趋化小室 transwell小室 共培养哪个好

Transwell小室肿瘤细胞迁移侵袭趋化共培养小室(15 3460)_产品(价格、厂家)信息_中国食品科技网
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Transwell小室肿瘤细胞迁移侵袭趋化共培养小室(15 3460)
所在区域:北京 北京市 朝阳区
更新时间:
品牌:corning
产品价格:1200元/箱
Transwell小室 肿瘤细胞迁移侵袭 趋化 共培养小室15
Transwell板 Transwell小室 15
货号 膜直径 生长面积 膜孔径 规格 包装
mm 0.33cm2 0.4um 24孔板 4块/箱
mm 0.33cm2 3.0um 24孔板 4块/箱
mm 0.33cm2 5.0um 24孔板 4块/箱
mm 0.33cm2 8.0um 24孔板 4块/箱
mm 0.33cm2 0.1um 24孔板 4块/箱
3401 12mm 1.12cm2 0.4um 12孔板 4块/箱
3402 12mm 1.12cm2 3.0um 12孔板 4块/箱
3403 12mm 1.12cm2 12um 12孔板 4块/箱
3412 24mm 4.67cm2 0.4um 6孔板 4块/箱
3414 24mm 4.67cm2 3.0um 6孔板 4块/箱
3428 24mm 4.67cm2 8.0um 6孔板 4块/箱
Transwell-Clear
具薄的显微镜下透明聚酯膜,经组织培养处理,Transwell-Clear在相差显微镜下提供极好的细胞可见性和单层细胞构造。
货号 膜直径 生长面积 膜孔径 规格 包装
3450 24mm 4.67cm2 3.0um 6孔板 4块/箱
3452 24mm 4.67cm2 8.0um 6孔板 4块/箱
3460 12mm 1.12cm2 0.4um 12孔板 4块/箱
3462 12mm 1.12cm2 3.0um 12孔板 4块/箱
mm 0.33cm2 0.4um 24孔板 4块/箱
mm 0.33cm2 3.0um 24孔板 4块/箱
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BD Matrigel 5ml/10ml基质胶 基底膜 234
产品介绍:BD Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。
不同配方的BD Matrigel可以满足不同的实验要求:
1、 低生长因子(GFR)的Matrigel基底膜基质适用于对基质成分要求严格的实验,如细胞信号通路和细胞因子的研究等。
2、不含酚红的Matrigel适用于荧光检测或显色反应等分析。
3、高浓度的Matrigel适用于研究血管生成、肿瘤细胞迁移和体内肿瘤模型的建立等。
BD Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下,Matrigel聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化,可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达等的研究。
订购指南:
产品描述 规格 特点 货号 报价
BD &MatrigelTM基质基底膜 5 ml 标准型 3
10 ml 标准型 9
5×10 ml 标准型 09
BD &MatrigelTM基底膜基质,无酚红 10 ml 标准型 4
BD &MatrigelTM基底膜基质,GFR,低生长因子 5 ml 标准型 5
10 ml 标准型 3
BD &MatrigelTM基底膜基质,GFR,无酚红 10 ml 标准型 3
MATRIGEL MATRIX HESC-QUALIFIED 5 ml 9
COLLAGEN I RAT TAIL NATURAL 100MG 95
CHAMBER MATRIGEL INVASION & 24WELL DI 1
产品编号:p0265634& 【】【】
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Transwell实验原理与操作步骤
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【进展】TRANSWELL试验原理及方法
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这个帖子发布于8年零16天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请教Transwell 试验原理及方法,请朋友们赐教谢谢
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微孔滤膜培养小室及双室联合培养系统(Transwell 试验):应用微孔滤膜培养小室,进行胶质瘤细胞与内皮细胞的联合培养,可以更接近体内环境,模拟瘤细胞对血管内皮细胞的作用,滤膜上8 μm的微孔可允许内皮细胞穿过到达膜的下面,这些穿越迁移的内皮细胞可粘附于膜的下面,通过计数滤膜下面的细胞可基本反映细胞的迁移情况。附2.SHG-44细胞诱导的迁移实验:用已长满的SHG-44细胞消化后制成悬液,用含10%新生小牛血清的RPMI 1640培养基调节其细胞浓度为1×105个/ml。对不同胶质瘤细胞相关的试验:分别按每孔细胞数为0、1×105个的量传入12孔培养板内,补加含10%新生小牛血清的RPMI 1640培养基至2 ml/孔,置于孵箱内培养。5 h后待细胞贴壁,吸出培养基,以D-Hanks液洗2次,加入含0.5%新生小牛血清M199或含100 μmol/L NDGA及0.5%新生小牛血清 M199液,入孵箱内培养。对不同浓度NDGA相关的试验:按每孔细胞数为1×105个的量传入12孔培养板内,培养5 h后吸出培养基,以D-Hanks液洗2次,加入含0.5%新生小牛血清 M199或各含50、100、150、200 μmol/L NDGA的0.5%新生小牛血清 M199液2 ml/孔,入孵箱内培养。每组3孔,并至少重复3次试验。18 h后取出,装配PET微孔滤膜培养小室(上室,Falcon Cell Culture Insert,Becton Dickinson公司产品)入12孔板(下室)内,同时消化生长良好的内皮细胞,调整其浓度为105个/ml,每个小室内加入0.1 ml (1×104个细胞),轻轻振荡使之分布均匀,放入孵箱内进行胶质瘤-内皮细胞的联合培养。6 h后取上室,以棉签拭去小室滤膜上的内皮细胞。PBS洗后将小室置于95%乙醇中固定10 min,PBS洗5 min 2次,苏木素染色2~5 min,水洗,或再加伊红染3~5 min,蒸馏水洗后倒置于普通显微镜下随机计数(×100)13个视野内的膜下面细胞数。同时计算细胞迁移的抑制率:细胞迁移的抑制率=(对照组迁移细胞数-NDGA组迁移细胞数)/对照组迁移细胞数×100%。
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1.Transwelltrans-这个词根有转移、转运、穿过等意思,well有小室的意思,可以从字面上理解,这是一类有通透性的杯状的装置,根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍,可以认为这是一种膜滤器(Membrane filters),也可认为是一种有通透性的支架(permeable supports)。更准确地说,Transwell应该是一种实验技术,这项技术的主要材料是Transwell小室(Transwell chamber,Transwell insert),其外形为一个可放置在孔板里的小杯子,不同厂家对Transwell会有不同的命名,而不同型号也可有不同形状,不同大小,根据实验需要,可有不同选择。但无论是何种外形,其关键部分都是一致的,那就是杯子底层的一张有通透性的膜,而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。这层膜带有微孔,孔径大小有0.1-12.0um,根据不同需要可用不同材料,一般常用的是聚碳酸酯膜(polycarbonate membrane)。将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。当然不同细胞其体积不同,具体选择时要考虑到细胞大小。
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版块中有比较详尽的帖子做介绍,连接如下耐心看看基本上就没问题啦!呵呵
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非常感谢众位大侠指点
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很好的帖子
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关于丁香园RTCA与Transwell在迁移浸润实验的对比
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RTCA与Transwell在迁移浸润实验的对比
(发布日期: 13:35:27)&
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RTCA与Transwell在迁移浸润实验的对比
RTCA技术简介:&&& 原理:实时无标记动态细胞分析技术(RTCA, Real&Time&Cellular&Analysis)可实现实时、动态、定量跟踪细胞迁移及浸润的动力学检测。该技术采用特殊工艺,将微电子细胞传感器芯片整合到细胞浸润迁移板(CIM&Plate)的微孔膜下层。当细胞受到下室趋化因子的影响而穿过微孔膜并贴壁生长于微电极表面时,通过对电极阻抗值的检测从而便利并精确地实现对细胞迁移及浸润的检测。
RTCA技术细胞迁移及浸润实验步骤:1、取出CIM Plate检测板,上室包被一定浓度的matrigel,CO2培养箱中放置约4小时。(细胞浸润实验所需,迁移实验无此步骤)2、下室加入含血清或其它趋化因子的培养基,以加入无血清的培养基为对照。上下室装配后,上室中加入无血清培养基并在CO2培养箱中平衡1小时。3、将CIM&Plate检测板放入检测台上(检测台已预先放入CO2培养箱中),测定背景阻抗值。4、将一定浓度梯度的细胞接种到CIM&Plate检测板的上室里,室温放置半小时。5、将CIM&Plate检测板放入检测台上,即可获得细胞迁移或浸润的实时动力学曲线。RTCA实时无标记技术细胞迁移及浸润实验检测流程:
实时监测不同浓度的matrigel 对Hela细胞浸润结果
Transwell简介:&&& 原理:Transwell实验主要是利用一类有通透性的杯状装置(transwell 小室)实现对细胞迁移及侵袭的检测。该技术的主要材料为transwell小室,其外形为一个可放置在孔板里的小杯子,杯子底层有一张具有通透性的膜。小室内为上室,培养板内为下室。细胞接种于上室,由于聚碳酸酯膜的通透性,下层培养液的成分可影响到上室内的细胞,从而可研究下层培养液成分对细胞生长、运动等的影响。&&& Transwell细胞迁移及侵袭的实验结果,通常采用直接计数法(直接人工读取穿膜的细胞数量)或间接计数法(MTT或荧光试剂标记等)。
Transwell细胞迁移及浸润(侵袭)实验步骤:1、Transwell小室制备(细胞浸润实验所需,迁移实验无此步骤)(1)包被基底膜(2)水化基底膜2、制备细胞悬液,具体细胞密度需要通过多次实验自己摸索。3、细胞接种到transwell小室中,含趋化因子的培养基加入细胞培养板中。4、细胞培养12-48小时(主要依癌细胞迁移及侵袭能力而定)。5、结果统计:(1)直接计数法:&&A.用棉签擦去基质胶和上室内的细胞&&B.染色:常用染色方法有结晶紫染色、台盼兰染色、Giemsa染色、苏木精染色、伊红染色。&&C.细胞计数:选取5-10个视野计数。(2)间接计数法:&&A.用棉签擦去基质胶和上室内的细胞&&B.细胞培养板中加入含0.5mg/ml&MTT的培养基,将小室置于其中,膜浸没在培养基中,37℃&4小时后取出。&&C.加入DMSO,将小室置于其中,使膜浸没在DMSO中,振荡10分钟,使甲H充分溶解。取出小室,酶标仪上测OD值。
Transwell&细胞迁移实验结果图片(很难做到对细胞准确计数):
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电话:010-31
传真:010-
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