生长周期长的细菌做扫描电镜花生生长会出现的问题菌体大小不一样的情况吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-12-11 09:44 标签： 细菌适宜生长的ph
细菌样品要做扫描电镜,样品预处理中有用到PBS缓冲液洗涤,请问PBS就单纯的磷酸缓冲液就可以吗?pH是多少?
是的,PBS就是磷酸缓冲液,PH7.2左右
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标题: 请问有关做细菌扫描电镜和透射电镜的样品制备步骤,谢谢!(扫描电镜,细菌,样品制备,透射电镜)
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回复这里有一个做放线菌扫描点镜的步骤：(1)制备高氏一号平板，每板20ml。(2)用无菌接种环挑取海洋放线菌的孢子，划线接种于平板上。(3)将无菌盖片以45度左右的角度并排插入平板培养基中，插人深度为盖片的三分之一左右，28℃培养3天左右。选择放线菌菌丝生长良好的插片,扫描电镜观察孢子链形态及其孢子表面结构。操作过程如下：取孢子—4%的戊二醛固定—PBS清洗—1%锇酸后固定—PBS清洗—30%~100% 乙醇脱水—丙酮：醋酸异戊酯（1：1）置换—醋酸异戊酯置换—液态CO2临界点干燥—上台—镀金—待观察镀金片。在工作电压20KV下，用扫描电镜观察孢子的形态与表面结构。回复谢谢dreamercess的帮助！
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电话：021-在我们的周围、甚至是每个人的体表和体内会存在着细菌和真菌，与我们的生活息息相关．Ⅰ、下列是“检测教室中的细菌和真菌”的实验步骤：①用牛肉汁（或土壤浸出液、牛奶）与琼脂混合配制培养基；②将配制好的培养基平铺在两个培养皿中进行高温处理，冷却后使用；③在教室打开培养皿A，暴露在空气中10分钟，再盖上，封好．培养皿B不做任何处理．④将两套培养皿同时放入恒温箱中培养，几天后观察培养皿中菌落的生长情况．（1）在第一步配置培养基的操作中，牛肉汁起什么作用？DA、使培养基闻起来很香，容易吸引细菌&&&&&&&&&&&B、使培养基表面看起来很黏稠C、为细菌等的生物的生活提供水分和无机盐&&&&&&&D、为细菌等生物的生活提供有机物（2）在第2步操作中培养皿和培养基进行了高温处理，目的是杀菌．（3）步骤3的操作，相当于细菌、真菌一般培养方法中的哪一个步骤？接种．（4）在实验过程中选取两套培养皿的目的是进行对照．（5）假设你手上此刻有100个细菌，细菌的繁殖速度按每30分繁殖一代计算，在没有洗手的情况下，2小时后你手上的细菌数目是多少个？1600个&（2分）Ⅱ、在培养皿A获得了细菌，细菌的结构示意图如下，请据图回答下列问题．（1）一个细菌是一个细胞，它有[3]DNA集中的区域，但没有成形的细胞核．（2）当[5]细胞壁增厚时，细菌能够形成芽孢，它是细菌的休眠体，以抵抗不良环境．（3）与植物细胞相比，细菌体内没有叶绿体，所以不能进行光合作用制造有机物，只能依靠现成的有机物生活，把有机物分解成简单的无机物．在生态系统的成分中，属于分解者．（4）从细菌的形态上看此细菌属于杆菌，这种细菌会运动是根据图中[1]鞭毛作出推断的．Ⅲ、真菌是一类常见的微生物，与我们的关系十分密切（1）真菌是通过产生大量的孢子来繁殖后代的，细胞内已经有真正的细胞核．（2）有些真菌可以产生杀死某些致病细菌的物质，这些物质称为抗生素．（3）酿酒、做面包和蒸馒头都用到了哪一类真菌？酵母菌（2分）
解：Ⅰ、（1）细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物．而细菌没有叶绿体，不能进行光合作用制造有机物，必须依靠现成的有机物生活．因此首先要配制含有营养物质的培养基，可以用牛肉汁加琼脂熬制．牛肉汁含有丰富的有机物，为细菌等生物的生活提供有机物．（2）在第2步操作中培养皿和培养基进行了高温处理，目的是杀菌，以防杂菌对实验的干扰，（3）步骤③在教室打开培养皿A，暴露在空气中10分钟，让空气中的细菌真菌或孢子落入培养皿，因此相当于细菌、真菌一般培养方法中的接种．（4）为研究变量对研究对象的影响，需要设计对照实验，这样可以增强实验结论的说服力．在对照实验中，除了已选择的实验变量不同外，其他条件应完全相同．在实验过程中选取两套培养皿的目的是进行对照．提高实验结果的可信度．（5）1个细菌繁殖次数为N次后细菌的个数是2N个．假设你手上此刻有100个细菌，细菌的繁殖速度按每30分繁殖一代计算，在没有洗手的情况下，2小时后细菌分裂了4次，因此你手上的细菌数目是100×24═1600（个）．Ⅱ、（1）一个细菌是一个细胞，没有成形的细胞核，只有DNA集中的区域，DNA位于细胞的中央因此是[3]DNA．（2）细菌最外面是⑥荚膜有保护作用，紧贴荚膜的是[5]细胞壁，当细胞壁增厚时，细菌能够形成芽孢，它是细菌的休眠体，以抵抗不良环境．（3）细菌体内没有叶绿体，不能进行光合作用制造有机物，只能依靠现成的有机物生活，把有机物分解成简单的无机物．因此，在生态系统的成分中，细菌属于分解者．（4）该细菌具有较长①鞭毛，鞭毛可以摆动，因此这种细菌会运动．Ⅲ、真菌是一类常见的微生物，与我们的关系十分密切（1）真菌的基本结构有细胞壁、细胞膜、成形的细胞质、细胞核，没有叶绿体．孢子生殖，孢子落到适宜的环境就会萌发生出菌丝，形成新个体．大多数真菌用孢子繁殖后代．因此真菌是通过产生大量的孢子来繁殖后代的，细胞内已经有真正的细胞核．（2）有些真菌可以产生杀死某些致病细菌的物质，这些物质称为抗生素如青霉产生的青霉素有较强的杀菌作用．（3）做馒头或面包时，经常要用到酵母菌，酵母菌经过发酵可以分解面粉中的葡萄糖，产生二氧化碳，二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得馒头或面包暄软多孔．酵母菌在适宜的温度和无氧条件下，能将糖转化为酒精，因此，酵母菌的发酵作用又被称为酒精发酵，传统的酿酒原料是富含淀粉的谷物，我国劳动人民在长期的生成实践中，创造出来独特的酿酒工艺．故酒味的产生与酵母菌有关．因此酿酒、做面包和蒸馒头都用到了酵母菌．故答案为：Ⅰ、（1）D；（2）杀菌；（3）接种；（4）进行对照；（5）1600个；Ⅱ、（1）DNA；（2）芽孢；（3）分解者；（4）鞭毛；Ⅲ、（1）孢子；细胞核；（2）抗生素；（3）酵母菌．本题考查的是“检测教室中的细菌和真菌”、细菌真菌的结构、繁殖、营养和与人类生活的关系．可以从细菌真菌的培养过程、每一步操作的目的原因、细菌真菌的结构特点、生殖方式、营养方式、与人类生活的关系方面来切入．细菌样品要做扫描电镜,样品预处理中有用到PBS缓冲液洗涤,请问PBS就单纯的磷酸缓冲液就可以吗?pH是多少?
是的,PBS就是磷酸缓冲液,PH7.2左右
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【求助】细菌的透射电镜和扫描电镜怎么处理
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这个帖子发布于3年零287天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请教下各位老师 我的实验比较两种软膏对细菌的效果 做扫描电镜和透射电镜 有知道该怎么处理细菌的吗
不知道邀请谁？试试他们
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扫描电镜：（摘自本人毕业论文）固定：2.5%戊二醛浸泡2小时，用0.1M pH7.2的磷酸缓冲液清洗3次；用1%锇酸固定2小时，磷酸缓冲液清洗3次。脱水：乙醇梯度脱水，样品用30%，50%，70%，85%，95%逐级浸泡各5分钟，再用100%乙醇浸泡2次，每次5分钟。冷冻干燥和喷金：这个我是让电镜室的工作人员干的~~~透射也做过一次，好像差不多，具体忘记了......毕业论文上没写~~~
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谢谢，不过我的问题是固定之前怎么处理细菌与药物的？
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透射电镜要制成悬液，然后离心成团固定，这个需要10六次方以上的菌量，如果细菌量少，可以用琼脂预包埋一次，增大体积后再用戊二醛固定。扫描的程序忘记了，好像是悬液滴到玻片上再固定，最后吧玻片粘到样品托上观察，10多年了，不知道还是不是这个流程。
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