为什么提肝组织粗蛋白的离心离心后上清里有雾状物质

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【求助】超声破碎离心后上清中的蛋白
原核表达,载体pET32a,菌株BL21(DE3)pLysS诱导表达后蛋白大部分形成包涵体超声破碎离心后上清中的蛋白是有活性的吗?是不是可以不用复性,可以把上清纯化后直接做活性检测吗?如果上清跑电泳有目标蛋白带,那么这部分应该算是可溶形式表达的,是否具有活性你得纯化检测以后才知。超声波对于包涵体没有任何影响的,包涵体经过超声绝对不会变成可溶形式的。一般的蛋白也不可能全部表达成包涵体形式或全部是可溶形式的,绝大多数都是两种形式都有,只是各自占的比例不同而已。不过你既然确定了包涵体为主要表达形式,最好就盯着它做纯化,即使有少量可溶形式的,量太少纯化出来也没太大意义,而且两种纯化方法肯定完全不同,会浪费很多精力。谢谢 eastrocket!我也在做这部分内容,不清楚要想过柱子,怎样超声裂解细菌得到包涵体,主要是超声用到的液体.呵呵 如果不想做包含体,就尽量让他可溶性表达,降低其表达量!可以低温,降低IPTG浓度,减少诱导时间等等!可能会有帮助!
您的位置: &&在噬菌体侵染大肠杆菌的实验中,为什么离心后蛋白质位于上清液而DNA位于下清液?
噬菌体侵染大肠杆菌实验主要是为了证明遗传物质是DNA而不是蛋白质,这是一.噬菌体由蛋白质外壳和DNA组成,这是二.噬菌体侵染大肠杆菌之后,同位素标记过的噬菌体DNA被注入大肠杆菌细胞,离心之后这些标记的DNA随着大肠杆菌细胞沉降在试管底部,而噬菌体的蛋白质外壳则留在细胞之外,由于蛋白质分子相对于细胞来说小很多,不容易离心,所以留在上清,这是三.
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因为在噬菌体侵染大肠杆菌的实验中,噬菌体的的DNA侵入到大肠杆菌内
经搅拌后 噬菌体外壳脱离大肠杆菌 再经过离心后 由于大肠杆菌的质量较大 故成为沉淀 而噬菌体外壳较轻 故悬浮在溶液中 应该就是这样
蛋白质外壳不能侵入细菌而留在外面,DNA进入细菌,细菌沉,蛋白质外壳轻
扫描下载二维码噬菌体侵染细菌实验中,离心是干什么的,最后为什么会分噬菌体侵染细菌实验中,离心是干什么的,最后为什么会分层?上层清液中的噬菌体是只剩蛋白质外壳了吗?如果是,那还叫噬菌体?
无敌2pwCN23
第一,离心是一种常用的分离方法,主要是为了分开不同质量的物体的,多用于微生物实验第二,通过离心,重量大的东西就会沉降下去,上层就不会浑浊,而是清液第三,上层清液是只有蛋白质的外壳的,里面的核酸都沉淀了.第四,不是叫噬菌体,这只是一个实验,证明噬菌体的侵染过程和遗传物质等等,在细胞体内还没有来的急组装的噬菌体部件被分散开来
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离心就是利用离心力,让不同质量的物质分布在距离旋转轴心距离不同的空间,因此能让各种物质分层。离心的话试管底部是距离最远的,因此沉淀了质量最大的物质,这里才应该是分布蛋白质衣壳的地方。蛋白质外壳保留着外形,但已经没有生命了,不能称为噬菌体本身,上清液中应该是小分子物质,比如被消化分解的蛋白质,肽类、氨基酸...
离心式为了将细菌和噬菌体的蛋白质外壳分离开来,在很理想的情况下,上层清野应该只有蛋白质外壳
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