如何在不高温破坏蛋白质dna的前提下,除去蛋白质

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如何去除血清中的蛋白质,保留DNA
各位大神,请问如何去除血清中的蛋白质,但是要保证血清中的DNA含量不受影响?
是要自己提取啊,不是通过其他的方法啊
求具体方法
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>>>下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有[]A.提取细胞..
下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有
A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNAD.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化
题型:多选题难度:中档来源:江苏高考真题
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据魔方格专家权威分析,试题“下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有[]A.提取细胞..”主要考查你对&&DNA的粗提取与鉴定&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下:
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DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定:一、实验原理提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。1、DNA的溶解性(1)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14mol/L溶解度最低),利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。&(2)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。3、DNA的鉴定在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。二、实验设计1、实验材料的选取凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是使用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。2、破碎细胞,获取含DNA的滤液&动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。3、去除滤液中的杂质&方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离。4、DNA的析出与鉴定(1)将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。(2)取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。实验步骤——以洋葱为实验材料:1、称取30克已切碎的洋葱,放入研钵中,加入少量石英砂助研,倒入10mL 2mol/L的氯化钠溶液,充分研磨。 洋葱含有挥发性刺激物,有效减少刺激,才能使实验顺利进行。上课前,教师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿,使其凉透但又不能结冰;或将洋葱切成几大块,放入清水泡一会儿,让其挥发性刺激物溶于水,可以减轻刺激。然后将洋葱切碎备用。研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂,使DNA溶于2mol/L的氯化钠溶液,没必要将洋葱研成粥糊状,后者既浪费时间又影响实验效果。研磨时,切忌使用搅拌器(榨汁机)。使用搅拌器虽可以提高研磨效率,但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒,无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。只能将酒精直接倒入滤液中,许多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来,DNA藏在其中,无法分辨。学生看不到白色纤维状粘稠物的DNA。2、研磨后,用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中,得到滤液。3、向滤液中加入95%的酒精溶液20mL,沿烧杯壁缓缓倒入,不要震动或搅拌。此时,烧杯中的液体分为上、下两层,下层较浑浊,上层澄清,很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出,用玻璃棒可将其轻轻卷起。这就是记录生命遗传信息的重要物质——DNA。DNA析出的过程中,切忌震动和搅拌(不震动易于分层,我们就能很容易观察到上清液中的丝状物;搅拌会使非常柔软的DNA断裂成小段,不易取出)。如果用玻璃棒DNA不易卷起,可改用表面打毛的牙签,DNA提取物就缠绕在牙签上了。4、鉴定:取两支试管,编为1、2号,各加入2mol/L的氯化钠溶液2mL,向1号试管中加入一些白色纤维状物,振荡使其溶解,然后向两支试管中各加入2mL二苯胺试剂,沸水浴加热5分钟。DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度比较:
知识点拨:1、为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出DNA。2、加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶3、如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。4、为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。5、以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠防止血液凝固。6、加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。7、二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。8、DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系:当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,随浓度的升高,DNA的溶解度降低;当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时,随浓度升高,DNA的溶解度升高。9、盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程的DNA的损失。10、本实验不能用哺乳动物成熟的红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。 11、实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次日的是稀释 NaCl溶液,使DNA从溶液中析出。
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9581684937958048075880154869752015年诺贝尔化学奖的抗癌研究:
蛋白质是细胞修复DNA的工具!2015年诺贝尔化学奖颁给了阿齐兹·桑贾尔(Aziz
Sancar)、托马斯·林达尔(Tomas Lindahl)和保罗·莫德里奇(Paul
Modrich),表彰他们发现了细胞如何修复自身DNA的机制。我们体内有一群蛋白质专门负责看管DNA。它们持续不断地校对基因组,发现损伤就立刻着手修复。2015年的诺贝尔化学奖,表彰的就是发现这一修复机制的人。 常吃蛋白粉给您带来好处竟然这么多 蛋白粉的功效与作用一直受到人们的认可,对于蛋白粉的功效与作用很多人都感受过其多样的保健作用,蛋白粉的功效与作用不仅可以降血糖降血压蛋白粉的功效与作用还能瘦身减肥,因此蛋白粉的功效与作用受众群也有很多。掌握蛋白粉的吃法可以最有效的体验到蛋白粉的10大功效与作用。蛋白粉是什么?蛋白粉的介绍:市面上的蛋白粉由黄豆蛋白、乳清蛋白、乳清、卵磷脂制成,Nuskin如新Appeal蛋白粉:蕴含21种氨基酸,其中包括人体所需的8种必须氨基酸,特别添加枸杞粉、膳食纤维及β-胡萝卜素来强化营养,口味分香草和巧克力。推荐:全家人的理想早餐饮品;食量少或少量多餐者的营养补充品;运动后的营养补充品,孕妇的优质蛋白补充品。其主要成份乳清蛋白,含有充足的蛋氨酸,弥补了黄豆蛋白的不足,能均衡提供21种人体所必需的氨基酸。蛋白粉的功效与作用1、对于高血压、高血脂蛋白粉的作用是低胆固醇、低脂肪、无糖优质蛋白,有利于防止热量过剩和脂肪合成增加,降低血压,减少病发症发生;有利于高血脂症患者降低血脂与胆固醇,减少病发症发生。蛋白粉的功效与作用2、对于糖尿病蛋白质富含亮胺酸,有刺激胰分泌的突出作用。蛋白粉产生饱腹感,可有效减低血糖。蛋白粉的功效与作用3、对于冠心病凡冠心病患者均是极度缺乏蛋白质,冠状动脉粥样硬化,致管腔狭窄,血粘度高,供血艰难,而蛋白粉有助改善血管弹性,调整血液功能。蛋白粉的功效与作用4、对于脂肪肝、肝炎、肝硬化肝脏是中性脂肪代谢、合成、运转、利用的主要器官,如果运转失衡,中性脂肪就堆积,形成脂肪肝。蛋白粉低脂优质蛋白,是理想的蛋白质食品,高效防止脂肪肝。蛋白粉所含之8种必须氨基酸,能快速有效的合成身体所需要的蛋白质,以修复坏死的肝细胞,促进肝功能恢复。医学证明,食物中缺乏蛋白质和胆碱等抗脂因子时,可损害肝脏并诱发硬化。蛋白粉的功效与作用5、对于消化溃疡蛋白粉是溃疡修复的最好来源。可迅速促进溃疡面愈合,保护胃粘膜不受损。蛋白粉的功效与作用6、对于神经衰弱神经衰弱者常感脑力、体力不支,食欲减退,易疲劳,工作效率低下,入睡困难,多梦易醒,烦躁不安。科学证明,失眠患者脑中的5羟色胺合成减少。而蛋白粉的作用中的色氨酸的摄入,可缓解病人生理压力,改善睡眠。蛋白粉的作用帮助补充脑力与体力。蛋白粉的功效与作用7、对于肥胖症体重超过理想20%为肥胖,除遗传、内分泌因素外,大多数为食物性肥胖。为控制高脂、高糖饮食,增加蛋白粉可以减少过多热量摄入,当纯净的蛋白质的摄入量充足了,可以减少对高脂肪高糖食物的嗜好;对于减肥,保护心脏均很重要。蛋白粉的功效与作用8、对于手术、化疗、放疗蛋白质粉含有21种氨基酸,合成体内活性酶、抗体、激素等物质,协调胃功能、刺激骨髓造血系统,增加细胞解毒能力,抗感染,减轻病情,促进愈合。蛋白粉的功效与作用9、对于癌症蛋白质粉含有21种氨基酸,能提高机体免疫,增强抗癌症及抗肿瘤能力。蛋白粉的功效与作用10、对于炎热环境下的人群暑期高温,食欲下降,消化功能减退,体内蛋白质分解加速。蛋白质粉易吸收与利用,补足后有利防暑。蛋白粉的吃法有哪些?推荐三类人正确吃对蛋白粉:蛋白粉的吃法1、普通人怎样服用(1)蛋白粉作为高浓缩的蛋白粉,儿童每天不易服多,一平匙即可。(2)为了不破坏蛋白质的活性,请在温水或冷水中让其完全溶解,溶解在牛奶、饮料中亦可。蛋白粉的吃法2、专业健美人士服用方法(1)蛋白粉因其优异的生理价值,高于鸡蛋、牛肉的生物价,而受到健身爱好者的极其重视,因此我们必须注意服用的时机。(2)标准服用方法:锻炼完的三十到四十分钟内,喝30 克蛋白粉。为什么运动后喝,是因为要想达到练哪里大哪里的效果,必需等训练完肌肉充血膨胀后蛋白粉的吃法3、减肥人群怎么吃(1)早餐营养原料:250ml鲜奶+1个水果+2勺蛋白粉奶昔。做法:将上述原料一同放入果汁搅拌机,搅拌5分钟即可。吃营养早餐的前2个月内,如果你常拉稀,放屁较多,那么恭喜你!你体内的排毒程序开始运行,过一段时间这种现象自会消失,不用担心。随着体内毒素不断排解,人的体重也会随之减轻。只要你能坚持吃,不仅能维持体内的营养平衡,还可保持身材苗条,一般的话吃够4个月,体重将减轻6-8斤。(2)减肥晚餐:晚上冲两勺蛋白粉一杯,再吃一些拌菠菜或拌海带补充纤维素和铁质,因为减肥容易乏力,增加铁质对运动有好处。可以吃一小份这样吃完就不不会很饿,半小时候再运动一下减肥效果更佳。蛋白粉的功效适宜人群: 蛋白粉的功效适宜人群1.妊娠期呕吐剧烈的孕妇有些孕妇在妊娠期由于严重的害喜现象,经常是吐的昏天暗地,从而导致吃饭没胃口并且摄食较少。这类人群体内蛋白质极度匮乏,但由于蛋白质对胎儿的发育起着重要的作用,因此在这个时候需要通过补充蛋白质粉来补充蛋白质,以此来保证胎儿的正常发育以及母体的健康。蛋白粉的功效适宜人群2.癌症化疗期病人处于癌症化疗期的病人通常都几乎不能在进食食物,因此未免营养不良,所以才需要通过蛋白质粉来进行补充,同时以此来维持患者的生命。蛋白粉的功效适宜人群3.胃肠疾病及术后病人患有胃肠道疾病以及动过手术的人群,他们这个时候的消化能力要比平常人差很多,因此不适宜食用常人所吃的食物。而食用蛋白质粉除了能帮助他们补充营养以外,同时对身体的恢复也有着一定的辅助作用。
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如果没有tRNA,如何运输氨基酸?如何形成肽链?
+ 加入我的果篮
的话:说的是没有mRNA吧,没有tRMA估计不行在离体的情况下有这种情况的!
仅仅是指不在细胞内吧,体外表达系统已经可以做到了,只要把需要的一系列酶和小分子原料之类的都准备好
体外翻译是在有需要的酶和tRNA的前提下进行的,一般是把细胞的细胞质提取出来,去掉mRNA,作为反应体系
微生物学博士生
没有tRNA是不可能的,没有mRNA是可以的
模拟体内环境,提供模板、底物、核糖体、酶、缓冲环境吧
的话:体外翻译是在有需要的酶和tRNA的前提下进行的,一般是把细胞的细胞质提取出来,去掉mRNA,作为反应体系正解&&……
lz高中生?参看高中生物竞赛讲义
这句话的意思大概是说DNA指导蛋白质合成不需要生物体存活吧~
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