各位老师，突触核蛋白白内参Histone，选哪个型号比较好

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-06-15 05:03 标签： 核蛋白体
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增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系统性红斑狼疮）患者的血清中首次发现并命名，因其只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名。PCNA是一种分子量为36KD的蛋白质，在细胞核内合成，并存在于细胞核内，为DNA聚合酶的辅助蛋白。由于其在细胞核内稳定表达，因此其抗体被广泛应用于细胞核蛋白的内参抗体。
怎么选择一款高品质细胞核内参抗体？
常用的细胞总蛋白质内参有GAPDH和细胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。对于一些植物的样本，则需要特别的植物Actin蛋白作为内参。当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H），或者增殖细胞核抗原（PCNA）等为核内参抗体。除了这些，其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B，在一些文献报道中，Erk2、TATA binding protein（TBP）以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的问题是核蛋白内参的选择需要考虑实际的试验环境，比如在涉及细胞增殖相关试验中，c-Jun由于自身表达变化就不适合做内参；而在凋亡实验时，TBP、Lamin等也不适合作为内参。
另外，我们还需要根据目的蛋白的大小选择合适的核内参，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参。PCNA的检测分子量大约在28kD，而Histone H3的检测条带大约在18kD，因此PCNA比较适合用于检测目标蛋白在较大的WB实验，而Histone H3则不适合用于13kD-23kD大小的目的蛋白内参。另外，虽然PCNA是最合适的核内参抗体之一，但是在某些条件下，一些影响增殖的因素会导致样品间PCNA含量的变化，就不适合作为内参。
PCNA内参抗体免疫组织化学的效果也很不错，是一款非常适合做免疫组化对细胞骨架进行染色定位的抗体产品。另外，也有客户报告使用该抗体用于组织的荧光染色，也取得了意外的效果。
Abbkine还提供大包装1ml以及更大规格定制的PCNA标签抗体，非常适合经常进行内参验证或校准的免疫学实验需求。为方便客户的使用， 上述产品，Abbkine均在中国备有现货。Abbkine针对中国市场，提供全球化的产品质量追踪和售后服务以及保障，如果您在使用过程中有任何问题， 请直接与其当地代理商艾美捷科技有限公司联系。
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标题: WB中，核蛋白内参和总蛋白内参的问题
摘要: [WB中，核蛋白内参和总蛋白内参的问题] 被告知核蛋白内参Histone和总蛋白内参贝塔-actin分别是用于核蛋白的蛋白衡量和总蛋白的蛋白衡量，但是我不知道为什么要这样，那么如果用Histone用于总蛋白的蛋白定量会怎么样？或者actin用于核蛋白的衡量会怎么样？谢谢了 关键词:[总蛋白 核蛋白 内参 蛋白定量 胞浆蛋白 组蛋白 核酸]……
被告知核蛋白内参Histone和总蛋白内参贝塔-actin分别是用于核蛋白的蛋白衡量和总蛋白的蛋白衡量，但是我不知道为什么要这样，那么如果用Histone用于总蛋白的蛋白定量会怎么样？或者actin用于核蛋白的衡量会怎么样？谢谢了回复用胞浆蛋白来估算核蛋白就跟薛定谔的猫一样微妙~~回复
被告知核蛋白内参Histone和总蛋白内参贝塔-actin分别是用于核蛋白的蛋白衡量和总蛋白的蛋白衡量，但是我不知道为什么要这样，那么如果用Histone用于总蛋白的蛋白定量会怎么样？或者actin用于核蛋白的衡量会怎么样 ... Histone用于总蛋白的蛋白定量会怎么样？
或者actin用于核蛋白的衡量会怎么样？
我不知道你为什么这么想问题。也不知道你为什么有这种疑问？
组蛋白是和DNA等核酸组合在一起形成核蛋白，换句话，核蛋白组成成分是组蛋白，也非常保守，不会因为受到处理而减少。所以用于作为内参。
B-actin，至于为什么作为总蛋白的内参，我不想过多解释。
但是如你所说，如果反过来，肯定不行。回复
被告知核蛋白内参Histone和总蛋白内参贝塔-actin分别是用于核蛋白的蛋白衡量和总蛋白的蛋白衡量，但是我不知道为什么要这样，那么如果用Histone用于总蛋白的蛋白定量会怎么样？或者actin用于核蛋白的衡量会怎么样 ... 有些人提取蛋白会选择胞浆、胞核分开提取，不提取总蛋白，所以做内参要选择相应部位表达稳定的蛋白。beta-actin在胞浆中表达高效稳定，而总蛋白主要成分就是胞浆蛋白，所以beta-actin可以作为总蛋白的内参。理论上细胞核内不表达beta-actin，所以不能用于核蛋白内参。同理，细胞核内的蛋白用于做总蛋白的内参，自然也不合理，内参自当选择与目的蛋白表达部位相同的蛋白才有说服力。
实际情况中，无论什么试剂盒，都不可能完全将胞浆、胞核蛋白完全分离开，提取时总会有交叉污染。就是提取的核蛋白肯定会有beta-actin，而胞浆蛋白也会有核蛋白的存在，所以你用两种蛋白做内参都能有结果，只是有的科学合理，有的不科学，没有说服力。回复
Histone用于总蛋白的蛋白定量会怎么样？
或者actin用于核蛋白的衡量会怎么样？
我不知道你为什么这么想问题。也不知道你为什么有这种疑问？
组蛋白是和DNA等核酸组合在一起形成核蛋白，换句话，核蛋白组 ... 高手高手高高手。回复
有些人提取蛋白会选择胞浆、胞核分开提取，不提取总蛋白，所以做内参要选择相应部位表达稳定的蛋白。beta-actin在胞浆中表达高效稳定，而总蛋白主要成分就是胞浆蛋白，所以beta-actin可以作为总蛋白的内参。理论 ... 核浆分离提取蛋白的结果真的很不可靠回复
核浆分离提取蛋白的结果真的很不可靠 为什么。我打算做植物的核蛋白提取，选择什么样的核内参蛋白比较好，给个意见吧！回复b-actin是胞浆表达，Histone是胞核表达。细胞蛋白主要是在胞浆，所以b-actin的量要比Histone大的多。
用b-actin还是Histone做内参，主要看你提取的是总蛋白还是核蛋白。如果提的是总蛋白，必须用b-actin，提的是胞核蛋白，必须用Histone，如果你提取的是总蛋白，但用了Histone，结果可能是做不出来或者条带很弱（Histone相对于总蛋白来说太少）。而如果提取的是核蛋白，用b-actin做内参，结果则可能是做不出来（核内没有表达），或者内参条带不均匀（混入少量胞浆蛋白）
一般来说，如果你的目的蛋白在胞浆表达，那当然毋庸置疑，提取总蛋白，用b-actin，但如果在核表达，可以提总蛋白，也可以提核蛋白。但有些核蛋白的表达量比较低，提总蛋白可能就太稀了，所以要专门提取核蛋白。
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为什么选择组蛋白H3为细胞核的内参指标呢？
当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H），或者增殖细胞核抗原（PCNA）等为核内参抗体。除了这些，其它常见的核蛋白内参还有K70， K80， Lamin A和B。但是需要注意的问题是核蛋白内参的选择需要考虑实际的试验环境，比如在涉及细胞增殖相关试验中，c-Jun由于自身表达变化就不适合做内参；而在凋亡实验时，TBP、Lamin等也不适合作为内参。反之，组蛋白Histone H3等由于是染色体的组成型表达组分，表达比较稳定，经常被作为最广泛的核内参使用。
为什么推荐Abbkine品牌的组蛋白H3内参抗体（克隆号2D10）？
目前市面上能提供的Histone H3抗体有国产分装或原产的，国产分装的Histone H3抗体在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价也有损失。而原产于国内实验室的Histone H3抗体有些具有较好的检测活性，在批次之间的稳定性上较难控制，而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。至于原装进口供应Histone H3抗体的进口品牌并不多，仅Abcam、Sigma等等几个品牌能够提供Histone H3抗体，但是其在性价比上远逊于Abbkine产品。
由此，我们向您推荐Abbkine的Anti-Histone H3 Mouse Monoclonal Antibody （2D10），与Abcam一样，Abbkine的Histone H3抗体的免疫原是重组的Histone H3全长蛋白，经过不断筛选和优化，终于得到最好的细胞株（2D10），适用于大多数哺乳动物的Histone H3蛋白。Abbkine作为美国一家生产型品牌，为多个国际知名品牌提供OEM服务，因此其价格低廉，其质量也经受过市场检验。该抗体可以用于IF, IP, WB。
还提供1ml大包装以及更大定制规格的Histone H3抗体，非常适合经常进行Histone H3免疫学检测的实验需求。为方便客户的使用， 上述产品，Abbkine均在中国备有现货。Abbkine针对中国市场，提供全球化的产品质量追踪和售后服务以及保障，如果您在使用过程中有任何问题， 请直接与Abbkine当地代理商或者艾美捷科技有限公司联系。
美国Abbkine品牌是一家提供高性价比免疫学和细胞学科研产品及解决方案的品牌，艾美捷将其引入中国，作为其中国区域代理，将为客户提供最具性价比的常规免疫学试剂，如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗，抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家国际知名品牌的的中国代理或区域代理，艾美捷能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣，请致电免费客户专线400-到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。
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