认知疗法认为，心理障碍不是客观事件直接引起的，而是不合理信念引起的。客观事件是A，不合理信念是B，心理障碍是C，A——B——C。所以，心理治疗不处理A，而是改变B。B改变了，C就消失了。如果去处理A，就不是心理治疗，而是抗震救灾。心理治疗师如果去处理A，就是“现实干预”，说明人际界线不清，越俎代庖。说心理障碍是B引起的，显然不够全面，A干什么去了？应该说，心理障碍是A和B共同引起的。如果没有A，B不会无缘无故跑出来，引起心理障碍。临床心理学的研究早已发现，应激事件会导致心理障碍，尽管每个人的发病机制不同，临床表现不同。这说明，A——C在学术界是得到了公认的。所以，应该把认知ABC公式改一下：A+B——C。共同作用的意思是，只有A和B同时出现，才会心理障碍；如果有一个不出现，就不会心理障碍。但是，通过统计学处理，可以算出A和B的“贡献率”，应激障碍和适应障碍主要是A——C，神经症和精神病主要是B——C。 & & & & & & & & & & & & & C & & &A & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & &&B认知ABC公式过分强调B的作用，而忽略了A的作用，容易导致过度反省和心理学化，也就是把任何问题都当作心理问题，全部内归因，从而导致闭门造车，严重脱离实际。灵修走得更远，直接宣布“亲爱的，外面没有人”，一切都是你的投射。有的人以为“外面没有人”的观点来自客体关系理论。其实，客体关系理论讲投射性认同，就是投射+认同。外面如果真的没有人，而你看到了，那就是单纯的投射。问题是，外面的确有人，而且认同了你的投射，不然就不是投射性认同。人格面具理论认为，你看出别人有某个面具，是因为你的内心有这个面具，否则你是认不出来的。与此同时，对方确实有这个面具，否则你是看不见的。如果对方没有这个面具，而你看出来了，那就是幻觉；如果对方有这个面具，而你认不出来，那就是阴性幻觉。认知疗法和精神分析侧重于B——C，但家庭治疗和团体治疗侧重于A——C，强调环境（他人，A）对来访者的影响。亚隆把B——C称作垂直暴露，把A——C称作水平暴露，认为团体治疗应该以水平暴露为主，不宜过深的垂直暴露。垂直暴露有深有浅，最浅的垂直暴露与水平暴露没有本质的区别。所以，可以把水平暴露理解为浅的暴露，把垂直暴露理解为深的暴露。科胡特把A——C称作“贴近经验”的解释，把B——C称作“远离经验”的解释。A分两部分：人和物。人就是他人，或社会环境。如果一种心理或行为主要是受他人或社会环境影响的，就是A。物是指“生态”环境，包括天气、经纬度、海拔，以及生理状态。这一部分习惯上被归为C，就是个体“当下”的状态。所以，通常所说的A主要是指社会环境和人际关系。这样一来，A——C就等于“人际影响”。人际影响的方式有很多，“明示”就是最常见的一种。所谓明示，就是明确要求或命令别人做某件事。其次是暗示，虽然没有明确要求，但暗示者的意图昭然若揭，对方不由自主地按他的意图行事。催眠也是一种很强的人际影响。在催眠状态下，人会不假思索地接受催眠师的指令。这是因为，催眠状态导致意识恍惚，这种情况下人更容易受暗示。荣格认为，催眠就是“感应”，或“神秘参与”（Participation mystique），其基础是集体无意识。荣格把心理活动分为意识、个人无意识、集体无意识。如果A是集体无意识，那么B就是个人无意识，C就是意识。认知疗法不认为B是个人无意识，但承认B来自过去的经验，开始可能是对的，但时过境迁，已经不适用了。精神分析则认为，过去的经历，如果还记得，就是前意识，如果已经忘了，就是（个人）无意识。神经症就是按过去的模式行事，被无意识控制。为什么说C是意识呢？其实C不是意识，而是“此在”（Dasein），即此时此地或“当下”的人。这个人没有过去和未来，完全活在当下。他的身体由当下的生理状态构成（过去的生理状态已经过去，未来的生理状态还未来到），他的心理是对当下环境中的客观事物的反映。他的生理状态和心理状态有些是有意识的，能够意识到，有些是无意识的，这些无意识的生理状态和心理状态也是当下的，与B不可同日而语。说C是意识，是因为意识也是当下的。B不在当下，所以没有意识，只有前意识和潜意识（无意识）。而A已经超出了意识的范围。生活中有许多类似催眠的现象，例如，很多人在看展览，有人拿走了一件展品，很多人就学他的样，把展品一抢而光。听说板蓝根可以预防非典，板蓝根立即脱销。这种现象也叫从众心理。中国有句古话，叫“法不责众”，就是把从众心理合法化，也是对群氓行为的纵容。群氓事件全世界都有发生，但外国人和中国人的处理方法不同。外国人会去分析它，找出人的“劣根性”，然后通过法律等手段予以防范。中国人的做法是，法不责众，既往不咎，结果，本来是小范围的群氓事件，渐渐演变成大面积的群氓事件。毕福剑事件发生后，很多人抨击曝料的人，骂他是告密者。其实，告密是人的本性，可以缓解心理压力（倾诉、宣泄），也是言论自由的一部分，关键在于政府如果鼓励告密，就会告密成风，人人自危；如果无视告密，不采纳告密者所提供的材料，告密就成不了气候。许多政治家非常擅长利用人们的从众心理去影响别人，以达到自己的目的。战争动员是最典型的例子。战争动员就是催眠，洗脑。从众现象也是推卸责任的最好理由。“别人都这样啊。地球人都这样。”社会环境除了个别他人，还包括团体。一个人做了某件事，如果是为了团体的利益，就能得到谅解。很多人会为了班组、学校或者工作单位、社团、政党、国家的利益而理直气壮地伤害身边的人。当一个人不喜欢某个人时，往往会在对方身上找“污点”，如果对方在人品或道德方面有瑕疵，就可以名正言顺地讨厌他。这种把个人恩怨上升为道德审判、“拿大旗做虎皮”的现象在日常生活中非常普遍。很多人最后把自己也骗了，以为自己的行为完全出于正义，而淡忘了个人情绪。严格地讲，A不是集体无意识，而是集体意识。但是，集体意识在多数情况下是无意识的。当一个人被集体意识所控制时，自己往往会失去觉察。弗洛伊德把集体意识称为超我。超我是社会规则的内化，社会规则就是集体意识。超我也是无意识的。这样一来，A就是超我，B就是本我，C就是自我。A是超我，A——C就是盲目服从超我，与从众心理类似，也是“奴性”的本质。上述群氓行为就是奴性的表现，因为奴隶是没有自我的。政治家为了便于管理，不希望民众有独立思考的能力，其实就是精神奴役。当一个人失去了独立思考的能力，认同了集体意识，他就会远离自己的本性，这就是“异化”。罗杰斯把自我分为理想我（相当于超我）和现实我（相当于自我），异化就是理想我（超我）取代了现实我（自我）。而在莱恩看来，理想我就是假我（假自体）。精神分裂的特点就是被假我控制，活人变成了木偶。道德家们总是担心，如果没有了超我，人就会无法无天，因而以此作为理由，肆意扼杀人性。弗洛伊德承认本我就是人的动物性，但动物性不等于恶。事实证明，在所有的动物中，人是最邪恶、最残忍的动物。食草动物不会伤害其它动物，同类之间会为了争夺食物和配偶而打斗，但都是点到为止。食肉动物也不会无故伤害其它动物，除非肚子饿了，需要吃肉。只有人类，才会毫无必要地伤害其它动物，残害同类，破坏环境。所以，作恶不是因为没有超我，而恰恰是因为有超我。“天下皆知美之为美，斯恶已；皆知善之为善，斯不善已。”然后，“大道废，有仁义；慧智出，有大伪；六亲不和，有孝慈；国家昏乱，有忠臣。”B是本我，B——C就是本我（无意识）的显现。弗洛伊德认为，心理障碍就是无意识显现。认知疗法也认为，心理障碍是B引起的。C是自我，应该很好理解。首先，C是当下的人，他在特定的环境（当下）之中，与环境相关联、相适应、相和谐。弗洛伊德赋予自我的功能就是适应环境。但是，个体毕竟不是完全活在当下的，他有过去，有本我，所以，自我还有一个工作就是协调本我和现实的关系，帮助本我实现愿望。另外，人还生活在社会环境中，不能完全无视集体，不顾超我的规定，所以自我还要协调超我和现实的关系，“随心所欲，而不逾矩。”照顾到A和B的需要，不与A和B对抗，与被A和B所控制，完全是两回事。被控制意味着失去了自我，而照顾A和B的需要意味着自我是自主的，它可以选择照顾，也可以选择不照顾。它审时度势，英明决策，使自己的利益最大化。这就是理智，也就是意识。心理障碍来自B，不是因为邪恶，而是不合时宜。但是，A从社会标准出发，认为某些东西是恶的，给它贴上标签。而对C来说，每一个当下都是不可复制的，每个人都是独特的，生命只有一次，所以没有好和坏，一切都是“恰到好处”。好和坏是比较出来的，单独一个东西是无法比较的。如果觉得某人不好，一定是把他跟别人或者常模、标准进行比较了，把他同别人归为一类。不幸的是，灵修把自我（ego）称作“小我”，认为它是心理障碍和一切烦恼的根源。灵修的目的就是消除小我，回归“大我”。大我是什么？有人认为是本我（真我），有人认为是集体无意识。把本我等同于真我，纯粹是字面的误解。本我是人的动物性，人的本质肯定不是动物性。客体关系理论用自体（Self）取代自我，比较接近“真我”。这样的真我就是人的现象学本质，即一个人的心理活动的总和。而“此在”是当下的心理活动的总和。人性就是由一连串“此在”构成的。所以，从某种意义上说，灵修就是洗脑（催眠），与政治没有本质的区别。一切否定、诽谤、扼杀人的独特性、把人“标准化”的言行都是政治阴谋。禅宗也讲“无我”，但这个“我”更像超我，由各种思想观念和条条框框构成。禅宗主张打破所有的条条框框，过一种本真的生活，也就是完全融入环境，与环境和谐共处。禅宗所说的“我”也包括本我，活在过去，不能与时俱进。“无我”就是没有挂碍，完全活在当下。当一个人完全融入环境、活在当下时，不是没有“我”了，而是“我”变大了，大到天人合一。心理治疗就是减少A和B对C的影响，A是彼地（他人），B是彼时，C是“此在”（此时此地，当下）。心理健康就是做真正的自己，做独一无二的此在。（黄国胜）人格面具(rengemianju)　
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听别人讲案例，总是趣味盎然。其实，心理咨询是很乏味的，绝大多数案例都是平平淡淡的，索然无味。她从小就打算独身。后来突然出现了一位“白马王子”，向她苦苦追求。追了三年，她终于被感动了，跟他订了婚。不久，心理服务志愿者协会在呱呱房间举行的咨询演练。来访者被一位室友弄得很恼火，室友非常自私，“把自己当公主，把别人 心理学家总是告诉人们，改变别人是不可能的，改变别人不如改变自己，改变别人不如接纳别人。有一则心灵鸡汤，说有抑郁症是苦命人面具的显现。这个面具平时躲在暗处，不为人知，一旦被某种因素激发出来，成为主导面具，就会使人陷入经常听到有人把抑郁说成忧郁，其实两者是不一样的。作为病名，只有抑郁症，没有忧郁症。抑郁的英文是depress又是一个男人送一个女人来咨询。他们恋爱两年，现在男人准备和别人结婚了，女人产生应激反应。咨询师站在男人的立场刚刚看到一篇文章，叫《如何与炮友保持一段纯洁的肉体关系》，想起七年前写的《变相自慰》，找出来供大家消遣一下。开学不到一个月，她因“割腕自杀”被父母送来做心理咨询。父母认定原因是失恋，希望我帮她消除失恋的痛苦，打消自杀10岁的小女孩，丢了一件玩具，情绪低落，茶饭不思，怎么劝也没用。父亲陪她找了好几家商店，都没买到，最后找到我这一次由新成立的温州市心理服务志愿者协会承办，地点在水心社区。XX的个案：父亲代咨询，高中女生，老是觉得同学上一课上得比较乱，主要原因是没有事先区分两个问题：1、咨询师要不要无条件接纳？为什么要无条件接纳？如果不接纳今天的内容很难用一个词概括，涉及参与性观察、均匀悬浮注意、内容和过程、此时此地（当下）、在场、觉知、觉察、觉嫦娥奔月的神话最早见于战国初年的《归藏》：“昔嫦娥以西王母不死之药服之，遂奔月为月精。”嫦娥为何奔月？后来的求助者是一名女同性恋者，她陷入三角关系中，非常痛苦，出现应激反应。因为涉及到同性恋，我让全体到会人员评估一下初诊接待，顾名思义，就是第一次接待来访者，也许一次不够，需要好几次，所以可以理解为“咨询初期”，主要任务是：共情是心理咨询的核心技术。没有共情，心理咨询就无法进行。以往的案例督导，最普遍的问题就是共情不够，或不共情，罗杰斯认为，心理障碍是价值条件化的结果。由于社会和父母对当事人是有条件、有要求的，当事人必须按他们的要求去做共情是心理咨询师的基本功。新手咨询师最欠缺的就是共情能力，常常因为共情不够而导致来访者脱落。但是，有的咨询师一般认为，动物都是活在当下的。动物没有逻辑思维的能力，不会分析前因后果，不知道过去和将来，它们只会根据当时的世事无常，生活中总会时不时地遇到一些烦恼，如果不懂心理调节，小烦恼会变成大烦恼，最终导致心理障碍或心身疾病。认知疗法认为，心理障碍不是客观事件直接引起的，而是不合理信念引起的。客观事件是A，不合理信念是B，心理障碍是20年前的今天，她与王子解除了婚约。人际冲突有两种，一种是面具错位。例如，儿媳妇使用女儿面具，把母亲面具投射给婆婆，而婆婆使用的是婆婆面具，根本每个人都有一对夫妻面具。以男人为例，丈夫面具自己戴，妻子面具给配偶戴。一旦遇上一个与妻子面具相符的女人，就会咨询师面具有五个，当咨询师戴上不同的面具时，采用的技术是一样的。反之，可以从咨询师所使用的技术判断他是什么面具。同性恋恐惧症，同性恋强迫症，钟情妄想，被害妄想，厌女症，恐男症本次督导在三医门诊六楼会议室举行，由刘志远报告案例。患者是一名高一男生，患强迫症已经两年半，看过很多地方，曾一般人都认为，独处的时候是不戴面具的。但是，根据定义，人格面具是社会化的产物，一个人如果已经社会化，就拥有了心理咨询和职业生涯咨询是不同的，本期督导内容是后者。咨询师报告了咨询经过，与会者开始讨论。我的感觉是，本案例心理咨询和心理治疗是不同的。心理咨询起源于二十世纪初帕森斯的职业指导。当时美国在值工业化和都市化时期，大批农本次全市性案例讨论会在紫竹举行，由XXX报告案例。丈夫认为妻子有问题，带她来做咨询。咨询师单独给妻子做了三次心理咨询要不要收费？收多少合适？估计每个人的回答都是不同的，可以把它当作投射测验来看。新手往往倾向于不收费，古人有云：人无远虑，必有近忧。如果只顾眼前，享受当下，不幸马上就会接踵而至。学生的心理问题常常涉及到同学关系和师生关系。在处理学生的心理问题时，心理老师经常会做一些调解工作。经过调解，病人面具本来是受害者面具的一种，由于人类富有同情心，有很强的拯救者面具，病人面具很容易把别人的拯救者面具激发总司令克里斯托弗，探险者梅里尔，哨兵卡洛斯，能源总管凯蒂，好色之徒达林，开心果彼得，筑巢鸟谢尔比。治疗心理障碍，预防心理障碍，维护心理健康，促进心理健康不成熟的女人就是心理发展停留在口腔期、肛门期、俄狄浦斯期、潜伏期和青春期的女人。跟这样的女人谈恋爱会很累，她 电影《黑天鹅》的主角尼娜演白天鹅绝对成功，但演黑天鹅不行，因为她天生就是一只白天鹅，温柔、安静、顺从、自律国家职业心理咨询师培训教材把心理咨询技术分为两类16种，加上“咨询特质”5种，就是三类21种：1、咨询特质，心理咨询师的人格面具主要有五个：心理侦探，心理顾问，精神导师，爱心大使，灵魂伴侣。团体带领者也是如此。一、精他们是相亲认识的，交往了三个月就结婚了。过了一年还没怀孕，双方父母着急了，建议他们去医院看看，他们才说出原委不知道为什么，今天特别想写一写我的恩师李心天。1984年，我从温州医学院毕业，被分配到温州市第三人民医院外科他们是相亲认识的，交往了三个月就结婚了。过了一年还没怀孕，双方父母着急了，建议他们去医院看看，他们才说出原委客体关系理论认为，刚出生的婴儿具有人际界线不清和“分裂”（把妈妈分裂为好妈妈和坏妈妈）两个特点，随着年龄的增一个人的心理能否顺利发展，会不会停留在某个阶段，其决定因素就是母亲。如果有个好母亲，他的心理就会顺利发展，如客体关系理论非常强调早期经历对人格的影响，其观点基本上可以概括为“三岁看老”：三岁以前，甚至一岁以前的母子关上周末听了两天法国味的精神分析课，讲者严和来，师从霍大同，留学法国。以下是我的学习心得。一、回归弗洛伊德弗洛她怕猫，连猫的图片也怕。有一次做意象对话，她看见一只黑猫，非常害怕。我说，你退几步，离它稍远一点，然后看它的rengemianju传播心理学知识热门文章最新文章rengemianju传播心理学知识 上传我的文档
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不同区域松蓝根、叶(板蓝根、大青叶)有效成分含量差异
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不同区域松蓝根、叶(板蓝根、大青叶)有效成分含量差异
官方公共微信王康才&&&&
南京农业大学园艺学院, 江苏 南京 210095
基金项目：国家自然科学基金项目();国家大学生创新创业训练计划项目();南京农业大学校级大学生创业训练项目(12cy04)
通迅作者：唐晓清,副教授,主要从事药用植物栽培与中药质量研究,Tel:025-,E-mail:xqtang@。
摘要：[目的]研究氮素形态对菘蓝生长与活性成分的影响,为菘蓝栽培生产中高效利用氮素提供理论依据。[方法]采用砂培法栽培菘蓝,以菘蓝根与叶的生物量、叶片靛蓝、靛玉红、总生物碱含量及根系(R,S)-告依春、多糖含量为指标,研究菘蓝营养生长后期对3种氮素形态即硝态氮(NO3--N)、铵态氮(NH4+-N)和酰胺态氮(CO(NH2)2-N)的5种不同氮素浓度的响应。[结果]氮素处理增加了菘蓝叶与根的鲜质量,菘蓝的叶鲜质量、根鲜质量与根冠比对硝态氮的响应最为显著;叶片靛蓝、靛玉红、总生物碱含量与根系多糖含量对铵态氮响应最显著,而根系(R,S)-告依春含量则对硝态氮响应最显著,说明叶片与根系的活性成分对不同形态氮素响应存在差异。以2.5 mmol·L-1 NH4+-N、5.0 mmol·L-1 NO3--N和10.0 mmol·L-1 CO(NH2)2-N为最佳组合,该组合下菘蓝单株叶鲜质量、根鲜质量、总生物碱与靛玉红含量均为最大,分别为66.59 g、40.91 g、34.48 mg·g-1和2.26 mg·g-1。[结论]3种氮素配合施用能显著地影响菘蓝的生长与活性成分的积累。
生物量&&&&
活性成分&&&&
氮素形态&&&&
Response of biomass and active components in roots and leaves of Isatis indigotica Fort.to nitrogen forms
TANG Xiaoqing ,
XIAO Yunhua,
ZHAO Xueling,
WANG Kangcai&&&&
College of Horticulture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China
Abstract: [Objectives]The effects of nitrogen forms on growth and active components in roots and leaves of Isatis indigotica Fort. were studied to provide a theoretical basis of efficient utilization of nitrogen for the cultivation production. [Methods]The response to the five different concentration of three nitrogen forms namely NH4+-N,NO3--N and CO(NH2)2-N,were studied,as the indicators to the biomass of roots and leaves,the contents of indigo,indirubin,total alkaloids in leaves,contents of epigoitrin and polysaccharides in roots of I.indigotica. [Results]Nitrogen treatment could increase the fresh weights of leaves and roots,the responses to nitrate nitrogen of fresh weights of leaves and roots and root/shoot ratio were the most significant. The contents of indigo,indirubin and total alkaloids in leaves and polysaccharides in roots of response to ammonium nitrogen,contents of epigoitrin of response to nitrate nitrogen,were the most significant,which indicated the responses to nitrogen forms of active components in leaves and roots were inconsistent. The combination of 2.5 mmol·L-1 NH4+-N,5.0 mmol·L-1 NO3--N and 10.0 mmol·L-1 CO(NH2)2-N was the best combination,in which the fresh weight of leaf and root,total alkaloides content,epigoitrin content were 66.59 g,40.91 g,34.48 mg·g-1 and 2.26 mg·g-1,respectively. [Conclusions]The combined application of three kinds of nitrogen can significantly affect the growth and accumulation of active ingredient of I.indigotica.
Isatis indigotica Fort.&&&&
biomass&&&&
active component&&&&
nitrogen forms&&&&
中药板蓝根与大青叶分别来自十字花科菘蓝(Isatis indigotica Fort.)的根与叶[]。板蓝根具有清热解毒、凉血利咽的功效;大青叶具有凉血消斑、清肝泻火、定惊的功效。作为大宗药材的板蓝根,其化学成分[, ]、药理活性[, ]和临床应用[, ]等方面的研究非常多,并且对于其原植物菘蓝的栽培生产研究也日益增多,尤其是栽培过程中影响其产量的氮素研究受到更多的关注。晏枫霞等[]研究表明:铵态氮促进氮、磷的积累,硝态氮促进钾、镁的积累;提高铵态氮的比例有利于菘蓝叶片靛玉红的积累,全硝营养时靛蓝含量最高。郭庆海等[]研究表明:菘蓝营养生长各阶段对氮、磷、钾需求不同,营养生长后期氮、磷、钾的共同作用对菘蓝生物量积累有重要影响,且根冠比以低氮水平下较高。温春秀等[]研究表明大青叶与板蓝根产量随着氮肥用量的增加而增加,氮的合理用量为150 kg·hm-2。肖云华等[]研究了铵态氮、硝态氮与酰胺态氮3种氮素形态对大青叶成分的影响,结果表明菘蓝生长前期施用适宜组合的氮素是以促生长为主。对3种不同氮素形态及不同的浓度配比对菘蓝生长后期采收入药时的地上与地下生长及活性成分含量的影响尚无研究报道。本文在前期研究的基础上,以铵态氮、硝态氮和酰胺态氮3种形态及其不同浓度配比设计正交试验,以叶和根的生物量、叶片靛蓝、靛玉红与总生物碱含量、根系(R,S)-告依春和多糖含量为指标,研究板蓝根与大青叶对不同形态氮素的响应,探究适合菘蓝生长及药材有效成分积累的最佳氮素形态及其浓度配比,为氮素的高效利用和提高板蓝根与大青叶的经济产量和药用成分积累提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
试验材料为十字花科菘蓝(Isatis indigotica Fort.)的果实。采用盆栽(外口径44 cm,底直径30 cm,高35 cm),栽培基质为蛭石和珍珠岩按2: 1的比例混合而成,于日播种,砂培的基本营养液配方中大量元素和微量元素均采用霍格兰营养液配方,pH6.0。处理营养液是在基本营养液的基础上去除所含氮元素配制而成,pH6.0。处理液中铵态氮(NH+4-N)由(NH4)2SO4提供,硝态氮(NO-3-N)由KNO3提供,酰胺态氮(CO(NH2)2-N)由纯脲(CO(NH2)2)提供。所有处理液中加入双氰胺(DCD),用量是处理液中纯氮含量的0.4%。所用试剂均为分析纯(AR)。于12月5日采样,分析不同处理下菘蓝地上与地下部分生长状况与有效成分的积累情况。
1.2 试验设计
采用L25(56)三因素五水平实验设计(不考虑各因素之间的互作),各处理重复3次,随机区组排列。待菘蓝幼苗4~5片真叶时间苗,每盆保留长势一致的植株10株,于6月25日第1次浇灌基本营养液,之后每隔10 d浇灌1次基本营养液,每次1 L。7月14日即播种40 d后开始处理,每10 d浇灌1次处理液,每10 d浇灌1次处理营养液,处理液和处理营养液相隔5 d交错进行。各处理水平见表 1,正交设计水平见表 2。
表 1 3种氮素形态和浓度的处理水平
Table 1 Treatment of three kinds of nitrogen form and concentration mmol·L-1
D酰胺态氮CO(NH
表 2 3种氮素形态和浓度的正交设计处理L25(56)
Table 2 Orthogonal design treatment of three nitrogen forms and concentration L25(56)
处理Treatment
因素 Factor
总氮浓度/(mmol·L
-1)Concentration oftotal nitrogen
C留空Blank
D酰胺态氮CO(NH
E留空Blank
F留空Blank
1.3 各项指标测定的样品准备
采样后将植株用蒸馏水洗净、擦干,称量单株鲜质量,每个处理取10株,计算其平均单株质量,然后将其分成地上和地下两部分,分别称质量,计算根冠比。在105 ℃条件下杀青5 min,并于60 ℃条件下烘至恒质量,粉碎并过60目筛,备用。
1.4 菘蓝体内活性成分的测定
1.4.1 叶中靛蓝、靛玉红含量的测定
叶中靛蓝与靛玉红含量参照文献[]的方法测定。色谱条件:Waters 2695高效液相色谱仪:四元泵,在线脱气,自动进样器,Waters 2998 DAD检测器,Empower 2色谱工作站;柱温箱柱温40 ℃;流动相为甲醇-水(体积比75: 25);检测温度25 ℃;检测波长289 nm。在此色谱条件下,理论塔板数以靛玉红计,不低于4 000。
标准曲线制备:精确称取靛蓝0.001 g、靛玉红0.002 g,分别用甲醇溶解后定容至50 mL,摇匀,微孔滤膜(0.45 μm)滤过。吸取靛蓝、靛玉红标准溶液2、4、8、16和20 μL注入Waters 2695高效液相色谱仪中,记录色谱图。以色谱峰面积(Y)和对应的质量浓度(X,g·mL-1)作标准曲线,计算得靛蓝的回归方程为Y靛蓝=123.56X-5 420,r=0.999 8(n=3),线性范围为60~800 μg;靛玉红的回归方程为Y靛玉红=4 874.7X-25 682,r=0.999 6(n=3),线性范围为12~200 μg。
样品含量测定:样品溶液的提取参照药典的方法,定容后溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后,用微量进样器吸取20 μL注入高效液相色谱仪测定,以色谱峰面积和标准曲线计算样品中靛蓝、靛玉红的含量。
1.4.2 叶内总生物碱含量测定
采用酸性染料比色法[]进行测定。
对照品溶液的制备:取靛玉红适量,精确称取,加氯仿制成每1 mL含20 μg的溶液。分别取0、2、4、8、10、15、20和40 mL定容至50 mL容量瓶,即得0、0.8、1.6、3.2、4、6、8和16 μg·mL-1的供试液。取供试液10 mL至分液漏斗中,依次加入缓冲液5 mL,溴酚蓝1 mL,振摇1 min使充分反应,静置1 h后分取氯仿层,289 nm下测定吸光值。以吸光度(Y)和对应的总生物碱含量(X,μg·g-1)作标准曲线,计算得总生物碱的回归方程为Y=0.010 2X-0.014 8,r=0.999 2(n=3),线性范围为8~160 μg。
样品溶液的制备与测定：精确称取各样品粉末0.155 0 g,置离心管中,加入浓氨水0.5 mL,充分摇匀,再加入氯仿10 mL,冷浸3 h后超声提取1 h,6 000 r·min-1离心20取上清液于35 ℃旋蒸去除氯仿,得到总生物碱提取物,以氯仿分次溶解该提取物,并转移至50 mL容量瓶内定容,作为样品溶液;另取分液漏斗依次加入10 mL样品溶液、缓冲液5 mL和溴酚蓝1 mL,振摇1 min使其充分反应,静置1 h后分取氯仿层,于289 nm下比色,根据回归方程计算得到总生物碱含量。
1.4.3 根中(R,S)-告依春含量的测定
根中(R,S)-告依春含量参照文献[]的方法测定。色谱条件:仪器同靛玉红测定,以甲醇和0.02%磷酸溶液(体积比为7: 93)为流动相;检测波长245 nm。在此色谱条件下,理论塔板数以(R,S)-告依春计,不低于5 000。
对照品溶液的制备:精确称取(R,S)-告依春对照品适量,加甲醇制成每1 mL含40 μg的对照品溶液。分别吸取2、4、8、16和20 μL注入高效液相色谱仪中,记录色谱图。以色谱峰面积(Y)和对应的浓度(X,g·mL-1)作标准曲线,计算得(R,S)-告依春的回归方程为Y=6 952.7X+190 000,r=0.999 2(n=3),线性范围为80~800 μg。
样品溶液的制备:样品溶液的提取参照药典的方法,定容后经0.45 μm微孔滤膜滤过,分别吸取对照品溶液与样品溶液各20 μL,注入液相色谱仪测定,以色谱峰面积和标准曲线计算样品中(R,S)-告依春的含量。
1.4.4 根中多糖含量的测定
采用苯酚-浓硫酸法[]进行测定。
1.5 数据处理
所有数据采用Excel 2007软件和DPS 3.01软件进行处理与分析,差异显著性检验采用Duncan′s新复极差法。
2 结果与分析
2.1 菘蓝的生长指标对氮素形态的响应
由表 3可见:不施用任何氮素(对照)的菘蓝生长较差,平均单株鲜质量仅8.08 g,而不同形态及不同浓度氮素处理后菘蓝叶与根的单株鲜质量均显著高于对照(P & 0.05),其平均单株鲜质量、叶鲜质量与根鲜质量最大的均为处理8,分别为107.5、66.59和40.91 g,显著高于对照与其他处理。表 4显示:硝态氮对菘蓝叶与根鲜质量影响最显著,其次是铵态氮与酰胺态氮。根冠比分析显示,对照的根冠比最大(1.89),显著高于其他处理,究其原因为长时间缺乏氮素营养,导致其地上的生长势弱。对根冠比影响最显著的氮素形态依次为硝态氮、铵态氮与酰胺态氮。根冠比大于1.0的处理为6、11、12和16,其中处理6、11和16中硝态氮均为0 mmol·L-1,但其菘蓝单株鲜质量却远远低于处理8,且与处理8差异显著,说明硝态氮对菘蓝地上部分生长有显著的影响,与直观分析结果对根冠比影响最显著的为硝态氮是一致的。
表 3 菘蓝生长对不同氮素形态及浓度的响应(n=10)
Table 3 The response of growth of Isatis indigotica to different nitrogen forms and concentrations
处理Treatment
叶鲜质量/gFresh weight of leaves
根鲜质量/gFresh weight of root
单株鲜质量/gFresh weight per plant
根冠比Root/shoot ratio
2.80±0.36
5.28±0.96
13.25±2.04
12.84±2.32
26.26±2.89
18.60±1.96
59.89±2.52
37.84±2.51
77.00±1.92
21.08±1.22
15.53±2.01
20.45±2.67
25.26±3.95
23.55±2.27
66.59±2.98
40.91±2.40
33.90±2.99
27.67±2.06
52.95±2.55
31.68±2.36
14.76±1.50
21.39±2.75
19.98±3.37
21.60±2.50
37.89±2.47
23.80±2.04
49.61±1.98
19.83±5.65
57.30±4.07
25.75±1.55
28.01±3.27
28.55±2.20
32.67±2.96
21.74±2.21
41.58±2.43
31.93±1.56
47.76±4.44
20.64±2.81
60.84±2.98
27.71±1.51
29.33±1.70
16.30±2.92
42.15±2.44
24.40±1.81
52.83±2.46
29.10±1.72
45.67±2.13
29.43±1.47
66.43±2.66
26.49±2.57
注:不同小写字母表示处理间在0.05水平有显著差异。Note:The different normal letters mean significant
difference among treatments at 0.05 level.The same as follows.
表 4 氮素处理下菘蓝的叶鲜质量、根鲜质量与根冠比的直观分析
Table 4 Visual analysis of fresh weight of leaves and roots of I.indigotica under nitrogen treatment
酰胺态氮CO(NH
叶鲜质量/gFresh weight of leaves根鲜质量/gFresh weight of root根冠比Root/shoot ratio
均值1 Mean value 1
均值2 Mean value 2
均值3 Mean value 3
均值4 Mean value 4
均值5 Mean value 5
极值 Extreme value
均值1 Mean value 1
均值2 Mean value 2
均值3 Mean value 3
均值4 Mean value 4
均值5 Mean value 5
极值 Extreme value
均值1 Mean value 1
均值2 Mean value 2
均值3 Mean value 3
均值4 Mean value 4
均值5 Mean value 5
极值 Extreme value
注:均值1、2、3、4、5分别表示某一因素在该水平下的平均表现,表6与表7同此。Note:Mean 1,2,3,4,5
represent average performance of one factor in level. Table 6 and 7 were the same as Table 4.
2.2 叶片靛蓝、靛玉红和总生物碱含量对氮素形态的响应
由表 5可见:3种形态氮素处理后菘蓝叶片的靛蓝含量多数都小于对照,仅处理2的靛蓝含量高于对照,为最高。除处理2、12与对照间差异不显著外,其余处理与对照均差异显著,且差异较大的前3位为处理2、12和9。
表 5 不同氮素处理对叶片生物碱类含量及根系(R,S)-告依春和多糖含量的影响
Table 5 Effects of nitrogen on contents of alkaloids in the leaves and content of epigoitrin and polysaccharide in roots
处理Treatment
靛蓝含量Content of indigo
靛玉红含量Content of indirubin
总生物碱含量Content of total alkaloids
(R,S)-告依春含量Content of epigoitrin
多糖含量Content of polysaccharides
3.92±0.10
0.26±0.01
8.94±0.06
1.29±0.01
118.88±11.87
4.52±0.41
0.20±0.04
11.26±0.05
0.60±0.26
143.40±7.68
2.67±0.76
0.21±0.09
11.50±0.16
0.95±0.34
130.83±7.98
1.85±0.05
0.12±0.01
11.42±0.05
0.87±0.03
121.24±15.66
2.60±0.30
0.16±0.06
12.67±0.08
1.12±0.22
127.28±11.13
2.17±0.86
0.11±0.05
13.04±0.07
0.68±0.09
134.29±35.01
2.58±0.38
0.10±0.05
18.62±0.07
1.29±0.12
128.46±30.34
1.64±0.04
0.13±0.01
34.48±0.06
2.26±0.04
139.84±9.59
3.10±0.78
0.17±0.03
25.59±0.16
0.99±0.17
143.26±16.70
1.70±0.45
0.06±0.01
17.97±0.05
1.23±0.28
146.72±5.82
2.57±0.31
0.06±0.01
15.77±0.08
0.56±0.19
120.40±10.83
3.14±0.52
0.09±0.01
14.64±0.06
1.68±0.04
138.15±48.56
2.13±0.09
0.09±0.01
15.78±0.04
1.28±0.49
147.78±17.19
1.56±0.12
0.13±0.01
19.63±0.09
1.13±0.47
138.24±8.46
1.39±0.30
0.10±0.04
21.48±0.03
0.81±0.01
127.93±4.99
1.63±0.77
0.05±0.02
16.82±0.03
0.82±0.16
131.48±5.22
1.69±0.10
0.14±0.01
12.49±0.03
1.13±0.06
132.26±18.37
2.05±0.52
0.07±0.03
14.42±0.04
1.12±0.03
145.58±1.51
1.63±0.11
0.10±0.01
12.55±0.04
1.22±0.08
139.45±40.24
2.28±0.28
0.07±0.03
16.04±0.05
1.17±0.03
150.88±1.99
2.03±0.10
0.08±0.02
12.00±0.01
1.05±0.35
140.36±2.40
2.08±0.38
0.07±0.01
16.07±0.11
1.13±0.05
150.26±2.31
1.97±0.78
0.12±0.04
13.39±0.08
1.22±0.35
148.10±8.83
2.92±0.67
0.15±0.01
14.18±0.06
1.88±0.10
152.85±1.41
2.83±0.64
0.12±0.04
23.72±0.17
1.44±0.19
137.95±1.60
各处理叶片靛玉红含量均低于对照,差异较大的前3位为处理3、2和9,分别为0.21、0.20和0.17 mg·g-1;除处理3与对照间无显著差异外,其余处理叶片靛玉红含量与对照间均差异显著。菘蓝叶片总生物碱含量均高于对照,且与对照间差异显著,差异较大的前3位为处理8(34.48 mg·g-1)、处理9(25.59 mg·g-1)和处理15(21.48 mg·g-1)。菘蓝叶片靛蓝、靛玉红与总生物碱含量的分析结果 (表 6)表明,氮素形 态对靛蓝、靛玉红的影响是一致的,即从大到小为铵态氮、硝态氮、酰胺态氮,对总生物碱含量影响最显著的也是铵态氮,其次是酰胺态氮和硝态氮。综上分析发现,处理9(铵态氮为2.5 mmol·L-1,硝态氮为7.5 mmol·L-1,酰胺态氮为0 mmol·L-1)的靛蓝、靛玉红与总生物碱含量均有较高的值,说明菘蓝叶片靛蓝、靛玉红等生物碱类对铵态氮与硝态氮有明显的响应。
表 6 氮素处理下菘蓝叶片活性成分含量的直观分析
Table 6 Visual analysis of active component contents in leaves of I.indigotica under nitrogen treatment
成分Ingredient
酰胺态氮CO(NH
靛蓝含量Content of indigo靛玉红含量Content of indirubin总生物碱含量Content of total alkaloids
均值1 Mean value 1
均值2 Mean value 2
均值3 Mean value 3
均值4 Mean value 4
均值5 Mean value 5
极值 Extreme value
均值1 Mean value 1
均值2 Mean value 2
均值3 Mean value 3
均值4 Mean value 4
均值5 Mean value 5
极值 Extreme value
均值1 Mean value 1
均值2 Mean value 2
均值3 Mean value 3
均值4 Mean value 4
均值5 Mean value 5
极值 Extreme value
2.3 根系(R,S)-告依春和多糖含量对氮素形态的响应
由表 5可见:处理8、24、12、25的根系(R,S)-告依春含量均大于对照,其中处理8含量最大(2.26 mg·g-1),而其他处理的(R,S)-告依春含量均低于对照。表 7显示:硝态氮对(R,S)-告依春的影响最大,其次为铵态氮、酰胺态氮。各处理根系多糖含量对氮素的响应则与(R,S)-告依春的不同,所有处理根系多糖含量均高于对照,其中前3位为处理24、20和22,多糖含量分别为152.85、150.88和150.26 mg·g-1。表 7还显示:铵态氮对根内多糖含量的影响最大,其次是硝态氮、酰胺态氮。
表 7 氮素处理下菘蓝根系活性成分含量的直观分析
Table 7 Visual analysis of active component contents in roots of I.indigotica under nitrogen treatment
成分Ingredient
酰胺态氮CO(NH
R,S)-告依春含量Content of epigoitrin多糖含量Content of polysaccharides
均值1 Mean value 1
均值2 Mean value 2
均值3 Mean value 3
均值4 Mean value 4
均值5 Mean value 5
极值 Extreme value
均值1 Mean value 1
均值2 Mean value 2
均值3 Mean value 3
均值4 Mean value 4
均值5 Mean value 5
极值Extreme value
综合分析表明:处理8根系的(R,S)-告依春累积量最大(92.46 mg),显著高于处理4;处理4虽然叶片靛玉红累积量最大,但与处理8差异不显著,因此认为处理8为最佳组合(铵态氮为2.5 mmol·L-1、硝态氮为5.0 mmol·L-1、酰胺态氮为10.0 mmol·L-1)。该处理组合下既能获得较高的大青叶与板蓝根的生物量,又能获得更高的药用成分含量。
3.1 氮素营养对菘蓝生长的影响
氮素作为一种植物生长必需的营养物质,对植物代谢和生长有重要作用[]。目前有许多研究涉及到不同氮素形态及不同浓度的配比对作物的生长发育、有效成分含量及作物产量的影响。研究表明:硝态氮、铵态氮、酰胺态氮及硝态氮与铵态氮配施均可在一定程度上促进川芎的生长,延长其根长,增加茎蘖数和干物质积累,从而显著提高川芎的产量[];张朋等[]研究表明:NH+4-N和NO-3-N质量比为25: 75时较利于杭白菊的生长及品质提升;在总氮水平为15 mmol·L-1下,适量增加硝态氮比例,有利于促进夏枯草苗期生长、提高干物质积累和净光合速率[]。本研究中,硝态氮对菘蓝叶片与根系的鲜质量、根冠比影响最显著,NH+4-N、NO-3-N和CO(NH2)2-N的浓度比为1: 2: 4(处理8)的叶片和根系鲜质量最大,这与张朋等[]的研究结果类似,说明硝态氮更易为菘蓝吸收利用,同时配合施用有机氮(纯脲)更有利于菘蓝叶片与根系鲜质量的积累,从而提高了其作为大青叶与板蓝根的药用产量。而菘蓝生长前期酰胺态氮对叶片的生物量影响最大[],说明菘蓝在生长过程中不同阶段对氮素形态的需求是不同的,在生产中,还需要结合氮素对其功能叶片的叶绿素和光合效率等生理指标开展进一步的研究,以明确氮素对其生长调节的机制。
3.2 氮素营养对菘蓝有效成分积累的影响
在菘蓝栽培生产中,药农更多关心药材产量,在栽培管理过程中多注重增施氮肥以增加产量,但对其活性成分指标关注不足。目前有许多研究涉及到了药用植物栽培生产中氮素营养对其生理及活性成分的影响。胡龙娇等[]研究发现,在全硝态氮营养下,块茎中半夏总生物碱和鸟苷质量分数最高;李霞等[]研究表明:高比例的NO-3-N更有利于黄连根与茎中小檗碱的积累;何忠俊等[]研究表明:综合考虑滇重楼的生长、根茎质量、总皂甙产量,建议滇重楼施氮以CO(NH2)2-N和NO-3-N的质量比为6: 4较为适宜。本研究中,不同形态氮素配合施用明显地提高了菘蓝叶片与根系鲜质量,能满足生产上增产的基本要求,但是其叶片和根系活性成分指标则与鲜质量增加不一致,少数组合能增加活性成分含量,多数组合降低了靛蓝、靛玉红与(R,S)-告依春含量。究其原因可能与菘蓝对氮素的需求水平相关。靛蓝、靛玉红等生物碱类成分为菘蓝的次生代谢产物,在低于或高于菘蓝正常生长所需氮营养水平的逆境条件下,其体内次生代谢得以强化,由此出现缺氮的对照靛蓝、靛玉红及(R,S)-告依春含量均高于多数氮素处理组合。而在菘蓝生长幼苗期的处理中,菘蓝对氮素需求相对较高,表现为氮素处理后靛蓝、靛玉红含量均高于对照[]。这说明菘蓝生长过程中,不同阶段的代谢有很大差异,对氮素需求也不同,前期需要足量的氮素,后期为保证药用活性成分含量,需要适当地减少氮素营养。而氮素对菘蓝促生长与活性成分积累的影响如何达到最佳,还需要进一步的研究。
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