察压力变化。如果压力有下降，再将流速适当调大。其次：可以考虑反冲。
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boloba 回版主没有预柱，以前的预柱太旧，造成峰拖尾，故拿掉了。检查过柱前压力，很正常，猜测是色谱柱堵塞。买新柱子要花money，而且没办法向老板交代，不知道反冲危险系数有多大，用纯水冲洗吗，多长时间呢？反冲柱子可以试试建议用水冲洗,然后再加入有机相小流速长时间冲洗,如果不行的话,有可能筛板污染严重,那就得拆了换筛板了.不过因为没有厂家的填料和筛板所以最好自己别拆.还是换新柱吧.
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如果仅仅是磷酸析出，反过来冲，将流速调慢，应该能够搞定的。如果是对键合相本身产生破坏了的才麻烦。
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请教位老师，磷酸会在流动相中析出来吗？
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尝试反冲了，0.2ml/min，1.5h，压力维持原样，彻底崩溃各位老师，还有什么起死回生的办法吗
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估计柱子不行了。
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用热水，柱子恒温加热
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磷酸能在流动相中析出？实验一下，把1ml磷酸加到100ml甲醇中，能析出？何况流动相的磷酸浓度远低于这个比例，何况楼主还水冲了15分钟。还是先用双通代替柱子看看系统压力，如果是系统堵塞，查出堵塞原因用纯水超声，然后用50度左右的热水冲洗管路，如果是4元泵，冲洗每个管路。如果确实是柱子的原因，加柱温，温水洗、乙腈洗、反洗。另外，磷酸和磷酸盐，差别相当大。
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就是，先要排除硬件故障造成压力过大；再去看是不是柱子的问题。如果盲目的判定柱子有问题，胡乱处理柱子，也许柱子真要废了！
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首先，你要确信真的是柱子的问题？其次，如果上述办法都没有用，建议你把柱头拆了（可能筛板污染严重），然后轻轻的末掉一点点被污染的填料，然后再重新装上（只能这样了，柱子可能还能用一段时间，但要十分小心哦，）
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不会是柱子的问题，是管路被盐堵了，不要接柱子，看压力多少即可正确判断。希望你的柱子还是好的。好运有你！
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应该不是磷酸析出！应为磷酸的流动相中的浓度一般小于1%，在甲醇中不应析出；即使是磷酸盐（即误把磷酸盐作为磷酸），也不应析出，因为磷酸盐在甲醇中是易析出，但已经冲洗15分钟，流动相中大部分的盐已经冲洗干净，色谱柱不应该存在盐析现象，具体应首先检查硬件的问题。注意善待你的色谱柱哦！
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不可能是磷酸析出！理由同楼上。你可以反冲色谱柱，水，流速2ml/min，冲10min，再正装柱子，用甲醇，1ml/min洗就可以的。你还要检查一下你的滤头，看看是不是滤头太脏的原故.
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我觉得不一定是柱子的问题，你应该把柱子卸下看看压力怎么样。如果压力降低就说明是柱子的问题，你可以采用楼上的一些建议。一般来说磷酸盐析出，结晶是不会进到柱子里的，因为在进样阀下和柱子头部都有过滤的部件。但如果压力没有降低，就有可能是单向阀堵塞了，可以卸下单向阀用针加蒸馏水冲洗。还有一种可能就是检测器的容量池堵塞了，可以卸下容量池用泵大流速反冲，但如果是这种情况最好找专业人员进行维修。
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关于丁香园高效液相色谱检测时，流速0.4mL/min，双泵压力都只有2-3mpa，请问这正常吗？泵压力是不是与流速相关？_百度知道
高效液相色谱检测时，流速0.4mL/min，双泵压力都只有2-3mpa，请问这正常吗？泵压力是不是与流速相关？
我有更好的答案
这个不正常，压力太低了。你用的是什么流动相？
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1、你用的是什么型号的液相色谱？2、你的梯度比例是多少？ 怀疑你走乙腈单向阀有问题
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怪异现象-UPLC BEHC18柱子在走100%乙腈是压力快速升高-求高人
UPLC BEHC18 50MM*1.7umM出现如下问题：
1. 我用0.15ml/min流速洗柱子，从90%水相→50%→100%乙腈，最后乙腈回到2500psi后，迅速升高能达到6000psi（手动暂停程序）
2. 每天过渡到起始梯度是都比前一天升高1000psi压力
非常急，压力呀~
求高人解答
样品处理的很干净了
流动相---给工程师打电话说可能是国产滤膜质量不好，滤乙腈时溶解了~（我们以前都用这个牌子的，只是批次的不同）会有这个现象发生吗？
我们洗柱子时水相不含盐，不过进样时用盐（2.5mM的）
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冲了400min，就是害怕堵柱子
我觉得再冲时间长了，水相对柱子也不好啊
我每次进完样品都会加载洗柱子程序，其实的都是90%水相+10%有机相洗脱
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我了个去，告诉你，滤膜只是小概率事件，碰到的可能性就是0.Waters的工程师就会拿这个说事，让你买他家的滤膜。看了看大家的回复，你还用缓冲盐了，那有可能是析出盐了。不过，我有种预感，你的柱子，可以报废了。实在是想救，换个筛板，或者把柱子倒过来冲吧
~~~~(&_&)~~~~&&
是不是实验的都会遇到这样那样的问题:cry:
哪个混合器？不是很清楚
已试过，验证不是预柱堵
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