【原创】广府古城：我国北方惟一的旱地水城
广府古城位于河北省邯郸市东北约20公里，始建于隋唐以前，春秋时期称曲梁，距今已有2600多年的历史，是中国北方惟一的旱地水城，为全国重点文物保护单位。古城周长4.5公里，墙高10米，厚8米，城内面积1.5平方公里，分布30多条街道。广府古城原为土城，面积六里十三步，元朝增为九里十三步。明嘉靖二十一年（1542年），广平府知府陈俎调集九县民工，历时十三年，将土城砌为砖城，四门筑有城楼，四角建有角楼，并有垛墙876个，殊具特别的是在四门之外尚建有瓮城相守，地道的关防深锁，固若金汤。古城现存两瓮城、六城门，东有阳和门，西曰保和门，南称阳明门，北为贞元门，城外有护城河和永年洼环绕。
地方特色小吃：永年酥鱼，就是这样一罐罐放在火上煮出来的。
永年酥鱼，素以色香味美、骨酥肉嫩、溢香爽口、久吃不腻
永年酥鱼是河北邯郸的汉族小吃之一，属于冀菜系。不知始自何年。民国年间，酥鱼出售成了各饭馆热门食品，供不应求。人们吃鱼最担心的是怕鱼刺扎嗓。不知是那个师傅，创造一种制作方法，再大的鱼骨也能酥烂，而鱼形照样完整如初，鱼肉味道鲜美。
饭店前摆放着这样一排排的煤球炉，砂锅里压上重物文火煮
武家大院，正在翻修中
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以上网友发言只代表其个人观点，不代表新浪网的观点或立场。富集文库法开发谷子的微卫星分子标记--《河北师范大学》2008年硕士论文
富集文库法开发谷子的微卫星分子标记
【摘要】：
谷子(foxtail millet,Setaria Italica Beauv.)属禾本科(Gramineae)狗尾草属[Setaria (L.)Beauv.],是世界上最古老的农作物,并且作为一种重要的粮食作物,在我国北方粮食生产中占有较重要的地位。谷子许多特殊有益性状是其他禾谷类作物所没有的,如:抗旱性、耐盐性、高效水利用、耐瘠性、多种抗病抗虫性、人体必需营养相对均衡等。但由于谷子只是区域重要性作物,相对于禾本科其他作物,如水稻、玉米、小麦等,其影响小,生物技术研究也相对较少,特别是特异性分子标记、功能基因组研究等领域基本为空白。
微卫星(SSR)是指由1~6个核苷酸为单位、呈串联重复的DNA序列,广泛分布于真核生物的整个基因组中。微卫星标记具有共显性、多态性高、重复性好等特点,是较为理想的分子标记,被广泛地用于群体遗传研究、遗传图谱构建、数量性状基因QTL定位、辅助选择等。由于谷子尚未开发SSR标记,限制了对这些领域的研究,因此急需开发适于谷子研究的SSR标记,构建谷子的遗传连锁图谱,并对谷子及近缘种群进行遗传多样性分析,为谷子功能基因分析、克隆及分子标记辅助育种等工作奠定基础。
本研究的目标是应用微卫星富集文库,开发谷子的SSR标记:以生物素标记的(AC)_(15)、(AT)_(15)、(AG)_(12)、(TG)_(12)和(TC)_(12)为探针进行杂交,借助磁珠固定筛选出含微卫星的Sau3AI酶切片段,洗脱转入载体后构建了富集相应微卫星的5个文库;从5个文库中共得到2333个克隆,使用相应载体克隆位点两端的M13+/-及SP6L/T7L引物和相应的微卫星筛选探针序列(AC)_(10)、AT)_(15)、(AG)_(10)、(TG)_(10)和(TC)_(10)分别为混合引物对这些克隆进行PCR二次筛选,鉴定出含SSR序列的克隆。将经过二次筛选获得的1122个阳性克隆进行测序,获得了1106个序列,其中含微卫星的克隆有846个(76.5%);排除冗余序列后得到417个非同源性克隆,共含有463个微卫星位点;对微卫星种类进行分析,其中(AC/TG)_n、(CA/GT)_n和(AG/TC)_n、(GA/CT)_n比例最高(n≥5),共占98.9%,并发现(AT/TA)_n和四核苷酸重复(GACA)_n、(ACGC)_n、(GCGT)_n以及六核苷酸重复(ATACAC)_n。选取从谷子富集文库中得到的合适微卫星位点设计引物,共设计393对;此外利用谷子YAC文库中16个微卫星序列(美国提供)设计出25对引物,共设计谷子SSR引物418对。
用豫谷1号检测这418对SSR引物的扩增稳定性,发现部分引物无扩增或不稳定,优化反应条件后全部稳定扩增出目的条带;随机选取39对非特异条带少的引物,用12个谷子和8个青狗尾草品种检测它们的多态性信息,结果在筛选出的22对(56.4%)多态性引物中共检测到185个等位基因,每对引物平均为8.41个;其中引物GTDZ7-73和AGDZ23-41检测到的等位基因最多(16个),最少的AGDZ23-10中检测到2个,其PIC值分别为0.91、0.90和0.37,22对引物平均PIC值为0.76,显示出较高的位点变异频率,说明所开发的SSR标记适用于谷子和狗尾草属遗传学研究。
利用多态性SSR引物在28份狗尾草属不同种和品种间扩增,统计各标记的等位基因频率分布,22个多态性引物总共检测到221个等位基因,不同品种间变异范围为2~22个,平均10.05个;平均PIC值为0.78,变异范围在0.37~0.93之间。进一步研究发现,SSR标记在谷子、青狗尾草及其它种狗尾草中的多样性表现不同,三者中发现的等位基因数分别为138、175和194个,分别占总数(221)的62.4%、79.2%和87.8%,而且青狗尾草品种平均PIC值(0.73)高于谷子品种(0.72),证明谷子间的遗传差异低于野生青狗尾草;同时数据对比表明,青狗尾草与谷子间的亲缘关系比其它种狗尾草近。根据这22个标记在谷子及近缘野生种的变异数据,计算各基因型的遗传相似系数,根据SM系数进行聚类分析,采用UPGMA法构建狗尾草属遗传进化关系图,结果表明:所用22个SSR标记即可将28份材料清晰分为2大类群(青狗尾草类群和金色狗尾草类群),3个小组(谷子、青狗尾草、金色狗尾草),而且谷子与青狗尾草之间的遗传距离小于与其它种的遗传距离,进一步证实了谷子起源于青狗尾草的观点;谷子相对紧密的聚在一起,且其间的遗传差异明显小于狗尾草,证明谷子在进化中发生遗传变异的几率相对狗尾草较低,表明其基因组的相对保守性;而通过对2大类群间差异的分析得出,金色狗尾草类群可能早于谷子和狗尾草分化之前就已经与它们分开,从一定程度上揭示了狗尾草属基因组进化情况。
本研究首次构建了谷子的微卫星富集文库,开发出了首批418对谷子的SSR标记特异引物,并对其中的22对引物的扩增特性进行了分析,建立了这些标记的多态性遗传参数,并检验了这些标记在狗尾草属谷子近缘种的跨物种实用性,为谷子功能基因组研究、分子标记辅助育种,以及狗尾草属和近缘种的遗传进化研究提供了标记数据基础。
【关键词】：
【学位授予单位】：河北师范大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2008【分类号】：S515【目录】：
Abstract5-10
1 文献综述11-37
1.1 分子标记概述11-23
1.1.1 遗传标记的概念11
1.1.2 分子标记的种类及其原理特点11-17
1.1.3 分子标记间的比较17-19
1.1.4 分子标记在植物中的应用研究19-23
1.2 分子标记在谷子中的研究现状23-25
1.2.1 谷子遗传连锁图谱的构建23
1.2.2 谷子重要性状基因定位及QTL 分析23-24
1.2.3 谷子比较基因组研究24
1.2.4 谷子品种鉴定及遗传进化研究24-25
1.3 谷子微卫星标记的开发与应用25-26
1.4 微卫星标记的开发策略26-33
1.4.1 经典传统方法26
1.4.2 微卫星富集方法26-32
1.4.3 利用生物信息学方法搜索文献和数据库32
1.4.4 利用比较遗传学从相近物种获得SSR 引物32
1.4.5 微卫星分离策略的比较32-33
1.5 微卫星富集文库构建的关键33-37
1.5.1 生物素标记的微卫星探针及磁珠的选择33-35
1.5.2 杂交条件控制35-36
1.5.3 SSR 引物的设计36-37
2 谷子基因组微卫星富集文库的构建37-60
2.1 材料与方法37-50
2.1.1 材料37-42
2.1.2 方法42-50
2.2 结果与分析50-59
2.2.1 基因组DNA 纯化质量及得率50-51
2.2.2 基因组DNA 酶切结果51
2.2.3 各文库PCR 富集效果51-52
2.2.4 含微卫星位点阳性克隆的筛选52-54
2.2.5 序列分析及数据统计54-58
2.2.6 SSR 引物设计58-59
2.3 小结59-60
3 微卫星引物稳定性和多态性位点的检测60-70
3.1 材料与方法60-66
3.1.1 材料60-63
3.1.2 方法63-66
3.2 结果与分析66-69
3.2.1 DNA 质量检测结果66
3.2.2 SSR 引物稳定性检测66
3.2.3 SSR 引物多态性鉴定及分析66-69
3.3 小结69-70
4 微卫星标记研究狗尾草属的种间进化和遗传多样性70-78
4.1 材料与方法70-72
4.1.1 材料70-72
4.1.2 方法72
4.2 结果与分析72-76
4.2.1 DNA 质量检测结果72
4.2.2 多态性SSR 引物的PAGE 检测及等位基因分析72-75
4.2.3 狗尾草属遗传多样性分析75-76
4.3 小结76-78
1 构建微卫星文库途径的选择78-79
2 探针的选择79
3 文库构建过程中的问题及解决方法79-80
4 SSR 引物稳定性与多态性检测80
5 多态性 SSR 标记的应用80-83
1. 谷子微卫星富集文库的构建及 SSR 标记开发83
2. SSR 引物稳定性及多态性检测83
3. 多态性 SSR 标记在狗尾草属遗传多样性研究中的应用83-84
4. 展望84-85
参考文献85-98
附录98-116
后记（含致谢）116-117
攻读学位期间取得的科研成果清单117
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官方公共微信【原创】响堂山石窟（南区）
响堂山石窟分南北两处，俗称南北响堂寺石窟。两寺相距15公里，均始建于北齐。南响堂石窟地处邯郸市峰峰矿区临水镇纸坊村鼓山南麓，滏阳河北岸，是由北齐的勋贵大丞相高阿那肱为后主高纬开凿的。景区现存大小石窟7座，分上下两层，上层5座，下层2座，自下而上分别为华严洞、般若洞、空洞、阿弥陀洞、释加洞、力士洞和千佛洞，共有历代造像3700余尊。这七座洞窟分为上下两层，背依青山，依崖而凿。窟内的佛像更是依石造像，和山体连为一体。整个洞窟的外形为北齐典型的“塔形窟”形式，它是响堂山石窟非常重要的造窟凿龛形式，把印度的覆钵塔与中国北齐仿木构的建筑形式结合在一起，具有很强的时代特色。1961年被国务院公布为第一批全国重点文物保护单位。
南响堂寺建于北齐年间，在选址上极为讲究，它坐北朝南，依山傍水，是一处极好的风水宝地。在南响堂寺西南角有一座八角七级的宋代古塔，俗称为红塔。
寺院东南角有钟楼一座，“响堂晚钟”原是古磁州八景之一。别处的钟声都是在早晨敲响，而这里却在晚上听到钟声响起，这的确是一所不同寻常的寺院。
&&&&&&&整个寺院共有殿宇建筑十三座，分布在一条中轴线上。古建筑群从南到北依次为天王殿、罗汉殿、大雄宝殿、藏经阁。
大雄宝殿东西均有配殿，现存建筑为明清时代所建。南响堂寺虽然规模不大，但结构合理，布局紧凑。院内，有两棵树非常引人注目，被称为响堂奇树。这一棵叫做槐抱柏，槐树绕柏两周紧紧缠绕，已有百年历史，当地还把这棵树叫做“龙缠凤”。
最后面的藏经楼建筑非常独特，从外部看象是三层楼阁，实际上却只有两层。它是明代留下的古建筑，一层楼内没有梁架结构，是无梁的建筑形式，很有地方特色。现在楼内供奉的是过去七佛像。
响堂山石窟是现存北齐最大的佛教文化遗存，也是河北省境内规模最大的一处皇家石窟。
二层的石窟
千佛洞窟门前力士
千佛洞窟门前凿四柱三开间窟廊，廓柱上雕出仿木构的阑额、斗拱、檐、椽和瓦垅，柱间雕窟门及力士像。窟廊上方雕覆钵、山花蕉叶、塔刹和宝珠。把石窟的券面做成佛教墓塔的形式不见于其它石窟中，可以说是响堂山石窟的独创。
千佛洞小巧玲珑，保存较好，它集中了南响堂石窟的精华。窟顶外壁上方雕覆钵塔，塔端雕卷云状山花蕉叶，中雕展翅欲飞的金翅乌，钵顶雕宝珠，两侧各雕八角形宝珠顶柱。窟内三面宝坛上各龛均雕一佛两弟子两菩萨，正面龛本尊为释迹佛。洞壁广造千佛，有大小造像1028尊。窟顶微隆，中央雕莲花，周雕8身飞天，两两相对，形成各组对称、轻歌曼舞的神仙极乐世界。此窟结构严谨，雕艺精致，尤其是外壁的大型雕刻，窟顶的飞天雕刻，都是绝无伦比的艺术珍品。
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附录：南响堂山石窟景区介绍
南响堂景区主要由南响堂石窟和南响堂寺院两大部分组成。整个景区与元宝山公园隔河相望，浑然一体。
南响堂寺是北方地区为数不多的古建佛教寺院。该寺始建于北齐年间，在选址上极为讲究，它坐北朝南，依山傍水，是一处极好的风水宝地。在南响堂寺西南角有一座八角七级的宋代古塔，俗称为红塔。寺院东南角有钟楼一座，“响堂晚钟”是古磁州八景之一，别处的钟声都是在早晨敲响，而在这里却听到钟声在晚上响起。这的确是一所不同寻常的寺院。清代方孝标曾写诗赞曰：“何处钟声出远林，响堂秋月夜沉沉。太行青接峰头雨，滏水澄环洞口阴。”整个寺院共有殿宇建筑十三座，分布在一条中轴线上。古建筑群从南到北依次为天王殿、罗汉殿、大雄宝殿、藏经阁。大雄宝殿东西均有配殿，现存建筑为明清时代所建。近几年又进行了维修保护，现保存完好。南响堂寺虽然规模不大，但结构合理，布局紧凑，建筑宏伟。
在天王殿内，供奉的是四大天王和弥勒佛。四大天王可以保佑人们风调雨顺，国泰民安。弥勒佛笑口常开，让人们忘掉了世间的一切烦恼。
罗汉殿内曾经供奉十八罗汉，他们曾经是释迦牟尼的弟子，最后修炼成为罗汉。
在大雄宝殿前的院内，有两棵树非常引人注目，被称为响堂奇树。这一棵叫做槐抱柏，槐树绕柏两周紧紧缠绕，已有百年历史，当地还把这棵树叫做“龙缠凤”，讲述了一个凄美的爱情故事。另外一棵树呢，更是奇特。它长的非常高大，枝叶繁茂，树冠蓬大。查遍所有资料，也不知它的名字。1959年的时候，敬爱的周恩来总理视察时听了工作人员的介绍，把它命名为“无名树”。后来为了纪念周恩来总理，当地人也把它称作“周公树”。
现在我们来到了大雄宝殿内，中间供奉的佛像是释迦牟尼佛，两边是他的服侍菩萨文殊和普贤。穿过大雄宝殿，我们看到了藏经楼。这座建筑非常独特，从外部看象是三层楼阁，实际上却只有两层。它是明代留下的古建筑，一层楼内没有梁架结构，是无梁的建筑形式，很有地方特色。现在楼内供奉的是过去七佛像。
响堂山石窟是现存北齐最大的佛教文化遗存，也是河北省境内规模最大的一处皇家石窟。1961年被国务院公布为第一批全国重点文物保护单位。响堂山石窟分为南北两处。南响堂石窟已有一千四百多年的历史了。那么有人要问了：“石窟为什么要建在这里，又是由谁修建的呢？”早在东魏北齐时，国都在邺城（今河北临漳），晋阳（今山西太原）为其陪都，皇室贵族经常往来于二都之间。由于响堂山南有滏水发源地，东流出山进入了平原的滏口，这里是皇室贵族往来于二都的必经之地，交通地位十分重要。又由于当时皇帝对佛教特别崇奉，佛教得到了很大的发展。到北齐末年，齐国境内的寺院达四万余所，僧尼二百多万人,仅邺城一带寺院就有四千余所，僧尼八万多人，成为了东方的佛教中心。南响堂石窟是由北齐的勋贵大丞相高阿那肱为后主高纬开凿的。
在两千多年前，随着佛教传入中国，石窟寺艺术这一建筑形式也随着佛教从著名的丝绸之路传入了我国。由于释迦牟尼是在岩窟中修行成佛的，所以佛教的传人们在山间开凿石窟，供奉佛像，营造石窟之风随之兴起。从魏晋南北朝一直到明清，石窟寺在中国修建的历史长达一千六百多年。在这漫长的演进历程中，北魏和盛唐是两个高潮，它们构成了中国石窟前后四百年持续开凿的鼎盛期。北齐的响堂山石窟正是介于这两个高潮之间，在中国石窟艺术史上占有不可忽视的地位。
南响堂石窟共有历代造像3700余尊，最多也是最好的是北齐洞窟中的那些造像。这七座北齐石窟分别为华严洞、般若洞、空洞、阿弥陀洞、释迦洞、力士洞和千佛洞。这七座洞窟分为上下两层，背依青山，依崖而凿。窟内的佛像更是依石造像，和山体连为一体。整个洞窟的外形为北齐典型的“塔形窟”形式，它是响堂山石窟非常重要的造窟凿龛形式，把印度的覆钵塔与中国北齐仿木构的建筑形式结合在一起，具有很强的时代特色。
规模最大的第一窟是华严洞。这个洞窟为什么称为华严洞呢？那是因为在洞内刻有《大方广佛华严经》而得名。该窟中心方柱三面开龛造像，为三世佛，后有低矮的甬道以便礼佛时通行。它改变了云冈石窟、巩县石窟等一些洞窟的中心塔柱四面状形式，从复杂向简单化的方向发展,这也是响堂山石窟与众不同的一个特征。方柱正面龛为帷幕帐形龛，龛内雕一铺七身像，主尊释迦牟尼佛像保存较好。您看这大佛，结跏趺坐在雕刻精美的束腰仰覆莲圆座上，它的头为低平螺髻，额部较低，眉目舒朗，鼻口和凹陷的下颌饱满而灵巧，整个脸型长圆，丰满而不润腻。给人不再是那种望而生畏的形象，而是有了一种可亲、可近、可爱、可敬的感觉，透出了一股灵气，露出了一丝秀美，双肩虽有北魏晚期秀骨清像的下溜之势，但已经明显地丰厚结实，胸部已趋于圆润，双手柔软而又厚实,表现出明显的肌肉质感。相交的双腿也是圆浑坚实，佛装轻薄贴体，衣纹刻线流畅自如，显现出了结实浑厚的体躯。在北齐的佛教造像中，已经摆脱北魏晚期清癯瘦削为美的观念，转向了崇尚健壮的美。由于北齐是由高度鲜卑化的汉人为首建立的政权，在文化上自然以北为尚，所以造像多为北方人粗犷雄健的型体，装束也以简率质朴为特色,而且造像更加接近社会生活，更具有真实感。到了隋唐时期，敦煌莫高窟、龙门石窟等一些石窟中的隋唐造像，无不受到响堂山北齐模式的影响。没有北齐一代艺匠的创新，精美绝伦的唐代雕塑作品也就不会出现了。这尊释迦牟尼佛像是我们响堂山石窟雕像中的精品，是研究北齐佛教造像非常珍贵的实物资料。
在洞的右壁和前壁雕刻的就是北齐的《大方广佛华严经》，它笔势遒健、书刻精细，是珍贵的书法作品。它是由东晋佛驮跋陀罗翻译的，刻了其中卷五、六的《四谛品》末、《光明觉品》、《明难品》、《净行品》。该窟开凿时与刻经同时考虑，因而在壁面开龛造像时，注意龛像的布局，并留有空间供刻经，便于僧俗诵读。石窟也成为了宣传佛教义学的场所，进一步世俗化了。
这刻经的内容和洞内造像的题材有没有关系呢？是有很大关系的。该窟的主要造像题材是按《华严经》的思想雕刻的，凿成中心方柱窟形，供僧俗谛观如来，绕塔供养，也与刻经的内容吻合。佛经中讲，绕塔供养礼拜可以得到种种福业，那我们就绕着塔柱拜拜佛吧！
敦煌石窟中的飞天是非常吸引人的，那么您对响堂的飞天又了解多少呢？现在就请随我一起走进千佛洞，去欣赏里面精美的佛像和动人的飞天。
千佛洞是响堂山石窟中塔形窟保存最好的一例，可以说它集中了南响堂石窟的精华。窟门前凿四柱三开间窟廊，廓柱上雕出仿木构的阑额、斗拱、檐、椽和瓦垅，柱间雕窟门及力士像。窟廊上方雕覆钵、山花蕉叶、塔刹和宝珠。把石窟的券面做成佛教墓塔的形式不见于其它石窟中，可以说是响堂山石窟的独创，一般认为这与北齐王陵有直接关系。云冈孝文窟和天龙山东魏窟都曾致力于窟廊的木构建筑模仿，但是前者过于装饰化，后者虽然追求秀丽单纯风格，贴近木构建筑原貌，但都没有这里的仿木构建筑做的地道。此窟的设计别具匠心，洞中三面宝坛上各雕一铺五身像，其余壁面满刻千佛，由于窟中共刻佛像1059尊，所以得名千佛洞。这面龛的主尊为释迦佛，结跏趺坐于束腰仰覆莲座台上，两侧为二弟子和二菩萨。左壁龛内的弥勒佛善跏趺坐于须弥座上，赤足踏在人面地神口中升出的莲花上，造型十分别致奇特，在全国各大石窟中也是十分罕见的。最引人注目的要属窟顶的飞天了，是不是可以与敦煌的飞天相媲美？该窟窟顶正中雕出圆莲，四周以莲花宝珠为中心，两两相对、盘旋飞舞的八身伎乐飞天，一个个体态轻盈、线条流畅。它们的身躯丰腴，袒胸裸足，有着北齐飞天的稚拙可爱，有的在弹奏箜篌，有的吹横笛，有的手弹琵琶，还有的在吹奏竹笙呢！而那些随着幽雅的乐曲在翩翩起舞的飞天，姿态更是迷人，呈现出一片欢乐、祥和的气氛，仿佛置身于美妙的天国盛宴之中。
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