融合蛋白linker查询网站之间不加linker可以么

融合蛋白linker的设计 - 实验交流 - 生物秀
标题: 融合蛋白linker的设计
摘要: [融合蛋白linker的设计] 请教大家一个问题:融合蛋白中间的柔性肽linker如何设计? 我看了一些文献,说其设计要参考大肠杆菌(Escherichia coli)的偏好密码子序列。如何知道大肠杆菌(Escherichia coli)的偏好密码子序列?它与柔性肽的设计有什么样的关系? 关键词:[融合蛋白 大肠杆菌 密码子序列]……
请教大家一个问题:融合蛋白中间的柔性肽linker如何设计? 我看了一些文献,说其设计要参考大肠杆菌(Escherichia coli)的偏好密码子序列。如何知道大肠杆菌(Escherichia coli)的偏好密码子序列?它与柔性肽的设计有什么样的关系?
柔性Linker通常采用支链少的Gly和Ser,组合没什么特别要求,但很多人采用Gly4-Ser组合,你可以参考一些文章,对于大肠杆菌(Escherichia coli)偏爱密码子,你Google一下就可以查到了
如何知道大肠杆菌(Escherichia coli)的偏好密码子序列?它与柔性肽的设计有什么样的关系?大肠杆菌(Escherichia coli)的偏好密码子序列在NCBI上可以查到,它与Linker的设计没有太大关系。设计Linker关键是选好氨基酸(侧链小的、柔韧性好的……),如果在E.coli表达的话最好使用E.coli的偏好性密码子,这样在翻译到Linker时才会顺利通过,不影响表达量、减少截短的表达产物。Amino Preferredacid codon% useAlaGCC34ArgCGC38AsnAAC54AspGAT63CysTGC55GlnCAG66GluGAA68GlyGGC39HisCAT57IleATT50LeuCTG49LysAAA75MetATG100PheTTT57ProCCG51SerAGC26ThrACC42TrpTGG100TyrTAT58ValGTG36TrmTAA62出处:Comments to Todd D. Porter, Pharmaceutical Sciences, University of Kentucky College of Pharmacy, Lexington, KY . Phone 859 257-1137; FAX 859 257-7564Last Modified: September 28, 2001 Copyright & 1999, University of Kentucky Chandler Medical Center
&大肠杆菌(Escherichia coli)的偏好密码子序列在NCBI上可以查到&怎么找出来的?????
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电话:021-人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化 - 《中国学术期刊(网络版)》
《中国学术期刊(网络版)》
人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化
【Author】
YAN Cun-Ling, XU Guo-Bin
*, XIA Tie-An (Department of Laboratory Medical Science, Peking University First Hospital,Beijing 100034, China)
【摘要】 提取人心肌组织总RNA,RT PCR扩增出人心肌肌钙蛋白I(cardiactroponinI,cTnI)和肌钙蛋白C(TnC)基因,利用人工合成的可编码 19个中性氨基酸残基为主的DNA序列(Linker),将cTnI和TnC基因连接,插入到质粒pET15b中,将鉴定正确的重组pET15b质粒转化入大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中,用异丙基 β D$C硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达.结果在大肠杆菌中成功实现了全长cTnI C融合蛋白(cTnI linker TnC)的稳定可溶性高表达,在摇瓶中表达量可达 2 1mg/L.利用目的蛋白N端的组氨酸 标签"(His tag),经一步Ni2 +
Sepharose柱亲和层析纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯蛋白质.经初步研究,cTnI C具有较好的免疫原性和稳定性,有望成为cTnI测定系统可溯源的候选参考物质,推进cTnI检测的标准化进程
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分子内二硫键对herv囊膜蛋白融合核心结构的影响
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