为什么脾脏浆细胞乳腺炎一般情况下不产生lge

D:lgM和lgE;()5:初次免疫应答中出现最早的抗体,再次免疫应;A:lgAlgDlgEB:lgMlgGlgEC:;()6:Fc受体介导生物学效应的主要表现不包括:;C:介导I型超敏反应作用D:激活补体系统;()7:白喉和破伤风对应的全身感染病症是:AA:;()8:构成细菌毒力的物质基础是:DA:基本结构;()9:芽孢,荚膜,鞭毛,菌毛的各自最主要特点是
D:lgM和lgE (
)5:初次免疫应答中出现最早的抗体,再次免疫应答产生的最主要抗体,参与I型超敏反应的抗体分别为:B A:lgA
lgE C:lgD
)6:Fc受体介导生物学效应的主要表现不包括:D A:调理作用 B:ADCC作用 C:介导I型超敏反应作用 D:激活补体系统 (
)7:白喉和破伤风对应的全身感染病症是:A A:毒血症 B:脓毒血症 C:败血症 D:菌血症 (
)8:构成细菌毒力的物质基础是:D A:基本结构 B:基本形态 C:侵入的数量 D:侵袭力和毒素 (
)9:芽孢,荚膜,鞭毛,菌毛的各自最主要特点是:B A:中介体,黏附,运动,接合作用 B:休眠体,保护,运动,电镜可见 C:休眠体,黏附,运动,电镜可见 D:中介体,保护,运动,接合作用 (
)10:病毒的灭活实际上就是指在理化因素的作用下失去了:D A:血凝特性 B:诱生干扰素的能力 C:抗原性 D:感染性
1.经抗原刺激后,滤泡区充满增值,分化的(
),称为次级淋巴滤泡。 A.T细胞
D.淋巴细胞
2.补体可介导免疫应答和(
)。 A. 吞噬作用
B. 过敏反应
C. 炎症反应
D.组织修复 3.不同种属生物间存在着的共同抗原称(
)。 A.异种抗原
B.异嗜性抗原
C.同种异型抗原
D.自身抗原 4.下面是抗体非受体介导的生物学效应是(
). A.激活补体系统
B.调理作用
C.ADCC作用
D.介导1型超敏反应作用 5.正常人血清中含量最少,与超敏反应和抗寄生虫免疫密切相关的免疫球蛋白是(
D.IgD 6.下列哪项不是黏附分子的免疫生物学作用(
) A.参与炎症反应
B.参与淋巴细胞归巢与再循环
C.参与免疫应答过程 D.参与病理性免疫损伤 7.细菌内毒素成分是(
) A.肽聚糖
B.脂多糖 C.H抗原
D.荚膜多糖 8.干扰素本质是(
) A.抗病毒的化学治疗剂 B.病毒抗原 C.病毒复制过程中的产物 D.病毒感染机体产生的抗体 9.以“出芽”方式从细胞中释放的病毒是(
)。 A.麻疹
B.腺病毒 C.柯萨奇病毒
D.ECHO病毒 10.以破胞方式从细胞向外释放的病毒是(
) A.流感病毒
B.麻疹 C.脊髓灰质炎病毒
D.腮腺炎病毒
选择题 1 中枢免疫器官包括( ) A脾和淋巴管
B骨髓和淋巴管 C淋巴结和淋巴管
D骨髓和胸腺 2 下面不是固有免疫的特点是( ) A非特异性
B先天性 C无记忆性
D无遗传性 3 抗原特异性决定于( ) A抗原分子的复杂性
B抗原决定簇的性质、数目和空间结构 C抗原的分子量
D抗原的异物性 4 细胞的结构中与革兰氏染色性有关的是( ) A核质
B细胞膜 C细胞壁
D质粒 5 下列哪种细胞不属于抗原递呈细胞( ) A巨噬细胞
B树突状细胞 CB淋巴细胞
D红细胞 6 外周免疫器官不包括( ) A 淋巴结
B脾脏 C黏膜相关淋巴组织
D胸腺 7 细菌内毒素的成分是( ) A H抗原
B肽聚糖 C脂多糖
D荚膜多糖 8 下列哪些细胞不表达HLAⅠ类抗原( ) A红细胞
B网织细胞 C血小板
D白细胞 9 需要用电子显微镜才可以看到的结构是( ) A荚膜
B菌毛 C芽孢
D鞭毛 10 下列关于细胞因子哪项是错误的( ) A一般是小分子量蛋白质
B与CKR结合后才能发挥作用 C生物学效应具有拮抗性
D主要以内分泌性方式发挥作用
单选:DDBCD DCABD 微免题库 二、单选 1、肺炎球菌可形成( ) A. 荚膜 B. 芽孢 C. 鞭毛 D. 菌毛 2、MHC分子又可以称为( ) A. 主要组织相容性抗原 B. MHC C. HLA复合体 D. MHC基因 3、再次产生应答时抗体产生的特点是( ) A. lgM抗体显著升高 B. 抗体产生维持时间较长 C. 潜伏期较长 D. 抗体亲和力较低 4、大剂量的TD抗原可诱导( ) A. T细胞和B细胞均产生免疫耐受 B. B细胞产生免疫耐受 C. T细胞产生免疫耐受 D. 以上均不对 5、下列结构中不属于细菌的特殊结构的是( ) A. 荚膜 B. 鞭毛 C. 质粒 D. 菌毛 6、病毒复制周期正确的是( ) A. 吸附-穿入-脱壳-生物合成-装配与释放 B. 吸附-脱壳-穿入-生物合成-装配与释放 C. 吸附-脱壳-穿入-装配与释放-生物合成 D. 吸附-穿入-脱壳-装配与释放-生物合成 7、细菌对外界抵抗力最强的是( ) A. 细胞壁 B. 荚膜 C. 芽孢 D. 细胞膜 8、最简单的病毒体结构组成名称是( ) A. 核酸+衣壳 B. 核酸+衣壳+包膜 C. 核心+衣壳 D. 核算+蛋白质 9、不能决定抗原特异性的是( ) A. 表位性质 B. 表位数目 C. 表位空间结构 D. 表位位置 10、T细胞的抗原识别受体是( ) A. BCR B. CDR C. TCR D. FCR
单选:AABAC
ACCDC .半抗原(B
A.既有免疫原性,又有抗原性
B.只有抗原性,没有免疫原性
C.只有免疫原性,没有抗原性
D.既没有免疫原性,也没有抗原性 2.病毒的结构蛋白为(
D.核衣壳 3.细菌培养几个时期中工业制备最适宜的时期是(A) A.稳定期
B.迟缓期 C.对数生长期 D.衰亡期 4.下列物质谁的免疫原性最强(C) A.核酸
D.多糖 5.病毒繁殖的第一步是(B) A.生物合成 B.吸附 C.穿入 D.脱壳 6.下列哪项不属于单核/巨噬细胞的生物学作用(D) A.吞噬
B.免疫调节 C.抗原提呈 D.释放抗体 7. 细菌的致病性强弱主要取决于细菌的:C A.形态 B.基本结构和特殊结构
C.侵袭力和毒素D.侵入机体的部位 8.哪项不是HLA分子的免疫生物学作用(A) A.参与体液免疫
B.诱导T细胞分化成熟 C.约束免疫细胞间相互作用 D.参与调控NK细胞 9.IgM的在免疫中起到作用是(C) A.主力作用
B.参与I型超敏反应 C.先锋作用
D.粘膜局部的免疫作用 10.哪项不属于原核细胞型微生物(D) A.细菌 B.支原体 C.螺旋体 D.病毒 11.革兰阳性菌厚度为(B) A.5-10
B.20-80 C.100-200 D.500-1000 12.革兰阴性菌类脂质的含量(C) A.无 B.较少 C.较高 D.一般 13.INF抗病毒活性的特点不包括(D) A.广谱性 B.间接性 C.种属特异性 D.特异性 14.哪项不是正常微生物生理作用的主要表现(B) A.生物拮抗 B.寄生作用 C.免疫作用 D.营养作用 15.初次应答Ig类别主要为(D) A.IgA
B.IgG C.IgE D.IgM 16.再次应答的特异性(B) A.低 B高 C.无 D.一般 17.初次应答所需抗原量(A) A.高 B. 低 C.较少 D.一般 18.哪项不属于固有淋巴细胞(D) A.NK细胞 B.NKT细胞 C.B1细胞 D.树突状细胞 19.哪项不是细胞因子的作用特点(A) A.特异性 B高效性 C.网络性 D.拮抗性和协同性 20.APC指的是(B) A.抗原 B.抗原提呈细胞 C.抗体 D.免疫球蛋白 1、 与TC细胞表面CD8分子结合的部位是(A ) A. B. MHC-Ⅰ类分子重链3功能区 MHC-Ⅱ类分子0191功能区 C. MHC-n类分子e2p2功能区 D. MHC-Ⅰ类分子重链ala2功能区 2、 正常人体无菌的部位是(C) A. 外耳道 B.小肠
D.尿道口 3、 下列细菌中,繁殖速度最慢的细菌是(D) A. 链球菌
B.大肠杆菌
C.葡萄球菌
D.结合杆菌 4、 下列哪种补体成分是CL酯酶作用的底物(A) A. C4 C2
D.P、B因子 5、 下列哪个部位的浆细胞不能一般情况下不能产生IgE(A) A. 脾
D.胃肠道粘膜 6、 对机体非特异性免疫的描述错误的是(D) A. B. 生来在种系发育和进化过程中形成 对某种细菌感染针对性强 C. 与机体的组织结构和生理功能密切相关 D. 对侵入的病原菌最先发挥作用 7、 B细胞表面标志不包括(D) A.EB病毒受体
B.MHC-n类分子 C.MHC-Ⅰ类分子
D.CD3分子 8、免疫球蛋白分子对胃蛋白酶敏感的有关部位是(D) A.VH,VL
D.绞链区 9、最易形成潜伏感染的病原体是(D) A.HIV
D.EBV 10、人类B细胞分化成熟的场所是(A) 三亿文库包含各类专业文献、应用写作文书、外语学习资料、生活休闲娱乐、高等教育、专业论文、文学作品欣赏、行业资料、73微免复习题等内容。 
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摘要:慢性支气管炎为临床上较为常见的疾病,在非特异性呼吸系统疾病中发病率较高,其主要临床表现为喘息、咳嗽及咳痰等,该疾病具有反复发作、发病率高等特点,临床上常出现并发阻塞性肺气肿症状,甚至为肺源性心脏病、肺动脉高压,对患者的生活质量及身体健康均造成严重的影响。慢性阻塞性肺疾病主要包括小气道阻塞性疾病、肺气肿及慢性支气管炎,目前临床上对于该疾病的防治措施正在不断研究。目前临床上对于该疾病的治疗常采取常规治疗,但治疗效果往往不佳,有研究认为,对慢性支气管炎患者采取调节免疫功能紊乱的药物进行治疗,能够有效改善其临床症状,具有显著的临床效果。
关键词:慢性支气管炎;免疫病理;进展
&&&&&&& 临床相关资料显示,在呼吸系统疾中,主要特征为气道高分泌、气道阻塞及气道炎症,其中慢性支气管炎的发病率最高,我国大概有1300w人发生慢性支气管炎。有研究显示,慢性支气管炎的发病率占我国3.82%,且随着我国人口不断老龄化,该疾病的发病率呈逐渐上升趋势,>50岁的患者慢性支气管炎的发病率为15%[1]。临床上对于慢性支气管炎的发病机制尚无明确机制,目前认为与吸烟、过敏因素、大气污染、病原体感染有关,而发病后的免疫功能对慢性支气管炎的发生与发展具有重要联系。本文对慢性支气管炎免疫病理机制研究进展进行分析探究,具体见下文。
&&&&&&& 1.细胞机制
&&&&&&& 1.1中性粒细胞、巨噬细胞、肺泡巨噬细胞
&&&&&&& 在慢性炎症中,对其能够起到修复作用的细胞为中性粒细胞、巨噬细胞及肺泡巨噬细胞,其中气道巨噬细胞对哮喘及慢性支气管炎等呼吸道疾病中的作用已得到证实。而肺泡巨噬细胞则是通过将细胞外基质组分及生长因子进行释放,从而对肺组织的修复与损伤情况进行调节[2]。慢性支气管炎症是以肺泡巨噬细胞及中性粒细胞浸润为主,在气道局部炎症反应中肺泡巨噬细胞为始动细胞,为人体气道内细胞因子的重要来源。导致肺实质及周围气道内诱发炎症反应的主要原因为吸烟及吸入刺激物所致,使巨噬细胞被激活,在巨噬细胞、CD8+T淋巴细胞及上皮细胞中,能够使多种炎性介质被激活(其中包括中性粒细胞),巨噬细胞还可通过生成蛋白分解酶,对慢性支气管的发生于发展过程起到参与的作用。
&&&&&&& 中性粒细胞为慢性支气管炎发病机制的重要因素,当患者患病后,气道内中性粒细胞明显出现上升现象,而上升的中性粒细胞则可对氧自由基、细胞因子、NO、蛋白水解酶进行释放,从而使支气管肺组织受到损伤,促使感染、黏液潴留及细菌繁殖的发生[3]。发病时不仅出现中性粒细胞增多的现象,还可导致呼吸爆发,从而使反应性氧自由基得到释放,最终导致黏附分子的表达。目前有研究认为,中性粒细胞上升的主要原因为:①选择性对静脉内皮细胞与中性粒细胞发生接触,易导致静脉内皮细胞在中性粒细胞中出现粘附分子表达增多的现象,最终在静脉内皮细胞中出现中性粒细胞粘附现象。②附壁游出并将多种蛋白酶进行释放,其中包括组织蛋白酶、中性粒细胞弹性蛋白酶等,从而对气道产生刺激而导致黏液分泌增多,最终形成长期咳嗽咳痰的临床症状。
&&&&&&& 1.2细胞毒性T细胞
&&&&&&& CD8+T淋巴细胞为人体免疫应答中的主要效应细胞,能够对靶细胞起到特异性杀伤的效果,该细胞在进行细胞毒作用介导时主要作用为抗肿瘤及抗感染。当人体遭到多种病原体微生物侵害时(肺炎衣原体、细菌),所产生的抗原多肽可与MHC-I类分子进行结合,从而形成抗原复合物,对抗原提呈细胞表面具有表达作用,易对CTL所识别并杀伤[4]。现有研究认为,CD8+T淋巴细胞可通过以下机制发挥作用:①颗粒酶途径(穿孔素),CD8+T淋巴细胞在对穿孔素进行释放时,与酶的聚合下,靶细胞产生多聚穿孔素通道,使毒性物质的颗粒及含降解酶的颗粒进行释放,后进入靶细胞内,最终导致靶细胞受到损伤。②FASL、FAS途径:FASL为Ⅱ型膜蛋白,属于TNF家族;FAS为Ⅰ型膜蛋白,属于TNF受体家族,两者相结合,可导致靶细胞的死亡。慢性支气管炎患者在急性发作时,CTL会出现逐渐减少的现象,但却增加了抑制性T细胞,从而改变CD8+T、CD4+T的比值,最终导致人体免疫功能出现紊乱现象。因此,在对慢性支气管炎患者进行治疗的同时应对其采取提高免疫力的药物进行治疗,对提高机体免疫力具有重要作用,提高临床治愈率。
&&&&&&& 2.细胞因子
&&&&&&& 细胞因子是人体中的网络,对靶细胞的分化、增强均有促进作用,还能使机体抵抗力增加,对免疫反应及调节机体均具有参与作用。近年来,细胞因子在临床上的研究越来越广泛。
&&&&&&& 2.1肿瘤坏死因子
&&&&&&& 肿瘤坏死因子是由NK细胞、单核细胞所分泌的细胞反应因子,一般情况下肿瘤坏死因子在人体中活性较低,但由于患者发生病理改变则可导致其出现升高的现象,如急性感染性疾病、机体组织受损等,能够对机体的损伤起到介导作用。有研究证明,支气管肺泡、慢性支气管血浆及肺组织在灌洗液中肿瘤坏死因子出现明显升高的现象,由此提示,肿瘤坏死因子的升高与病情相关[5]。以上资料表示,肿瘤坏死因子对慢性支气管炎的发病具有重要作用,该细胞对人体内网络平衡起到了破坏作用,从而导致机体内免疫功能出现紊乱的现象,其原因包括以下几个方面:①肿瘤坏死因子为机体内细胞死亡的主要原因,主要是在转录终止水平下导致人体细胞发生死亡所致。②肿瘤坏死因子可导致人体血管内皮细胞重新表达粘附分子,使白细胞与内皮细胞粘附,最开始为中性粒细胞-单核细胞-淋巴细胞。肿瘤坏死因子也可作用于中性粒细胞中,从而使其对内皮细胞的粘附增加,以上作用均可导致内皮细胞、白细胞及炎症局部聚集受到损伤。③肿瘤坏死因子对肺泡巨噬细胞分泌细胞因子具有刺激作用。
④肿瘤坏死因子对中性粒细胞具有活化作用,使其能够脱颗粒,对氧自由基、蛋白酶等进行释放,最终形成支气管炎。⑤肿瘤坏死因子使MHC-Ⅰ类分子表达进行扩大,从而导致NK细胞与CTL细胞对病原体感染的攻击性增强。
&&&&&&& 2.2白细胞介素-8
&&&&&&& 白细胞介素-8为临床上一种较为重要的炎症介质,该介素的类别属于趋化性细胞因子超家族的a亚群。而白细胞介素内的两种受体形式已被文献所证实。在中性粒细胞中,高亲和力型受体高达200个,且越成熟可表达更多。临床大量实验证明,慢性支气管炎患者痰中及肺泡灌洗液中中性粒细胞出现显著升高的现象。而导致中性粒细胞升高的主要趋化因子包括LTB4、IL-8、C3a,且三种趋化因子可具有一定协同作用,但近期研究表明,白细胞介素-8为慢性支气管炎的主要趋化因子。白细胞介素-8为中性粒细胞游走、聚集至炎症部位的关键因子,其主要是由于中性粒细胞、上皮细胞分泌及巨噬细胞所产生,而当人体支气管内吸入大量细菌产物或刺激物时,都可导致肺泡巨噬细胞及支气管上皮细胞分裂大量的白细胞介素-8,而白细胞介素-8具有使血管通透性增加的作用,从而改变内皮细胞及中性粒细胞的黏附,从而将其他趋化因子将中性粒细胞及其他炎症细胞进行吸引,从而使其聚集至气道内,从而在气道内释放各种炎性介质及活性酶,对气道炎症的发生及发展起到了介导作用。有相关文献报道,当白细胞介素-8达到10nmol以上时,可导致MPO水平出现明显上升的现象,且由于人体气道内存在较多中性粒细胞募集,而中性粒细胞又可导致白细胞介素-8的水平提高,从而对患者支气管局部纤毛摆动频率及上皮损伤频率下降,为一种恶性循环的过程,从而导致患者痰液分泌增加、粘液腺增殖,对人体内一些重要自身防御反应具有有效的抑制作用,从而导致慢性支气管炎的病程延长。G
&&&&&&& 2.3白细胞介素-4与白细胞介素-6
&&&&&&& 白细胞介素-4在临床上有关该细胞与哮喘发病的作用已得到一致的认可,但关于该介素与慢性支气管炎的报道甚少[6]。除了对变应性炎症时对炎症细胞进行调节与激活外,白细胞介素-4与COPO及慢性支气管炎大的发生具有密切联系。有相关文献报道,伴有慢性支气管炎患者且吸烟气道内上皮大量炎症细胞浸润,且白细胞介素-4呈逐渐上升现象,表达较为强烈。而白细胞介素-4的升高对黏液腺糖蛋白合成增加具有诱导作用,且由于白细胞介素-4的升高从而导致痰液在无纤毛的支气管上细胞出现聚集现象,且还会增加人体中杯状细胞的增殖并出现痰液分泌现象,从而导致气管黏膜下腺体出现形态学改善,且分泌状态较高。白细胞介素-4在慢性支气管炎中的作用机制:①该细胞能够对血管上皮细胞表面粘附分子起到直接刺激的作用,且还可导致气道内支气管上皮细胞表面粘附分子的表达增加。②可对嗜酸性粒细胞至血管进行游走到患者气道壁上皮细胞及气管腔,具有选择性促进作用。③对肥大细胞及T、B淋巴细胞及浆细胞均具有刺激作用,能够将单核吞噬细胞表面的lgE受体、肥大细胞及B淋巴细胞进行分化并上调。④能够有利于促进Tho细胞分化为Th2细胞,从而导致白细胞介素-9、白细胞介素-13、白细胞介素-4、白细胞介素-5的分泌出现增多的现象,其中白细胞介素-13还可导致黏液细胞形态学发生明显改变。
&&&&&&& 3.细胞黏附分子
&&&&&&& 细胞黏附分子主要是通过与受体及配体相结合的方式发挥作用,从而使细胞与细胞及基质间发生粘附,从而对细胞的活化、信号传导及识别等过程进行参与[7-8]。但由于细胞的结果特征不一,粘附分子可分为蛋白家族、选择素家族、免疫球蛋白超家族、整合素家属,以上类别均可在气道重塑、上皮损伤与修复及炎症发生起到重要作用。
&&&&&&& 4.核因子
&&&&&&& 慢性支气管炎的发病机制与细菌内毒素LPS具有重要关联。核因子为多效性的核转录因子,是蛋白家族中的成员,在非活性状态下能与前体蛋白聚合的二聚体形成存在于人体细胞内,核因子活化的刺激信号为病毒、氧化剂、细胞因子、异种抗原等,以上信号均可经过不同的信号进行转导途径,使核因子能够诱导激酶[9-10]。核因子经活化后,可对一系列基因的表达起到调控作用,如IL-6、E-选择素、ICAMI-1、化学趋化因子及受体分子等,而以上物质均能对微血管内皮细胞起到间接或直接的介导作用,从而出现内皮组织损伤及微循环障碍[11-12]。
综上所述,慢性支气管炎的发病机制不仅为病原体感染所致,还与机体免疫功能紊乱及多种机制相关。目前临床上对于慢性支气管炎的治疗常采取镇咳、抗炎、平喘等,但治疗效果往往不佳。慢性支气管炎的临床症状为咳痰、咳嗽伴有喘息现象,若不及时采取有效的治疗方案,对患者身心健康及生活质量均造成严重的影响。临床上对于调节机体免疫功能紊乱的药物尚无明确机制,但由于机体与免疫调节药物易产生较多不良反应,因此,开发低毒副作用的免疫调节药物为临床上讨论较多的话题,并采取一套合理的治疗方案,能够对机体免疫功能紊乱的症状进行调节,仍为我国临床上较多学者广泛讨论的话题。
参考文献:
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抗体(免疫细胞分泌免疫物质)
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抗体(英语:antibody),(不仅仅只是抗体)是一种由分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其的细胞膜表面
。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为。
抗体是具有4条 的对称结构,其中2条较长、 较大的相同的重链(H链);2条较短、相对分子量较小的相同的(L链)。链间由 和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种,重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中,不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的 氨基酸序列。可变区位于&Y&的两臂末端。在可变区内有一小部分 变化特别强烈,这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异区域称 。高变区位于分子表面,最多由17个氨基酸残基构成,少则只有2 ~ 3个。高变区氨基酸序列决定了该抗体结合抗原 抗原的特异性。一个抗体分子上的两个 抗原结合部位是相同的,位于两臂末端称 抗原结合片段(antigen-binding fragment, Fab)。&Y&的柄部称结晶片段(crystalline fragment,FC),糖结合在FC 上。
右图是抗体的结构示意图:下图是其立体模型:
在使用前应加以鉴定。鉴定指医
学标记包括及 与蛋白质的结合比率。可以用琼脂双扩散法进行 滴定,效价大于1:16者较为理想。荧光素与蛋白质结合比率(F/P)的测定和计算的基本方法是:将制备的荧光抗体稀释至A,分别测读A280 (蛋白质特异吸收峰)和标记荧光素的特异吸收峰,按公式计算。
F/P值越高,说明抗体分子上结合的荧光素越多,反之则越少。一般用于固定标本的荧光抗体以F/P=1.5为宜,用于染色的以F/P=2.4为宜。
抗体的确定方法类似间接法中酶标抗体的滴定。将荧光抗体自1:4~1:256倍比稀释,对切片标本作荧光抗体染色。以能清晰显示特异荧光、且非特异染色弱的最高稀释度为荧光抗体工作浓度。
荧光抗体的保存应注意防止抗体失活和防止。最好小量分装,-20℃冻存,这样就可放置3~4年。在4℃中一般也可存放1~2年。
按作用对象
按作用对象,可将其分为 、抗菌抗体、 抗病毒抗体和亲细胞抗体(能与细胞结合的,如1型 中的lgE,能吸附在靶细胞膜上)
动物抗体功能
根据注入细菌或病毒的不同,以及注射到不同种类的动物体内,得到不同免疫性能的抗体。根据河南顺鑫动物血液制品有限公司的市场调研,市场上动物血清抗体大致分为以下几类抗体:
1、猪抗体:抗体,猪蓝耳抗体,抗体,猪伪狂犬抗体,猪抗体,抗体,抗体等。
2、禽抗体:抗体,鸭肝抗体抗体,鸭炎抗体,抗体,抗体等
3、牛抗体:牛口蹄疫抗体,抗体,抗体,抗体,抗体等
4、羊抗体:抗体,抗体,抗体,抗体,抗体,羊猝疽抗体,抗体等
5、犬抗体:犬狂犬病抗体、抗体、抗体、犬与抗体,狐貉水貂的伪狂犬抗体、细小病毒抗体、抗体等
按理化性质
按理化性质和生物学功能,可将其分为、、、、IgD五类。
IgM抗体是免疫应答中首先分泌的抗体。它们在与结合后启动的。它们还把入侵者相互连接起来,聚成一堆便于 的吞噬;
IgG抗体激活补体,中和多种毒素。IgG持续的时间长,是唯一能在母亲妊娠期穿过胎盘保护胎儿的抗体。他们还从 乳腺分泌进入 初乳,使新生儿得到保护;
IgA抗体进入身体的黏膜表面,包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜,中和感染因子。还可以通过 母乳的初乳把这种抗体输送到新生儿的消化道黏膜中,是在母乳中含量最多,最为重要的一类抗体;
的尾部与、 的细胞膜结合。当抗体与抗原结合后,嗜碱细胞与肥大细胞释放 一类物质促进炎症的发展。这也是引发 的抗体;
IgD抗体的作用还不太清楚。它们主要出现在成熟的 表面上,可能与的分化有关。(IgD于1995年从人骨髓瘤蛋白中发现, 分子量为175kD,主要由 扁桃体、脾等处 产生,人中IgD浓度为3~40μg/ml,不到血清总Ig的1%,在个体发育中合成较晚。IgD 很长,且对蛋白酶水解敏感,因此IgD半衰期很短,仅2.8天。血清中IgD确切的免疫功能尚不清楚。在B细胞分化到 成熟B细胞阶段,除了表达SmIgD,抗原刺激后表现为 。成熟B细胞活化后或者活化后或者变成记忆B细胞时,SmIgD逐渐消失。)
按可见反应
按与抗原结合后是否出现可见反应,可将其分为:在介质参与下出现可见结合反应的完全抗体,即通常所说的抗体,以及不出现可见反应,但能阻抑抗原与其相应的完全抗体结合的不完全抗体。
按抗体来源
按抗体的来源,可将其分为 和 。
抗体就是,是改变了的分子。由 抗原刺激产生,抗体的产生是由于抗原侵入人体后引起各种相互作用,使中的B细胞分化增殖而形成浆细胞,浆细胞可产生。
按抗体发展
的发展经历了四个阶段,分别为:鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和。
鼠源性单克隆抗体:鼠单克隆抗体主要是将来源于免疫接种过的小鼠的B 细胞与骨髓瘤细胞融合,继而筛选出既能无限增殖又能分泌抗体的鼠杂交融合细胞,进而进行筛选、抗体制备和抗体纯化。
嵌合性单克隆抗体:指用人的恒定区取代小鼠的恒定区,保留鼠的可变区序列,形成一个人-鼠杂合的抗体。其研制程序快,可大幅度降低异源抗体的,却几乎保持亲本鼠单抗全部的特异性和亲和力。另外,它还具有人抗体的效应功能,如固定、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用()等。
人源化单克隆抗体:利用现有的无数已详细分析过的小鼠抗体,取其与直接接触的那段抗体片段(,CDR)与人的抗体框架嫁接,经亲和力重塑,可维持其特异性和大部分的亲和力,同时几乎去除免疫原性和毒副作用。
全人源单克隆抗体:其抗体的可变区和恒定区都是人源的,去除免疫原性和毒副作用。全人源抗体制备的相关技术主要有:人杂交瘤技术、 转化 B 淋巴细胞技术、显示技术(phage display)、抗体制备技术(transgenic mouse)和单个B细胞抗体制备技术等。
由人源化和全人源抗体制备的人源化和全人源因其具有高亲和力、高特异性、毒副作用小的特点,克服了动物源抗体及嵌合抗体的各种缺点,已经成为了治疗性抗体药物发展的必然趋势。
多克隆抗体
采集与检测
多抗纯化与保存
单克隆抗体
B 在的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌抗体的能力。的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤形成,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤细胞的无限分裂的能力,又具有产生特异性抗体的的能力。将这种克隆化的 杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠腹水内即可获得大量的高效、单一的特异性抗体。这种技术即称为。
1)免疫的制备 制备的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。
2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活)。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于。
3)细胞融合的关键:
1技术上的误差常常导致融合的失败。例如,供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。
2融合试验最大的失败原因是污染,融合成功的关键是提供一个干净的环境,以及适宜的无菌操作技术。
4) 阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10天作第一次检测,过早容易出现。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质,以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有 RIA法、 和免疫荧光法等。其中ELISA法最简便,RIA法最准确。阳性克隆的筛选应进行多次,均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。
5)克隆化 克隆化的目的是为了获得单一的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的,有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的 杂交瘤细胞株。
交杂瘤细胞的克隆化
腹水制备与纯化
关于抗体制备的详细内容参见“中国免疫学实验网”。
(1) 特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的 ,通常需要 或等共同发挥效应以清除 或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)激活补体:、1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的、IgG4和可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫,可结合不同种的细胞,参与 免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜: (IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成 自然被动免疫。 (IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部 的主要因素。
(5)具有 :抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的 抵抗力与一般 球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用 或 从 免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经 将其 纯化。
(7)通过与细胞 Fc受体结合发挥多种生物效应
① 调理作用
IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合,增强其吞噬能力,通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization)。
②发挥抗体依赖的细胞的细胞毒作用
抗体的L链是由C、V、J三个编码的,H链由C、V、D、J四个基因簇编码的。V是编码可变区,有300个种类;D编码,有15 ~ 20个种类;J编码连接V、C的结合区,有4~5个种类;C编码恒定区,仅有一种。这些通过多种多样的重排,所合成出的 ,还要再进一步进行L和H链组合,这样最后生成的抗体种类就非常多了。抗体 基因重排是发生在 淋巴细胞分化的时候。
(monoclonal antibody,) :在与接触前就已经存在多种多样的与抗原结合的受体,一种细胞带一种受体,进入机体的抗原选择性的结合其中的个别淋巴细胞,使之活化,增殖产生大量带有同样受体的 ,分泌同样的抗体。当抗原进入体内,在机体中就会诱导出针对不同的多种抗体,如果要把这些抗体一一分开,用现有的生物化学或物理化学方法是根本办不到的。1975年 科勒(Kohler)和 (Milstein)将小鼠 与融合,培养出既能迅速生长无限繁殖又可分泌抗体的 。从而获得针对某一特殊抗原决定簇的 。1995年,Katherine Knight博士在 美国芝加哥Loyola大学成功地从转基因兔中获得了 骨髓瘤细胞(Plasmacytoma),开创了兔 。与鼠相比,兔单抗具有:首先,兔抗血清通常含有高亲和力抗体,可以比鼠抗血清识别更多种类的 表位;其次, 兔单克隆抗体能够识别许多在小鼠中不产生免疫的抗原;第三,由于兔 脾脏较大,可以更多进行的融合试验,使得融合成为可能。
抗体的。抗体的组成极为复杂,是由成千上万、多种多样的(Ig)分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上,既相似,又有差别。由于有差别,它们的电泳活性就有很大的变化。
因为抗体具有与 抗原决定簇相对应的结合部位(抗原结合簇),所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面,抗体本身是一种蛋白质,具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构,对异种动物来说,它又是抗原。各类Ig都具有可用方法检出的 抗原特异性,它们表现出不同的血清学类型。Ig 抗原的特异性有3种:①特异性:同一种属所有个体共同具有的抗原特异性。人的Ig可分为5大类(、、、IgD、)、两个型(λ型和κ型)、以及若干亚类、亚型、群和等。但是,抗体和抗原结合的特异性与抗体的类、亚类、型别等无关;②特异性:同一种属(如人)的某些个体共有的抗原决定簇。这是由遗传基因决定的,某些重链和(κ)的恒定区内,有个别氨基酸发生置换而形成Gm、Am、Km各型;③ 特异性:由单一 克隆产生的Ig分子独有的。此决定簇在 重链和轻链的可变区,特别是在可变区的 超变区中。由于每一个体 抗体形成细胞是由多克隆组成,所以独特型特异性为数极多。
任何一个正常人中的抗体都是含有成千上万的、多种多样的、具有各种 独特型抗原性的免疫球蛋白分子混合物。 链和 λ链可以和各类、各亚类配合。重链、轻链本身又有各种异型,每一克隆产生的Ig又具有自身的独特型。
受 B细胞系统的遗传 基因控制。肽链是由两个不同基因分别编码可变区或恒定区,恒定区的基因(C基因)是有限的,它虽然可以决定Ig分子的类别和亚类,为造成Ig分子多样性的原因之一,但是,造成免疫球蛋白分子多样性的主要原因却在于可变区的异质性,可变区是由V基因编码的,而V基因的数目仍不清楚。
对 抗体多样性的遗传控制曾提出3种学说:①种系学说(又称胚系学说):抗体形成细胞具有编码Ig分子的全部基因(即有限数量的C基因和未知数量的V基因,它是通过长期进化形成并通过从亲代传给子代。又称胚系学说;② 学说:在生殖细胞内只继承了数量有限的V基因,Ig分子多样性的形成,是由于在发育过程中发生突变或,从而产生许多不同的 V基因。体细胞突变可能对Ig分子的多样性发生重要作用;③V区 学说:Ig分子可变区是由 V基因片段、 J基因片段和 D基因片段组成,V、D、J基因相互连接对Ig分子多样性的产生,是极为重要的。Ig的多样性不可能简单地归因于上述的某一学说,它可能与上述多种机制有关,也可能还与 基因片段连接点上的 连接多样性以及VL和VH链的不同配对有关。
抗体的主要功能是与抗原(包括外来的和自身的)相结合,从而有效地清除侵入机体内的微生物、 寄生虫等异物,抗体(antibody)是一种应答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。每种抗体与特定的 结合。这种结合可以使抗原失活,也可能无效但有时也会对机体造成病理性损害,如、 、等一些 的产生,对人体可造成危害。
(1)初次反应产生抗体:当第一次进入机体时,需经一定的 才能产生抗体,且抗体产生的量也不多,在体内维持的时间也较短。
(2)再次反应产生抗体:当相同抗原第二次进入机体后,开始时,由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合,可使原有抗体量略为降低。随后, 迅速大量增加,可比初次反应产生的多几倍到几十倍,在体内留存的时间亦较长。
(3)回忆反应产生抗体:由抗原刺激机体产生的抗体,经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原,可使已消失的抗体快速上升。如再次刺激机体的抗原与初次相同,则称为回忆反应;若与初次反应不同,则称为非特异性回忆反应。非特异性回忆反应引起的抗体的上升是暂时性的,短时间内即很快下降。
特色,如:类花生酸类物质、游离的 、环、激素及等。另外,Cayman提供多种高质量试剂,包括:类花生酸类物质、氧化氮试剂及许多相关脂质、脂肪酸、酶和抗体。
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Dynal Biotech ASA
成立于1986年,是一家在德国、法国、英国、美国、中国及澳大利亚均设有分公司的跨国公司,总部位于 挪威奥斯陆。总公司一直致力于磁性分离技术和相关产品的研究、生产和销售。经过多年发展,其产品线已覆盖了免疫学、分子生物学、微生物学、HLA等生命科学领域。1996年,Dynal Biotech ASA 通过了ISO9001 ;2002年,两个系列产品取得CE认证;2003年,再次通过 ISO以及质量体系认证。2004年3月,其产品通过了 。
2005年2月,Invitrogen公司成功收购Dynal Biotech公司。
位于美国的 ,成立于1981年,致力于诊断产品的研发和生产,是世界上激素检测领域的领先者。DSL公司本着顾客至上的原则,能更迅速的适应变化,提供给客户最好的产品和服务。
公司平均每年推出20-30种新产品,可以提供给客户最新的产品和服务:
· 分析和内分泌检测试剂
·传染病诊断
·研究用试剂
·CLIA认证的实验室
·抗体开发, 的研发
应用科学部致力于生命科学领域产品的开发,向用户提供优质的科研产品。在1998年收购德国宝灵曼(Boehringer Mannheim)公司后,产品涵盖了分子生物学,细胞学,免疫学,,生物化学等多个研究领域,罗氏拥有以及标记产品的全球专利,其DIG标记产品和相关产品在业内享有极高的声誉。五十年来,罗氏应用科学部专注于生命科研领域产品的开发和推广,如今已经有超过2000种的科研产品在市场上销售,覆盖了领域的各个方面,为科研工作者提供完整的解决方案。
BioLegend公司
位于美国加州,致力于为生物医药研究的各个前沿领域提供高质量的抗体及其它相关试剂。BioLegend聚集了一批来自PharMingen公司的专业人士,建立了一支具有雄厚技术背景的专业队伍,其中该公司的CEO更是为PharMingen公司的创始人之一。通过其自身的先天优势,以及与世界知名实验室和研究所的良好合作关系,其目标是以最合理的价格为广大客户提供高质量的免疫学和细胞生物学产品。BioLegend公司以其专业技术力量为保证,提供各种质量卓越的产品,并不断地开发新产品,以满足飞速发展的生命科学研究的需要。
eBioscience公司
来自美国 圣地亚哥,以其高品质的产品,良好的服务及实惠的价格赢得了多家世界顶尖实验室和科研机构的青睐。该公司一直致力于炎症方面的的研究,在方面有着很高的长久。
SBA(Southern Biotechnology Associates, Inc.)
公司建于1982年,由美国 伯明翰的(UAB)的Dr. Max Cooper 细胞免疫学实验室的科学家创建。SBA致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。同时,SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体,其中包括: 和酶标记物,低 /不含(LE/AF)制剂,F(ab)和F(ab&)2,此外还有纯化的免疫球蛋白和胶原质。
NeoMarkers (Lab Vision & NEOMARKERS) 公司
在 产品领域上处于世界领先水平。Lab Vision & NEOMARKERS从研究与临床需要出发,设计开发产品,真正满足实际要求,产品已被生命科学研究群体所广泛认同;有完善的专业文献资料积累,所有产品都提供详细的技术资料与重要的相关文献;产品提供多种规格,单抗有0.1ml和1.0ml与即用型(7ml)以及纯化的抗体(试用型20ug,100ug与200ug),可以适应各种不同要求,此外还可根据实验要求选择特定的产品形式或规格。
BioVision. Inc
位于美国加州的Palo Alto,是世界上首屈一指专著于凋亡和 细胞信号研究的公司。其产品质优、价廉、包装使用方便。BioVision致力于为研究者们提供最好、最新的研究工具而不断扩大产品及服务质量。该公司提供用于检测早、中、晚期凋亡的试剂,可以检测凋亡发生的不同区域,包括: 线粒体、胞浆、胞膜及胞核。
KPL公司是美国最早实现 亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上最大的二抗和底物显色系统的生产商。其可以提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和 ,其产品有:亲和纯化的抗体和物、和杂交底物、蛋白检测和纯化试剂盒、核酸标记和检测试剂以及其它辅助试剂等。
是 瑞典的一家生物公司,成立于1986年;他们生产高质量的单克隆抗体,一直致力于配套抗体的研究,其ELISpot技术处于世界领先水平.
MABTech公司生产的ELISPOT细胞因子检测试剂盒涉及多个种属:
Human: -gamma、CEF Peptide pool、Inteferon-ha、IL-2、、IL-5、IL-6、、IL-12(tot IL-12)、IL-12(IL-12 p70)、IL-13、、-alpha、Perforin、Granzyme B
M: IFN-gamma、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-12(tot IL-12)、IL-13、GM-CSF
Mouse: IFN-gamma、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-12(tot IL-12)、IL-12(IL-12 p70)
Bovine: IFN-gamma
MABTech公司提供四种类型的ELISPot试剂盒和相关配套试剂:
1、 ELISpot PRO kit:包括包被有捕获抗体的、ALP标记的、BCIP/NBT底物。
2、 ELISpot PLUS kit:包括PVDF板(白色)、捕获抗体、生物素化检测抗体、ALP标记链亲和素、BCIP/NBT底物。
3、 ELISpot kit:包括包被抗体、生物素化检测抗体、酶(ALP或)标链亲和素。
4、 抗各种细胞因子的抗体

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