biotopped rnase aa溶液中有沉淀能用吗

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[精品]盐酸胍对反胶束中RNase_A活性的影响
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[精品]盐酸胍对反胶束中RNase_A活性的影响
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RNase A 核糖核酸酶A Ribonuclease I
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RNase A,bovine pancreas
核糖核酸酶A
High Purity Grade
产品编号规 格价 格
Rmg 180.00
Rmg 100.00
说明：生化研究；测定核酸的结构；核糖核酸(RNA)序列分析；水解蛋白样品中的RNA；纯化DNA。
别名：Pancreatic Ribonuclease；Ribonuclease I ；
Ribonucleate-3&-pyrimidinooligonucleotidohydrolase
分子量：13.7kD
核糖核酸酶A外观：类白色结晶或冻干粉
特性：类型：Type I-A 活性：&50ku/mg 蛋白
鉴定：&60% 　 RNase A basis (SDS-PAGE)
S：22-24/25
核糖核酸酶A制备不含DNase的RNase：将RNase A溶解在0.01M的醋酸钠(pH5.2)中，使终浓度为10mg/ml，加热到100℃，15min，在室温下缓慢冷却。用0.1体积的1M的Tris-cl调整pH至7.4后，分装小管保存在-20℃备用，当浓缩的溶液在中性pH条件下加热到100℃时，核糖核酸酶产生沉淀。
核糖核酸酶A储存条件：-20℃
R8020 from Sigma R4875; R8021 为国产。
科学研究专用生物化学试剂，大量现货批发，当天发货，欢迎咨询~
以上信息RNase A 核糖核酸酶A Ribonuclease I为北京索莱宝科技有限公司相关负责发布，如需了解RNase A 核糖核酸酶A Ribonuclease I价格、型号、图片、售后等信息请联系厂家；天成医疗网存在海量产品，如您发现产品内有任何违法/侵权信息，请立即向天成医疗网举报并提供有效线索。
聚精会神、勤奋创新，全力打造生命科学的民族品牌！&&快速成长的Solarbio二十世纪九十年代，生命科学相关产业在欧美发达国家已呈蓬勃发展之势，我国生命科学产业却刚刚起步。面临艰难的国际环境，应对激烈的行业竞争，肩负着振兴民族生命科学事业的神圣使命，几位对生命科学研究产业化充满兴趣的年轻人组建了&索莱宝生物（北京）科技有限公司&。在这短短的十几年里，北京索莱宝生物科技有限公司经历了艰难的生存期、快速成长期，到现在已进入稳步发展期。Solarbio作为华人的生命科学民族品牌，已深深的印在每位从事生命科学研究的炎黄子孙心上。回顾这充满坎坷的成长历程，我们以年轻人的豪气挑战所谓的世界行业寡头，我们不胆怯，因为我们坚持走自主研发产品、树立民族品牌的路线，因为我们身后有十三亿炎黄子孙的支撑。在产品研发上，我们革新思路，认真观察、刻苦钻研，找到问题的核心，从而研发出新产品。我们注重产品质量，每一批次都要进行严格的质检，因为我们质检流程严密，很多产品都是供不应求，但我们坚持并改进质检工艺水平，绝不让没经过质检的产品流入市场是Solarbio的第一大天条，不容任何人违反！我们坚信只有创造出具有国际一流品质的产品，才可以跟行业寡头抗衡，才能保护住这硕果仅存的民族品牌！在品牌的塑造上，我们参考国际通行的标准，继承中华民族优秀文化遗产，拟定了Solarbio自己的品牌操作系统。在产品质量已达到国际最高标准的前提下，现在的包装系统已超过现行的国际化水平。Solarbio品牌系统正在申请国际专利。相信在不久的将来，Solarbio的产品指标和品牌系统将成为华人的骄傲，将走出国门成为世界各国参考的新标准！在产品营销的策略上我们把客户的利益和经销商的利益摆在前面，提供高品质的产品,方便客户、满足客户需求、保证完善的售后服务是我们一直在努力做的，我们所追求的不是利润，而是一个中华民族品牌在世界东方的傲然崛起，是每一位炎黄子孙在谈到生命科学时的豪情满怀，因为有了中国人自己的国际化新品牌Solarbio，我国的生命科学产业才能更好的走自主创新的道路！回首坎坷曲折的十几年，我们有&指点江山，激扬文字，粪土当年万户侯&的豪气，展望充满机遇与挑战的新世纪，我们更有&数风流人物,还看今朝&的自信。&
RNase A 核糖核酸酶A Ribonuclease I相关产品信息
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&&DNA中加入RNase A后出现严重降解
DNA中加入RNase A后出现严重降解
前几天有一批DNA样品准备建库测序，质检时发现有RNA污染，建库之前需要处理。咨询了别人，说按照100ulDNA加2ulRNase A，37度水浴半小时即可。然后我就照做了，中午吃饭前放到水浴锅里的，午休结束后去取，水浴时间2个多小时，一测浓度吓死了，本来几十上百ng/ul的样品，现在浓度都只有1不到。以为是我的qubit HS的试剂出问题了，换了台qubit，换了别人的qubit HS的试剂，测了几个样品还是那么低。
喊来了几个实验室的熟手，均说没见过这种情况，按理说Rnase不该对DNA有作用，建议把样品跑个电泳看看，跑完电泳之后发现一点条带都看不到了，看来的确是降解掉了。
& && &从此我们开始了探索原因之路。首先给天根打电话咨询Rnase A里是不是混有Dnase，得到的答复是没有混有Dnase。（使用的Rnase A是tiangen的100mg/ml包装，货号RT405-12。DNA提取用的是tiangen的试剂盒，洗脱液是TE）
1、& & & & 上网查了些资料，有人说Rnase A里混有少量的Dnase，使用之前需要将Rnase A80度水浴10分钟，理由是Rnase A非常稳定，高温高压下不会失活，但是Dnase 在80度水浴10分钟就会不可逆失活。但是我想这么简单的东西，商品化的Rnase A肯定是已经处理过的，而且天根的技术支持跟我说他们的Rnase A是纯的。但是抱着怀疑的态度，我在后续的实验中也考虑到了这个因素。
2、& & & & 咨询了另一个朋友，说处理RNA污染的方法是80ul样品中加0.4ul的Rnase A，37度水浴30分钟。
3、& & & & 网上查到资料TE缓冲液中含有EDTA，是Dnase的抑制剂。按理说微量的Dnase在TE缓冲液中是不会有活性的。
基于对以上三个方面的质疑，我设计了如下实验：
第一组：DNA样品起始浓度4.84ng/ul
1、按2%体积加入我自己的RNase A（tiangen RT405-12） ，37度水浴，1小时浓度1.24，2 小时浓度0.584
2、按2%体积加入朋友那里借的RNase A ，37度水浴，1小时浓度0.76，2小时浓度0.698
3、不加RNase，37度水浴，1小时浓度5.04，2小时浓度5.06
得出结论：不是我买的Rnase A的品牌问题，只要加入Rnase就会降解DNA，不加Rnase 是不会降解的。
第二组实验：
先取部分RNase A 85度水浴11分钟处理
1号样品水浴前浓度5.62，取50ul样本，加1ul处理后的RNase A，37度水浴1小时后测浓度 0.238
2号样品水浴前浓度5.2，取40ul样本，加0.2ul处理后的RNase A，37度水浴1小时后测浓度 1.84
3号样品水浴前浓度4.86，取40ul样本，加0.2ul未处理的RNase A，37度水浴1小时后测浓度 0.302
本想通过这个实验证明DNA降解是因为RNase中混有DNase，但是结果不符合预期。
可能的原因是：
1、RNase中的确含有DNase，但是85度水浴11分钟并不能使DNase灭活，这与百度百科提供的信息不符（80℃、10分钟热处理后不可逆失活）
2、RNase A本身可以降解DNA，这也与百度百科的结果不符（RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶。RNase A 对RNA有水解作用，但对DNA则不起作用。）
3、RNase A中含有某种未知因素对DNA有降解作用
声明几个问题：
1、& & & & 样品提取时用的是天根的组织DNA试剂盒提取的，提取时未用RNA酶处理，洗脱液是TE。
2、& & & & 所有浓度都是用qubit HS测的。
3、& & & & 为什么没有实验水浴37度半小时：因为我觉得37度与室温较接近，只要加了Rnase A会降解DNA，半小时与1小时差别不会很大。另外Rnase A加在DNA样品中，如果你不处理掉降解DNA的因素的话，每次从冰箱里拿出来化冻时的温度也不会和37度差很远，对于保存时间按月按年计算的DNA样品来说，累积的降解效果肯定大于水浴半小时的效果。因此重点是找出Rnase A使DNA降解的因素。
实验结果不符合理论预期啊，到底是什么原因造成DNA降解的呢？各位大神有遇到这种情况吗？
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