君，已阅读到文档的结尾了呢~~
基本技能实验三 柱色谱柱色谱,..
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
基本技能实验三 柱色谱
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer-4.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口1、 薄层板的制备（湿板的制备）
&&&&薄层色谱用的吸附剂和支持剂：薄层吸附色谱的吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶；分配色谱的支持剂为硅藻土和纤维素。
&&&&硅胶是无定形多孔性物质，略具酸性，适用于酸性物质的分离和分析。薄层色谱用的硅胶分为：“硅胶H”―不含粘合剂；“硅胶G”―含煅石膏粘合剂；“硅胶HF254”―含荧光物质，可用于波长为254nm紫外光下观察荧光；“硅胶GF254”―既含煅石膏又含荧光剂等类型。
&&&&与硅胶相似，氧化铝也因含粘合剂或含荧光剂而分为氧化铝G、氧化铝GF254及氧化铝HF254。
&&&&粘合剂除上述的煅石膏（半水合硫酸钙：2CaSO4?H2O）外，还可用淀粉、羧甲基纤维素钠。
&&&&通常将薄层板分为硬板（加粘合剂）和软板（不加粘合剂）
&&&&薄层吸附色谱和柱吸附色谱一样，化合物的吸附能力与它们的极性成正比，具有较大极性的化合物吸附较强，因而Rf值较小。因此利用化合物极性的不同，用硅胶和氧化铝薄层色谱可将一些结构相近或、反异构体分开。
&&&&薄层板制备的好坏直接影响色谱的结果。薄层应尽量均匀且厚度（0.25―1mm）要固定。否则，在展开时前沿不齐，色谱结果也不易重复。
（1）平铺法：用薄层涂布器（P.105图3.32）涂布，它适合于科研工作中数量较大要求较高的需要
（2）浸渍法：把两块干净的玻片叠合，浸入调制好的吸附剂浆料中，取出后分开、凉干。
（3）简易平铺法（倾注法）：将配制好的浆料倾注到清洁干燥的载玻片上，拿在手中轻轻的左右摇晃，使其表面均匀平滑，在室温下凉干后进行活化。
&&&&本实验用此法制备薄层板5片：吸附剂为硅胶GF254，用0.5%的羧甲基纤维素钠水溶液调成浆料。
2、薄层板的活化
&&&&将涂布好的薄层板置于室温凉干后，放在烘箱内加热活化，活化条件根据需要而定。硅胶板一般在烘箱中渐渐升温，维持105―110℃活化30min。氧化铝板在200℃烘4h可得到活性为Ⅱ级的薄板，在150―160℃烘4h可得活性为Ⅲ―Ⅳ级的薄板。氧化铝板与硅胶板的活性测定见P.106。
通常将样品溶于低沸点溶剂（丙酮、甲醇、乙醇、氯仿、苯、乙醚和四氯化碳）配成1%的溶液，用内径小于1mm管口平整的毛细管点样：
（1）先用铅笔在距薄层板一端1cm处轻轻划一横线作为起始线，然后用毛细管吸取样品，在起始线上小心点样，斑点直径一般不超过2mm。
（2）若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。
（3）若在同一板上点几个样，样点间距离应为1―1.5cm。
（4）点样要轻，不可刺破薄层。
&&&&本实验所用溶剂为乙醚；
&&&&先在一薄层板上点两个样（二茂铁与乙酰二茂铁，注意两点的距离），在另一薄层板上点粗乙酰二茂铁样品，待用。
&&&&在薄层色谱中，样品的用量对物质的分离效果有很大影响，所需样品的量与显色剂的灵敏度、吸附剂的种类、薄层的厚度均有关系。样品太少，斑点不清楚，难以观察，但样品量太多时往往出现斑点太大或拖尾现象，以至不易分开。
&&&&薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来考虑。凡溶剂的极性越大，则对一化合物的洗脱能力也越大，即Rf值也越大（如果样品在溶剂中有一定溶解度）。薄层色谱用的展开剂绝大多数是有机溶剂，各种溶剂极性见P.112【3.9.2（3）】。
&&&&薄层色谱的展开，需要在密闭容器中进行。为使溶剂蒸气迅速达到平衡，可在展开槽内衬一滤纸。常用的展开槽有：长方形盒式和广口瓶式【见P.107图3.33（1）和（2）】。展开方式有：
（1）上升法 将色谱板垂直于盛有展开剂的容器中，适合于含粘合剂的色谱板。
（2）倾斜上行法 色谱板倾斜10―15°角【图3.33（1），适用于干板或无粘合剂软板的展开】；色谱板倾斜45―60°角【图3.33（2），适用于含有粘合剂的色谱板。
本实验采用此法展开，展开剂为石油醚：乙醚＝3：1的混合溶剂。
（3）下降法 （见图3.34） 用滤纸或纱布等将展开剂吸到薄层板的上端，使展开剂沿板下行，这种连续展开的方法适用于Rf值小的化合物。
（4）双向色谱法 将样品点在方形薄层板的角上，先向一个方向展开，然后转动90°角的位置，再换另一种展开剂展开。适合于成分复杂的化合物分离。
5、显色凡可用于纸色谱的显色剂都可用于薄层色谱。薄层色谱还可使用腐蚀性的显色剂如浓硫酸、浓盐酸和浓磷酸等。
&&&&对于含有荧光剂（硫化锌镉、硅酸锌、荧光黄）的薄层板在紫外光下观察，展开后的有机化合物在亮的荧光背景上呈暗色斑点。也可用卤素斑点试验法来使薄层色谱斑点显色（见P.107）。
&&&&本实验样品本身具有颜色，不必在荧光灯下观察。
6、用 TLC跟踪有机反应
&&&&在同一块板上点上原料样和反应混合物样（均需配成稀溶液），按上述方法进行展开和显色，记下原料样的斑点位置和反应混合物样中相应斑点的位置和大小。过一定时间后，再取反应混合物样液点样、展开、显色，如发现反应混合液样中相应于原料斑点的位置处，无斑点或斑点变小，则说明反应已经完成或接近完成，所以依此可跟踪有机化学反应。这在有机合成上很有意义。
版权所有：广西师范大学化学化工学院有机教研室 上传我的文档
 下载
 收藏
 下载此文档
正在努力加载中...
现代色谱分析期末考试题库含答案
下载积分：680
内容提示：现代色谱分析期末考试题库含答案
文档格式：DOC|
浏览次数：17|
上传日期： 13:40:45|
文档星级：
该用户还上传了这些文档
现代色谱分析期末考试题库含答案
官方公共微信制备色谱_百度百科
制备色谱是指采用色谱技术制备纯物质，即分离、收集一种或多种色谱纯物质。制备色谱中的“制备”这一概念指获得足够量的单一化合物，以满足研究和其它用途。制备色谱的出现，使色谱技术与经济利益建立了联系。制备量大小和成本高低是制备色谱的两个重要指标。其中，气相制备色谱主要用于石油化工产品和挥发性天然产物的色谱纯样品制备。
制备色谱简介
制备色谱系统
很多初接触领域的朋友对制备色谱这个名词比较陌生。其实，在化学化工医药等广泛采用的层析法以及就是最为典型的制备色谱，换句话说，将分析色谱的进样量增大，同时得出大量的所需物质（馏分）的过程就可以称为制备色谱。分析色谱的目的，是分析出混合物中一个（或者几个）纯物质的含量。制备色谱的目的，是从混合物中得到纯物质。而制备色谱系统则是利用制备色谱的思想高效能得到纯化物质的多个分析测试设备联用的总称。右图便是一套典型的制备色谱系统。[1]
制备色谱构成
正如右图所示，传统的制备色谱一般由一台可以连续输送液体的恒流泵、紫外检测仪与色谱柱构成，其中最重要的部件是价格不一，款式多样的色谱柱，这也是影响最终制备效果的关键性环节。柱子有多种类型，不仅材质不一，填料也有很多学问，下面简要的说说关于柱子的一些情况：
各种规格的玻璃柱子在实验室里头很容易得到，而且价格低廉，但玻璃柱子致命的弱点是它能承受的压力很小，且非常容易破碎。当由于压力太小而导致流动相流速很慢的时候，高位液面或加高压空气（或者氮气）的采用是一个简单的解决办法。在底下加真空，也能在一定程度上解决这个问题。
不锈钢柱子具有良好的耐腐蚀、抗压力性能，但其价格相对很贵。如果，只有很小的分离任务且经费也允许，市面上直径为1cm的小型制备柱就是首选。
有机玻璃柱子也能抗压力耐腐蚀，相对不锈钢柱子而言，它是半透明的，可以看到液体的运行状态，对有色的物质其特点就更为突出。
硅胶、键合固定相（如C18）、离子交换树脂 、聚酰胺、 氧化铝、 凝胶等都可以作为色谱柱的填料。 有不少文献报道，对填料可以进行一下处理提高了分离效果，如，对硅胶进行的硝酸银（或）处理。
1 制备色谱到底是什么?
(1)分析色谱的目的，是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的，是从混合物中得到纯物质。
为了加快分离的时间与提高分离的效率，制备色谱的的进样品量很大，导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大，也就必须加大色谱柱填料，增大制备色谱的直径和长度，使用的相对多的流动相。
然而，当色谱柱上样品负载加大的时候，往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱，要解决容量与柱子效果之间的矛盾，对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料，少用溶剂，要尽可能多的得到产品。
(2)样品的前处理：
制备色谱柱子由于处理的样品多，比分析柱子更容易受污染，所以，必要的前处理就显得非常的必要。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法，如果用得上，而且还不是很麻烦，就要尽可能多的采用以去掉杂质。
(3)固定相的选择
硅胶、键合固定相(如C18)、离子交换、、、等都可以作为色谱柱的填料。 有不少文献报道，对填料可以进行一下处理提高了分离效果，如，对硅胶进行的硝酸银(或缓冲液)处理。
(4)装柱方法的选择 根据固定相颗粒度和柱子的尺寸，采用不同的装柱方法，往往装填越好分离效果越好。装柱效果跟填料的颗粒度关系很大，颗粒度的减少会导致装柱的难度。一般来说，颗粒直径小于20-30um的固定相采用湿法装填。所谓“敲击-装填”技术适用于颗粒直径大于25um的固定相。湿法的目的是迫使相对稀松的 固定相悬浆以高速装入色谱柱子，从而减少空隙的形成。然而，当柱直径大于20mm，所加压力为30-40bar时，高压悬浆装填技术就变得十分复杂。为将小颗粒固定相装入更大得制备型色谱柱，可采用柱长压缩技术。这种方法，先将固定相悬浆(或偶尔是干填充物)装入柱中加压，利用物理方法将其压紧。压紧的方法有两种：径向压缩和轴向压缩。 湿法装柱需要一定的设备，在柱子填完后，应用有柱效的测量，对柱效低的柱子应该重填。
(5)流动相的选择
除了和分析色谱同样的考虑外，在选用流动相时，要考虑色谱分离后面加有旋转蒸发等二次分离操作。一般来说，不宜采用高毒性溶剂，对多元溶剂要尽可能的少用。
如果产品中含有大量溶剂，溶剂的纯度也要考虑在其中。
(6)加样的方法
可以采用以下方法之一进样。-用注射器进样-用旋转阀进样-通过六通阀进样-通过主泵进样-通过辅泵进样-固体上样
(7) 泵的选用
生产制备色谱泵的厂商很多。根据有无脉冲、能承受的最大压力、控制的精度、售后服务等来选择泵。
(8)检测器的选用
一般的分析池的最大允许流速仅为5 mL/min 或者10mL/min。而专门的制备池的最大允许流速可为150mL/min。有时，采用旁路分离管，将少量流体导入分析池进行检测，是一个不错的办法，但其浓度的误差会相对较大。
(9)组分保留时间的估计
用分析柱子在同等色谱条件下(同样的固定相和流动相)测定保留时间后，按照单一组分的线流速(不是体积流速)一定，通过计算可以知道组分的大致保留时间区域。
分析谱图的峰形状，对确定保留时间也有很大的参考价值。
(10)产品的收集
手工馏分收集费时费力，自动馏分收集器有很大的方便。许多实验室和工厂都采用了馏分收集器。
(11)超载、边缘切割、中心切割、放大技术与非线性效用
在制备色谱中，因为没有必要达到分析色谱那样的分离度，可以在一定范围内大大加大进样的浓度和体积。在做分离的时候，也有一些分析色谱的时候，不能用到的技巧。因为篇幅关系，不在这里叙述。
(12)柱转换技术
通过接头或者阀门，实现柱子的简单延长，或者比较方便地实现对其中一个(或几个)组分的精制。
(13)比较新的制备色谱技术
模拟移动床可以连续进样，并可以利用边缘切割效用，而且采用了柱切换技术，能更好的利用溶剂和填料，已经应用于工业化生产。其理论和技术也日益完善。
迎头色谱、超临界流体色谱、逆流色谱环形色谱、气相制备色谱等在科研和工业生产中也得到了应用。[1]
制备色谱全新方法
★（ high-speed countercurrent chromatography ， HSCCC ）是 20 世纪 80 年代发展起来的一种连续高效的液—液分配色谱分离技术， 它不用任何固态的支撑物或载体。 它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量固定相。
由于不需要固体支撑体，物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现，因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等，不仅使样品能够全部回收，回收的样品更能反映其本来的特性，特别适合于天然生物活性成分的分离。而且由于被分离物质与液态固定相之间能够充分接触，使得样品的制备量大大提高，是一种理想的制备分离手段。
它相对于传统的固—液柱色谱技术，具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量大、费用低等优点。HSCCC 技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术，已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域， 特别在天然产物行业中已被认为是一种有效的新型分离技 术；适合于中小分子类物质的分离纯化。
我国是继美国、日本之后最早开展逆流色谱应用的国家，俄罗斯、法国、英国、瑞士等国也都开展了此项研究。美国 FDA 及世界卫生组织（ WHO ）都引用此项技术作为抗生素成分的分离检定， 90 年代以来，高速逆流色谱被广泛地应用于天然药物成分的分离制备和分析检定中。
4.应用实例　这里简单罗列一些运用逆流色谱技术做制备色谱的文献
运用高速逆流色谱制备分离和纯化何首乌中的化学成分研究
运用高速逆流色谱制备分离和纯化中药虎杖的五种化合物
运用高速逆流色谱制备分离和纯化蛇床子中香豆素成分
运用高速逆流色谱制备分离纯化当归中香豆素组分
运用高速逆流色谱制备分离和纯化白花前胡类香豆素的有效成分
运用高速逆流色谱制备分离和纯化补骨脂中的补骨脂素和异补骨脂素
运用高速逆流色谱分离纯化秦皮中香豆素成分
运用高速逆流色谱分离纯化紫花前胡香豆素成分
运用高速逆流色谱制备分离和纯化百里香中两种香豆素成分
运用高速逆流色谱制备分离姜黄根茎精油中的吉马酮和莪术二酮
运用高速逆流色谱制备分离和纯化木香内酯和去氢木香氢内酯
西瑞香素的超临界流体萃取的正交试验设计，运用高速逆流色谱法从瑞香狼毒中分离7-methoxy-daphnoretin和1,5-diphenyl-1-pentanone
运用高速逆流色谱法从茵陈中大量分离纯化香豆素二甲醚
运用高速逆流色谱法从乌药中分离纯化乌药内酯和钩樟烯醇
高速逆流色谱分离制备川芎油中的Z-藳本内酯和洋川芎内酯A
高速逆流色谱分离制备丹参脂溶性成分 [1]
．搜搜[引用日期]【图文】薄层色谱_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
评价文档：
上传于||暂无简介
大小：532.00KB
登录百度文库，专享文档复制特权，财富值每天免费拿！
你可能喜欢