请教胆囊癌的早期症状细胞株noz培养基用什么Williams?

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-04-29 07:29 标签： 胆囊癌晚期
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sirna干扰vegf-d的表达对人胆囊癌细胞增殖、侵袭及裸鼠移植瘤淋巴生成和淋巴转移影响
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siRNA干扰VEGF-D的表达对人胆囊癌细胞增殖、侵袭及裸鼠移植瘤淋巴生成和淋巴转移影响.pdf94页
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siRNA 干扰VEGF-D 的表达对人胆囊癌细胞增殖、侵袭及裸 鼠移植瘤淋巴生成和淋巴转移的影响 摘 要 原发性胆囊癌 Gallbladder carcinoma，GBC 是最常见的胆道系统恶性肿瘤，
居消化系统肿瘤第五位。因胆囊癌的早期发现和诊断困难，多数胆囊癌患者就诊
时已是晚期，目前胆囊癌5 年生存率仅5%～10%，肝和淋巴结是胆囊癌主要的
转移途径，而且淋巴结转移在早期就可出现，提示预后很差。因此，探索胆囊癌
淋巴转移的机制，研究针对肿瘤淋巴转移过程的有效治疗方法，显得尤为重要。
新近研究表明 VEGF-C 和 VEGF-D 通过与其受体血管内皮生长因子受体
-3 vascular endothelial growth factorreceptor-3，VEGFR-3 结合，诱导肿瘤淋巴管
生成，促进肿瘤淋巴结转移。本研究通过慢病毒介导siRNA 干扰VEGF-D 基因
表达，观察对人胆囊癌细胞体外增殖、侵袭及裸鼠体内皮下以及原位接种移植瘤
生长和淋巴转移的影响。
1. siRNA 干扰VEGF-D 的表达对人胆囊癌细胞增殖、侵袭的影响 1）高表达VEGF-D 胆囊癌细胞株筛选：通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR ）
和蛋白印迹（Western-blot ）的方法探讨 VEGF-D
在胆囊癌细胞株（GBC-SD、
SGC-996、NOZ ）中的表达情况，筛选出在蛋白水平高表达VEGF-D 的胆囊癌细
胞株NOZ 。 2）VEGF-D
有效siRNA 序列的筛选：按照siRNA 序列设计原则设计并合
成4 条针对VEGF-D 基因的siRNA，脂质体转染胆囊癌细胞NOZ ，RT-PCR 检
测转染特异siRNA 后胆囊癌细胞VEGF-D mRNA 的表达情况，挑选最有效抑制
VEGF-D 基因表达的一条干扰序列（GCTATGGGATAGCAACAAATG ）进入后续
实验。 3）VEGF-D siRNA 慢病毒载体的构建：双酶切pGCSIL-RFP 慢病毒载体后
构建穿梭质粒，再与骨架质粒共转染293 细胞，同源重组，酶切鉴定，包装
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人胆囊癌细胞系GBC—SD的建立
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