大蒜素初提物对脂代谢三基因突变小鼠血脂代谢及肝脏生理病变的影响--《浙江大学》2006年硕士论文
大蒜素初提物对脂代谢三基因突变小鼠血脂代谢及肝脏生理病变的影响
【摘要】：动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是由多种因素作用形成的慢性病理变化过程,其发生发展与多基因异常以及遗传因素与环境因素的相互作用有关。本实验室首次成功建立了三基因突变(apoE~(-/-)/LDLR~(-/-)/Lepr~(db/db))小鼠模型,并从遗传因素和饮食因素入手,对该小鼠的生物学特征、AS病理生理特点及发生发展机制进行了初步研究,其病理动物模型实验表明,伴发有血脂代谢异常和肝脏病理性病变。
在前期研究结果的基础上,本论文进一步研究了复杂饮食因素(20%蔗糖饮水、高脂高胆固醇饲料)对该小鼠对血脂、血糖及血浆中主要脂蛋白成分含量的变化、脂代谢重要器官肝脏的病理形态学改变的影响,大蒜素的提取工艺及其分析检测方法并在此基础上初步研究大蒜素对脂代谢相关三基因小鼠AS发生发展过程的影响。
从实验中可以得到下列结果:
1.采用体积分数为90%的乙醇溶液为浸提剂,大蒜素的萃取效果最好,且采用高效液相色谱法测定样品中大蒜素含量方法简便可靠,利于实验研究和生产实践中应用。
2.大蒜素提取物灌胃给药处理后的ALO小鼠,其TC、LDL-C水平均要比同样饮食条件的蒸馏水对照组小鼠有一定程度的降低,尤其LDL-C的下降幅度更为大一些。但同样饮食条件的小鼠在大蒜素给药处理后HDL-C、TG水平基本保持一个相近的水平,下降幅度相对较小。
3.大蒜素给药处理后的各组ALO小鼠的体重变化没有明显的影响,在日常观察中,大蒜素灌胃给药处理的各组小鼠除第1周外后续各周的食欲并未因此受到影响,每日摄食量基本与同样饮食条件的对照组小鼠保持一个相近的水平。
4.大蒜素给药处理后的ALO小鼠在普通饮食条件下与蒸馏水对照组小鼠相比肝脏脂肪变性程度略有减轻,但并不明显。而高脂高胆固醇饮食组和高糖高脂高胆固醇饮食组的ALO小鼠则由于大蒜素的药理作用使得肝脏脂肪变性有较明显的减缓,表现在脂肪滴大小的减少以及脂肪滴在肝脏细胞内的充斥程度的降低。
【关键词】：
【学位授予单位】：浙江大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2006【分类号】：R285【目录】：
中文摘要6-7
Abstract7-8
第一章 文献综述8-24
1. 大蒜的化学成分及有效活性成分8-9
1.1 大蒜的化学成分8-9
1.2 大蒜提取物中的有效活性物质9
2. 大蒜素的理化性质9
3. 大蒜素的产生机理9-10
4. 大蒜素的提取及检测方法10-16
4.1 大蒜素的提取工艺10-12
4.1.1 酶法水蒸气蒸馏法10-11
4.1.2 溶剂提取法11
4.1.3 超临界萃取11-12
4.2 大蒜素的检测方法12-15
4.2.1 色谱法13-14
4.2.2 生物检侧法14-15
4.2.3 定硫法15
4.3 大蒜素稳定性研究及抗氧化实验15-16
4.3.1 大蒜素稳定性研究15-16
4.3.2 大蒜素抗氧化实验16
5. 动脉粥样硬化的基础研究16-20
5.1 动脉粥样硬化的危害性17-18
5.2 动脉粥样硬化病变因素18
5.3 脂类与动脉粥样硬化关系的研究18-19
5.4 动脉粥样硬化的分子水平的研究19-20
6. 心血管疾病小鼠模型的研究概况20-21
6.1 喂养法建立的动物模型20
6.2 转基因法建立的动物模型20
6.3 机械损伤法建立的动脉模型20-21
7. 大蒜素的药理作用21-22
参考文献22-24
第二章 大蒜素初提物的分析研究24-29
1. 材料与方法24-26
1.1 实验材料24
1.2 实验设备24
1.3 实验方法24-26
1.3.1 大蒜初提物中大蒜素含量的测定24-25
1.3.2 大蒜素的高效液相色谱分析含量25-26
1.3.3 大蒜素的定硫法测定含量26
1.3.4 不同乙醇浓度对大蒜素提取率的影响26
2. 结果与分析26-28
2.1 测定波长的选择26-27
2.2 系统适应性研究结果27
2.3 标准曲线的绘制27
2.4 精密度及稳定性试验分析27-28
2.5 高效液相色谱法与定硫法测定大蒜素结果比较28
2.6 不同乙醇浓度对大蒜素提取率的影响28
3. 讨论与总结28-29
第三章 脂代谢三基因突变小鼠模型的建立和筛选29-36
1 材料与方法29-33
1.1 实验材料29-30
1.1.1 动物来源29
1.1.2 试剂耗材29-30
1.1.3 实验器材30
1.2 三基因突变小鼠的建立30
1.3 小鼠基因型的鉴定30-33
2 结果与讨论33-35
3 结论35-36
第四章 大蒜素对 ALO小鼠血脂代谢及肝脏病变的影响36-56
1 材料与仪器36-37
1.1 动物模型36
1.2 试剂仪器36-37
2 实验方法37-39
2.1 小鼠生理生化研究37-38
2.1.1 血液生化指标37
2.1.2 小鼠体重测量37-38
2.1.3 肝脏冰冻切片38
2.2 分组实验设计38-39
2.3 小鼠给药方式39
3 结果分析39-52
3.1 小鼠血脂、血糖和血浆主要脂蛋白水平的变化情况39-45
3.1.1 蒸馏水对照各组小鼠血脂生化各项指标变化41-42
3.1.2 大蒜素给药各组小鼠血脂生化各项指标变化42-44
3.1.3 大蒜素给药组与对照组血脂生化各项指标对比44-45
3.2 小鼠平均体重的变化情况45-47
3.3 肝脏切片光学显微镜观察47-52
3.3.1 肝脏冰冻切片油红0染色47
3.3.2 肝脏冰冻切片 HE染色47-52
4 讨论52-56
4.1 ALO小鼠血脂代谢异常分析讨论52-53
4.2 ALO小鼠体重变化规律讨论53-54
4.3 小鼠肝脏病理形态学分析讨论54-56
第五章 结语与展望56-57
参考文献57-61
硕士期间撰写或发表的主要论文62-63
已发表论文63-69
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京公网安备75号转移性肝癌患者肝脏大小与其生存时间的关系--《国外医学.内科学分册》1982年12期
转移性肝癌患者肝脏大小与其生存时间的关系
【摘要】：正 恶性肿瘤患者的生存时间一方面取决于原发肿瘤的性质、范围和部位,另一方面则视其有无化疗之可能。如肿瘤已转移至肝脏,生存时间如何,所知尚少。Baden 等发现结肠直肠癌肿转移至肝脏后,患者生存时间为6～12个月,在乳癌则为6个月。Nielsen 等指出直肠癌患者由于其肝脏转移增多,生存时间亦见缩短。肝脏因癌转移而增大、变硬,由此推测,从肝脏的触诊结果可以推断患者的生存时间。作者对348例肝脏转移癌忠者(男
【关键词】：
【正文快照】：
恶性肿瘤患者的生存时间一方面取决于原发肿瘤的性质、范围和部位,另一方面则视其有无化疗之可能。如肿瘤已转移至肝脏,生存时间如何,所知尚少。Baden等发现结肠直肠癌肿转移至肝脏后,患者生存时问为6~12个月,在乳癌则为6个月。Nielsen等指出直肠癌患者由于其肝脏转移增多,生
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京公网安备75号酪蛋白酶解物和胰岛素对新生仔猪肝脏功能发育的影响--《南京农业大学》2004年硕士论文
酪蛋白酶解物和胰岛素对新生仔猪肝脏功能发育的影响
【摘要】：为探索乳源性活性肽对新生仔猪肝脏功能发育的影响，选用乳中自然存在的胰岛素和酪蛋白酶解产生的混合多肽进行试验，以新生正常仔猪和新生子宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation，IUGR)仔猪作为试验对象。试验选择“苏太猪”初生仔猪13窝(每窝1-2头正常，1-2头IUGR)共50头，分为新生组(N)、牛乳组(M)、胰岛素组(Ⅰ)、酪蛋白组(C)和酪蛋白酶解物组(CH)，每组5头正常仔猪、5头IUGR仔猪，N组仔猪出生后立即宰杀取样。M组喂牛乳，Ⅰ组在牛乳中添加66IU·L~(-1)胰岛素，C组用1.5％酪蛋白溶液取代10％(v／v)的牛乳，CH组用1.5％酪蛋白酶解液取代10％(v／v)的牛乳，人工饲喂3天，每3小时喂一次，饲喂量为每次30mL·kg~(-1)BW，3天后宰杀取样，测定肝脏和血浆中生化指标和酶的活性。
试验结果表明，人工饲喂3天后，仔猪肝脏中蛋白质含量CH组(正常仔猪216.57±48.38mg·g~(-1)，IUGR仔猪231.66±31.95mg·g~(-1))和C组(正常仔猪160.74±38.86mg·g~(-1)，IUGR仔猪184.49±19.54mg·g~(-1))都极显著高于N组(正常仔猪116.64±10.56mg·g~(-1)，IUGR仔猪109.06±13.91mg·g~(-1))(P＜0.01)，CH组显著高于C组(P＜0.05)，IUGR仔猪有高于正常仔猪的趋势(P＞0.05)。血浆中尿素氮浓度，CH组(正常仔猪104.35±35.18mg·L~(-1)，IUGR仔猪230.67±84.45mg·L~(-1))有低于C组(正常仔猪132.73±41.78mg·L~(-1)，IUGR仔猪306.95±72.26mg·L~(-1))的趋势(P＞0.05)，正常仔猪有低于IUGR仔猪的趋势(P＞0.05)。肝脏GOT活性，IUGR仔猪CH组显著高于C组(P＜0.05)，正常仔猪CH组有高于C组的趋势(P＞0.05)。饲喂3天后，四组仔猪肝糖原含量均极显著下降(P＜0.01)，血浆中FFA和胰岛素浓度、肝脏中LDH、GPT、CAT活性极显著提高(P＜0.01)，而血糖浓度、肝脏中脂肪酶、HL、G-6-PD、ICD、SOD活性没有显著变化(P＞0.05)。血浆中胰岛素水平，正常仔猪Ⅰ组(10.26±2.02mIU·L~(-1))显著高于M组(7.81±1.34mIU·L~(-1))(P＜0.05)，IUGR仔猪Ⅰ组较M组略有提高(P＞0.05)。
结果表明，仔猪出生后肝脏蛋白质、糖、脂代谢以及肝脏抗氧化功能发生着激烈变化，酶解酪蛋白多肽可促进仔猪肝脏蛋白质的合成，对IUGR仔猪生后发育具有一定的补偿作用，酶解酪蛋白多肽和胰岛素对仔猪糖、脂代谢以及肝脏抗氧化功能均无显著影响，胰岛素对仔猪肝脏蛋白质代谢影响不显著。
【关键词】：
【学位授予单位】：南京农业大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2004【分类号】：S828【目录】：
中文摘要6-7
英文摘要7-9
部分缩写词中英文对照9-10
文献综述12-34
一 乳源性活性肽及其应用12-21
1 乳中自然存在的活性肽12-15
2 酪蛋白中的活性肽15-19
3 酪蛋白酶解物对机体的生物活性作用19-20
4 口饲胰岛素对机体的生物活性作用20-21
二 新生动物肝脏及其功能发育21-23
1 早期肝脏重量的变化21
2 肝脏酶系的发育21-22
3 肝脏内分泌功能的发育22
4 肝脏抗氧化功能的发育22
5 肝脏其他功能的发育22-23
三 胎儿子宫内发育迟缓及其物质代谢23-27
1 引起胎儿子宫内发育迟缓的原因23-24
2 子宫内发育迟缓试验动物模型的获得24-25
3 物质代谢对子宫内发育迟缓的影响25-27
参考文献27-34
试验研究34-70
试验一 酪蛋白酶解物对新生仔猪肝脏功能发育的影响34-56
1 材料与方法34-39
2 结果与分析39-48
3 讨论48-53
参考文献53-56
试验二 胰岛素对新生仔猪肝脏功能发育的影响56-70
1 材料与方法56-57
2 结果与分析57-65
3 讨论65-68
参考文献68-70
全文结论70-71
攻读学位期间发表的论文74
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京公网安备75号表皮生长因子受体信号通路调控人肝细胞癌细胞增殖分子机制的研究--《南京医科大学学报(自然科学版)》2007年06期
表皮生长因子受体信号通路调控人肝细胞癌细胞增殖分子机制的研究
【摘要】：目的:研究人肝细胞癌中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达及其细胞内信号转导通路,探讨EGFR在促进肿瘤细胞增殖中的作用。方法:用免疫组化实验检测癌组织中EGFR的表达;用EGF和AG1478处理人肝癌细胞HuH7;用Western blot法检测EGFR、p-EGFR、p-ERK蛋白表达;用WST法检测细胞增长率。结果:17例HCC患者癌组织中,EGFR的阳性表达率为100%;HuH7中EGFR的表达明显高于正常肝细胞HL-7702。外源性EGF(10μg/L)处理后,ERK和EGFR的磷酸化水平提高,同时细胞生长率提高9.2%,而此作用能被AG1478(20μmol/L)阻断。结论:人肝细胞癌中,EGFR高表达,EGFR的激活主要通过受体磷酸化完成,活化的p-EGFR可能通过ERK/MAPK下游信号通路传递信息,调控人肝细胞癌的发生发展。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R735.7【正文快照】：
人肝细胞癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,我国此病年病死率位世界之最[1]。表皮生长因子受体(EGFR)是ErbB家族的一员,即ErbB1,由胞外配体结合区、跨膜区和胞内区3部分组成,胞内区是其发挥作用关键部位[2]。临床研究显示,EGRF在许多上皮来源的肿瘤细胞,如乳腺癌、非小细胞性肺
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