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运用现代细胞化学技术对中医“脾气虚”与癌症的研究和应用——浅析中药“四君子汤加味”影响细胞凋亡的因素及癌症治疗
作者：陈志友&&&&作者单位：224624 江苏响水，响水县大有镇志友中医诊所
目的 运用中药“四君子汤”及“四君子汤加味”治疗疾病观察其方药对“脾气虚”症和因“脾气虚”形成癌变的生理病理变化及临床应用。方法 采用现代医疗设备检查生理指标数据对比，结合已知现代细胞化学技术对中医“脾气虚”与癌肿的综合数据分析。结果 中药“四君子汤”治疗“脾气虚”病症和“四君子汤加味”治疗癌症，使患者健康，提高病患的生存质量延长寿命;大大减轻了患者和家庭的经济开支和因病致穷风险。结论 中药“四君子汤”能很快治愈“脾气虚”病症，由此加味对人体因“脾气虚”而致癌，能促使肿瘤周期的抑制和凋亡，为中草药治疗“脾气虚”症和治疗癌症及抗癌药物开发和机理探讨提供了新的思路和靶点。
【关键词】& 细胞化学;中药四君子汤;四君汤加味;脾气虚;癌肿;药物治疗
　细胞死亡发生于两种不同的途径，一种是生理过程凋亡(Apoptosis)，当这些细胞不再为机体所需要即被清除。另一种是病理过程坏死(necrosis)，细胞损伤和病死。谢锦玉、高玉民、刘铭福、李晓光、胡庆和等人发现：&机体内外多种因素可影响细胞凋亡的发生并明显受到分子遗传因素的影响。组成生命的基本结构和功能单位&细胞也必须经过分裂、增殖、分化而后死亡&[1]。现知抗肿瘤药物组方18689组，对细胞凋亡有不同程度的杀伤或作用外，但其效果令人不愉快。近年来，国内外很多学者或专家乃至科学家们用FCM技术观察并分析了许多抗癌中草药对肿瘤周期活动的抑制，为中草药抗癌药物开发和机制探讨做了大量工作。本诊所多年临床研究和理论探讨，疾病转变癌经3～5年，使一般的疾病在变癌发生过程中存在凋亡，凋亡有两种情况，一是用药不对症(证)和西药的大量运用(抗生素伤脾胃、伤肝肾)，使疾病演变癌。细胞自身开始优化组合或选择配对，保留了病变细胞的繁殖增生，促发癌形成;另一种是用药对症(证)，提高了免疫系统，增强了脾胃功能，抑制癌变细胞，促使机体对癌变细胞的免疫杀伤作用，使之凋亡癌变不能发生，癌转变成一般疾病，或使肿瘤发生的时间延长。运用中药&四君子汤&治疗&脾气虚&证及运用&四君子汤加味&治疗癌症具有多方面的诱导肿瘤细胞发生凋亡，就肿瘤细胞动力学而言，具有阻断肿瘤停止G1期的作用，从而干扰了肿瘤细胞的正常增殖，活动达到诱灭肿瘤的作用。此外，不同的剂量不同时间点上，有快速阻断细胞繁殖，使之细胞生理改变或损伤、皱缩，致密并迅速破碎形成&凋落小体&，而为邻近细胞所蚕噬。这些生长因子可能是这些药物抑制肿瘤生长的机理之一。
　　1 中药&四君子汤&对&脾气虚&的影响
　　&脾气虚&的研究是中医基础理论研究和临床分析中十分活跃的课题。 从&脾主运化&和&脾旺不受邪&的观点出发，人们对&脾气虚&动物的消化系统和免疫系统进行了大量的研究，积累了丰富的资料。谢锦玉、李乐红、史小林等人运用&脾气虚&组和正常组对比研究发现：&虚证动物和人体肠上皮细胞酶的变化和5-HT细胞分泌活性的变化与脾虚证的发生密切相关，可能是导致脾虚证原因之一&。因此对&虚证&提供了细胞化学指标和科学依据。经&四君子汤&(党参、白术、茯苓、炙甘草)治疗后以上各项指标均比自然恢复组更接近于正常对照组，说明此药对消化道黏膜上皮酶活性和5-HT细胞分泌活性恢复正常有明显效果，从而起治疗作用，为我们临床治疗病症(证)奠定了基础。
　　2 中药&四君子汤&对肌肉的影响
　　从&脾主肌肉&观点考虑脾功能的强弱直接关系到肌肉的衰痿与健壮，肌肉组织功能状态的变化必须与肌肉本身的化学反应有关。谢锦玉、李乐红、孙常义、吴正治等人运用细胞化学定量、定性、定位技术探讨了脾气虚对动物大鼠骨骼肌细胞的细胞化学成分、免疫细胞的细胞化学成分，证实了&脾虚证&能引起细胞免疫机能低下，给脾旺不受邪的理论提出了客观的依据。其表明&虚证&的动物，存在的能源物质贮存减少，能量供应不足，说明脾虚患者还存在免疫调节机能紊乱和低下。这说明&脾主肌肉&和&脾主骨骼&的理论有其细胞化学的科学依据，并揭示中医&脾气虚&的发病机制与能量代谢异常有密切关系，提示&四君子汤&对解除骨骼肌的高度疲劳，增强体质和提高免疫系统有非常重要的作用。为我们临床医大病、久病和放化疗病人提供了所注意的事项和方法及指示。
　　3 脾的功能暨中药&四君子汤加味&在临床&脾气虚&证中的应用
　　3.1 后天之本
　　中医的脾脏是后天之本，饮食是营养的来源，也是能量的来源，所以保证我们吃饭，喝水营养来源的脾脏就叫&后天之本&。因为脾所消化吸收的饮食营养能够变化成气血，所以中医又把脾称作&气血化生源&。脾位于腹部中央[木(肝)、火(心)、土(脾)、金(肺)、水(肾)]，脾主运化，主要指运化饮食水谷。脾主升清，可以将饮食营养向上输送到心化生心血，输送到肺化生肺气，输送到肝化生肝精，向下输送到肾化生肾水，所以脾是人体气血生化之源。脾主运化水湿，将人体内部多余的水分清除。脾的特性是恶湿喜燥。&有胃气则生，无胃气则死&，胃储仓库，脾储运输，当脾有病时，人的运化、升清功能失常，水谷、水湿不运，消化功能减退，也可能形成脾不统血，清气不升。常见症状有食后腹满胀痛，食少便溏，四肢倦怠、水肿、乏力疲劳，或见胃下垂、脱肛、子宫脱垂等内脏下垂，或出现便血、崩漏、紫癜等各种出血性疾病。脾病的主证可以用8个字概括：纳呆、腹胀、腹泻、便溏。纳呆是不想吃，吃不下;腹胀是食后腹胀;腹泻是大便稀、水粪分开;便溏是大便稀，水粪不分。所以，一个人只要脾胃功能健全，即使他得了再严重的病，能吃下饭，营养就能得到补充，能够喝得下药，这个病就能减轻得到治愈。
　　从面部知内脏，脾脏解剖正常气色是红黄隐隐，一般脾脏色部比其他脏的颜色略微偏黄，若面部明亮润泽，饱满顺畅，这是平顺之象。如面部暗淡无光，那么意味着脾脏很可能有病变。
　　3.2 典型病例
　　例1，患者，男，45岁，滨海县通榆人。日下午家人用车送来。家人介绍：经江苏省中医院、南京某三甲医院、青岛某三甲医院，后又转省中医院，历经5年，花费近15万元人民币，后以不治待死而回。余诊为：&脾虚严重&、&婴儿胃&，面色萎黄，有气昏睡，每日进藕粉冲剂20ml，若进30 ml则呕吐，腹大如鼓。经用&四君子汤加味&(党参3g，炒白术3g，茯苓3g，炙甘草2g，柴胡2g，砂仁1g，木香2g，神曲2g，北沙参6g，怀山药4g，陈皮1g，生姜一片、大枣一枚)，经过1个月的健脾养胃调治，现能吃半碗稀饭，能骑电动自行车。
　　例2，患者，男，71岁，家住大有镇康庄村。日家人用小手扶拖拉机送来。主诉：肠梗阻开刀后，呕吐、肠鸣疼痛，食入即吐，经西医对症用药不效，要求服中药，见唇白面黄，鼻头颜色发青发紫，根据症状，严重&脾气虚&症;此病人非常危重，给中药&四君子汤加味&[党参15g，炒白术15g，茯苓15g，炙甘草10g，蜜炒黄芪15g，怀山药12g，藿香15g，代赭石24g(打碎先煎)，川厚朴9g，白蔻仁9g，枳实6g，广陈皮12g，川楝子12g，砂仁6g，吴萸3g，柿蒂15g，生姜3片]3剂而愈，现追访健在。
　　例3，患者，女，59岁，家住滨海县陈涛乡。日来诊。因经常头晕头痛到盐城市第一人民医院检查治疗。(1)CT诊断报告单：头颅CT平扫，未见明显异常征象;(2)尿液分析报告单：蛋白3+，红细胞67个/&l，白细胞29/&l，血糖：23.68mmoI/L，余结合检查数据诊为：&胃火亢奋&&脾气虚证&。经用&四君子汤加味&(党参15g，生白术15g，茯苓15g，炙甘草10g，翻白草100g)。调治月余而愈，至今未用任何西药血糖正常。
　　4 中药&四君子汤加味&影响癌细胞凋亡因素及癌症治疗
　　运用&四君子汤加味&治疗肿瘤和白血病是通过诱发细胞凋亡起作用的，使细胞凋亡在癌生长中起着重要的副作用，阻止肿瘤迅速生长的因素凋亡细胞数增加，降低增殖来达到肿瘤细胞消退的效果。诱导不同类型肿瘤治疗中的凋亡。如果正确得知药物诱发肿瘤细胞凋亡的详细机制，显然可以在临床工作中选择适当的治疗药物。因此细胞凋亡研究有必要重视配组。因此，&四君子汤加味&在癌症治疗的药物中诱导细胞凋亡，这是一个新的探索目标。只要运用现代医疗设备检测和生化检查，早期发现，生理指标的不同和临床反应，而运用完全可能寻找到一种既诱导细胞凋亡又能减少花费，既能延年益寿，又对人体少损害作用的新型抗癌药是极有可能并极为必要的。&人是有机的整体，人与自然的关系&&&。人体中各组织细胞数目的维持是由细胞增殖与死亡之间平衡来实现的。如果细胞增殖、速度加快和细胞死亡速度减慢，均可引些体内细胞异常增多，尤其异常细胞增多，从而导致肿瘤的发生，是否可能通过人为调节之两者之间的平衡即增加细胞死亡率降低细胞增殖率来达到使肿瘤消退的目的，从&四君子汤加味&可见一斑，细胞凋亡的分子机理目前尚不十分清楚，但为肿瘤治疗提供了一种新的思路。
　　4.1 中药&四君子汤加味&诱导细胞凋亡的因素或因子
　　从本质上说，肿瘤的形成是：&脾气虚&免疫机制的紊乱和相关抗肿瘤细胞因子活性降低、功能缺失，是导致肿瘤发生、发展的主要内因。&四君子汤加味&中的有效成分刺激细胞因子而生物治疗，正是通过激活人体抗肿瘤免疫机制、增加抗肿瘤细胞因子活性，从而找到了促使肿瘤缩小、消退的&便捷通道&。
　　多年的临床研究：&四君子汤加味&口服进入胃道内消化酶分解，强化多种细胞因子活性成分，激活人体抗肿瘤免疫功能，诱导机体产生抗肿瘤作用极强的肿瘤坏死因子(TNF)，特异性直接杀伤肿瘤细胞，促使肿瘤缩小、消退。粒&巨细胞集落刺激因子、胸腺素TH等细胞因子联合运用，还能增强骨髓造血功能，改善人体内环境，升高白细胞、血小板，让放化疗顺利高效。晚期肿瘤患者可控制病情改善生活质量，延长生存期。
　　&四君子汤加味&诱导细胞发生凋亡的因素或因子有其组方的不同而产生时间和地点的不同，有些具有普遍性，有些有着单一性和特殊性，有些则具有一定的组织特异性。如对应其因素(放射、紫外线、照射和外敷介入等)导致的DNA损伤，可诱导多种细胞发生凋亡。
　　4.1.1 胃癌四君子汤加味
　　党参15g，炒白术15g，茯苓15g，炙甘草10g，紫藤20g(本部所生之虫瘿)，真沉香10g，菱角肉20g，薏米仁10g，诃子肉10g，山豆根10g，生牡蛎3.6g，吴萸9g，北沙参36g，枳实12g，桂枝6g，白芍12g，木香6g，黄连12g，葛根20g，柴胡12g，香附12g，砂仁10g，草果15g，神曲15g，粟壳9g，柿蒂9g，干姜3.6g，生姜3.6g。方中广豆根素和甲基金雀花碱及免疫调节素，对胃癌细胞P2因子细胞和转化生长因子对胃细胞的凋亡作用。
　　4.1.2 肺癌四君子汤加味
　　党参15g，炒白术15g，茯苓15g，炙甘草10g，鱼腥草50g，山豆根20g，麻油150g，生姜150g，菠萝芯150g，杉木225g，米酒500g，白公鸡一只。方中鱼腥草素、广豆根素、蕺菜碱、免疫调节素能使T细胞抗原受体的诱导作用可导致胞腺细胞发生凋亡。
　　4.1.3 肝癌四君子汤加味
　　醋炒三棱15g，醋炒苍术15g，醋炒香附25g，醋炒柴胡15g，酒大黄25g，党参1 5g，生白术15g，茯苓15g，炙甘草10g，青皮15g，陈皮15g，肉桂5g，海藻20g，桃仁15g，红花25g，生牡蛎15g，乌药15g，赤药15g。本方对淋巴细胞和转化生长因子&1(TGF&1)对肝细胞的凋亡作用。
　　4.1.4 宫颈癌四君子汤加味
　　党参15g，白术15g，茯苓15g，炙甘草10g，五灵脂15g，黄柏25g，知母25g，元参25g，真沉香10g，茯神15g，生石膏20g，大黄20g，黄芪15g，防风15g，山楂15g，威灵仙10g，元胡15g，香附15g，番泻叶10g。方中生物碱和多酶因子在靶细胞中，促使肿瘤坏死因子(TNF)和肿瘤细胞发生凋亡。这些靶细胞表面具有TNF受体，其TNF受体与F&S同源。
　　4.1.5 血液病
　　白血病：重度再生性贫血、恶性贫血、溶血性贫血，骨髓造血功能慢性持续衰竭、或叫中性粒细胞减少、血小板减少症。运用&四君子汤加味&[党参15g，茯苓15g，炒白术15g，炙甘草10g，熟地30g，黄芪90g，真鹿角胶12g，真阿胶12g，紫河车15g，当归10g，肉苁蓉15g，赤芍10g，沙苑子18g，炒杜仲15g，太子参15g，茯神15g，石决明30g(捣碎先煎)。阴虚加龟版、生牡蛎，血热妄行加栀子、茅根、藕节、槐花。出汗心悸重用山萸肉加龙骨、牡蛎、浮小麦。感染发热加地骨皮、银花、板蓝根。头痛眩晕加葛根。咳嗽痰多加芦根、苏子、枇杷叶、马兜铃]。方中对某些细胞生存因子，如神经生长因子以及白细胞具有抑制细胞凋亡的作用。并对慢性淋巴细胞性白血病凋亡具有抑制作用，研究发现，某些细胞凋亡发生过程中，存在大分子蛋白质的主动合成，对抑制RNA和蛋白质合成，可抑制某些因素诱导的细胞凋亡。
　　4.2 中药&四君子汤加味&对细胞凋亡与肿瘤治疗
　　中药&四君子汤加味&对细胞生长因子依赖性细胞和细胞凋亡现象为肿瘤的药物治疗提供了新思路和靶点。对癌症可诱导肿瘤细胞凋亡。若在放化疗过程中应用&四君子汤加味&对症提取液配合可起各特异靶点的相互作用，在肿瘤细胞中诱导凋亡既增加死亡/增殖比是否成为新的化疗目标或方案，是否诱导细胞凋亡成为筛选有效抗癌药物的新标准。
　　4.3 典型病例
　　例1，患者，男，39岁，家住江苏苏州市，驾驶员，日，岳父母带来。主诉：2009年7月，因胃部隐痛，吃饭菜不消化，尤以韭菜为甚。经苏州市第一人民医院检查：&胃炎、胃糜烂、结肠炎&，经治疗3个月后无效转到昆山市第一人民医院治疗。3个月后无效。在极度的恐惧下转治江苏省人民医院，经反复全身检查和生化检查：&胃炎、结肠炎、胃下垂&。经治从国药转用美国进口药，2个月余无效;从体重158斤减至127斤。大便时出血紫黯，饭菜无消化排出。听别人介绍来本诊所。余从脉象、舌象、面象和检查数据综合分析，诊为&早期胃癌&，经用上方10剂而愈。随访胃隐痛已愈，消化正常、体重增加，生理指标正常。
　　按：中药&四君子汤加味&方中广豆根素和甲基金雀花碱及免疫调节素，对胃癌细胞P2因子细胞和转化生长因子对胃细胞的凋亡作用。
　　例2，患者，男，50岁，滨海通榆人，经商。日来诊。经苏州市人民医院确诊：&中性粒细胞减少症&，由于家贫，开一些西药回来服用，经3个多月治疗效果不佳，听人说来余处。经用&白血病四君子汤加味&，至今健在。
　　按：中药&四君子汤加味&提取液可诱导细胞分裂增加细胞存活率，其他一些细胞因子由于具有抑制细胞凋亡增加细胞损伤后存活的功能，因而在肿瘤化疗中有广泛的应用前景。
　　例3，患者，男，54，滨海县八巨镇人，农民。日来诊。食管癌开刀后，经化疗、长期的西药，使之腹痛腹泻，在西医无效的情况下，求余诊治。给&胃癌四君子汤加味&10剂而愈。
　　按：中药&四君子汤加味&对化疗后病给予提取液可使成熟及未成熟的粒细胞增加分裂延长寿命，很快恢复化疗血液细胞的损伤。
　　例4，患者，男，50岁，响水县响南镇人，农民。日来诊，主诉：前期以慢性胃炎治疗，经盐城市第一人民医院和南京市某三甲医院确诊为&胃癌早期&经过西医用药2个月未效，现食欲不振，胃部膨满，有停滞感，嗳气，胃有钝痛感。人消瘦，有家族遗传史。经上述&胃癌四君子汤加味&服用。2个月后再去检查，生理指标和检查正常，使南京的专家们自感困惑。
　　按：中药&四君子汤加味&口服刺激多种细胞因子活性，激活人体抗肿瘤免疫功能，诱导机体产生抗肿瘤作用极强的肿瘤坏死因子(TNF)，特异性直接杀伤肿瘤细胞，促使肿瘤缩小、消退。
　　5 讨论
　　从目前文献报道看，通过诱导肿瘤细胞凋亡方法有可能解决目前肿瘤治疗中的一些难题。但如何寻找有效的切入点诱导肿瘤细胞凋亡新药已成为今后进一步研究的重要课题。笔者认为不久将来，恶性肿瘤最有效、最彻底、最省钱的治疗方案是中医中药诱发肿瘤细胞凋亡，而不是西医的开刀、放化疗和移植骨髓。并且通过中药药物分子介入通过各种因素在不同阶段调节细胞凋亡，其过程对于某些与细胞凋亡相关的非肿瘤性疾病的治疗，具有同样的意义，因此，随着对细胞凋亡分子机理研究的不断深入设计与研究新的功能调节细胞凋亡的中成药、生物制剂以及最佳的中药&四君子汤加味&的调节制剂及条件，通过特殊的神经传导，使药物分子到达病位。将在从药物分子程度上研究中医学科，将中医赋予更多的科学理论根据，帮助世界上更多的人所患疾病的防治中起着重要的作用。
【参考文献】
& 1 谢锦玉.现代细胞化学技术及其在中西医药中的应用.北京：中国古籍出版社，1999:4.
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儿童少年造血机能比成年人强的原因是（　　）
A．脾中有大量的造血组织
B．骨松质中有大量的红骨髓
C．骨膜中有大量造血细胞
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人体内的骨髓有两种，一种是红骨髓，另一种是黄骨髓．幼年时人的骨髓腔里是红骨髓，具有造血功能．成年后骨髓腔里的红骨髓转变成了黄骨髓失去造血功能．但当人体大量失血时，骨髓腔里的黄骨髓还可以转化为红骨髓，恢复造血的功能．在人的骨松质里有红骨髓，终生具有造血功能，可见骨髓位于骨髓腔和骨松质中．因此儿童少年造血机能比成年人强的原因是骨髓腔里是红骨髓具有造血功能．故选：D
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低剂量辐射对小鼠骨髓、肝及脾DNA甲基化的影响
【摘要】：随着放射医学在临床诊疗应用的推广和普及以及核电事业的发展,人们受到的辐射危害也逐渐增加。虽近年来人们对辐射生物学效应研究逐年增多，但主要集中在高剂量辐射，对低剂量辐射关注较少，这使得人们对低剂量辐射效应缺乏足够的了解和科学的认识。低剂量辐射虽不会对机体造成明显的伤害，但并不意味着低剂量辐射对机体没有危害。
辐射可对机体多种组织器官造成损伤，如骨髓的造血组织，消化系统的肝脏及免疫系统的脾脏，它们均对辐射较为敏感。既往研究显示辐射可导致骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell，BMNC）DNA受损，凋亡率增加，骨髓增殖能力降低，使骨髓造血干细胞数量迅速减少，最终导致血液系统疾病的发生，如白血病。同时辐射也可导致肝脏的损伤[1]。Gridley等人研究同样发现无论何种类型辐射都会导致免疫力下降及脾脏细胞的异常[2]。
表观遗传学是指不涉及DNA序列改变的基因表达变化。它的主要调控方式包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色体重塑和非编码RNA等。目前人们关注较多的是DNA甲基化，DNA甲基化是指由DNA甲基转移酶（DNAmethyltransferase，DNMT）催化，将活性甲基从S-腺苷甲硫氨酸转移至胞嘧啶，从而使胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶的化学反应过程。DNA甲基化发生在胞嘧啶残基，主要是胞嘧啶-磷酸二酯-鸟嘌呤（cytosine-phosphate diester-guanine，CpG）二核苷酸部位，哺乳动物体内的CpG以两种形式存在，一种是分散于DNA中，另一种是位于转录调控区附近的CpG岛。它不仅可稳定或锁定静息部位染色体的状态，还对基因印记、X染色体失活、反转录转座子的抑制以及动物的正常发育都是必不可少的。1989年，Kalinich等人的研究发现射线可使一些细胞系的甲基化胞嘧啶还原为胞嘧啶[3]。1998年，Tawa等人同样报道辐射可导致体内外全基因组甲基化程度的降低[4]。2013年，Antwih等人报道辐射可影响细胞DNA甲基化[5]。但是以上研究均采用的是高剂量辐射，低剂量辐射与DNA甲基化效应仍不清楚。2004年，Kovalchuk等人的研究发现低剂量辐射可导致DNA甲基化水平的改变，且具有组织特异性和器官特异性[6]，但有关低剂量辐射对DNA甲基化影响的研究报道仍相对较少，其与DNA甲基化的关系并不十分清楚。本研究拟通过观察低剂量辐射对小鼠骨髓、肝脏和脾脏生物学效应的影响，尤其是DNA甲基化的影响，为辐射防护提供新的研究思路。
目的：研究低剂量辐射对急性放射损伤小鼠外周血计数，BMNC增殖能力与凋亡率，肝、脾组织学结构，脾指数，肝、脾及BMNC全基因组DNA甲基化水平及DNA甲基转移酶（DNAmethyltransferase,DNMTs）表达的影响，进而观察急性低剂量辐射对小鼠生物学效应的影响。
1.将C57BL/6小鼠随机分为5组，每组25只，正常组（不做任何处理）；辐射组（按辐射后提取标本时间分为1、3、7及14d组）。辐射组采用直线加速器全身均匀照射，总剂量为1.0Gy,时间为0.39min，X射线吸收剂量率为300cGy/min，有效面积为25cm2,焦点-鼠距为100cm。并于不同时间点眼眶取血，取血后颈椎脱臼处死小鼠,常规方法提取BMNC、肝脏及脾脏。
2.常规进行外周血WBC,RBC及PLT计数。
3.CCK8法检测BMNC增殖能力。
4.流式细胞术检测BMNC凋亡率。
5.制备肝脏组织学切片并光学显微镜观察。
6.计算脾指数及制备脾脏组织学切片并光学显微镜观察。
7.高效液相色谱仪检测肝、脾及BMNC全基因组DNA甲基化水平。
8.WB（western blot）检测BMNC DNMT1、DNMT3A及DNMT3B的表达。
9.WB检测肝脏DNMT1、DNMT3A及DNMT3B的表达。
10.WB检测脾脏DNMT1、DNMT3A及DNMT3B的表达。
1.与正常组相比，辐射组小鼠毛发光泽、活动度、食量及饮水量均与正常小鼠无异，大便无异常，14d内无小鼠死亡。
2.与正常组相比，辐射组白细胞及血小板计数均明显降低（P0.05），白细胞在1d时降至最低，而血小板在3d时降至最低，14d仍未恢复正常。
3.与正常组相比，辐射组小鼠BMNC增殖能力升高（P0.05），14d时恢复正常。
4.与正常组相比，辐射组小鼠BMNC凋亡率3d开始升高（P0.05），14d恢复正常。
5.光镜结果显示，与正常组相比，辐射组小鼠肝小叶结构完整，病变多发生在中央静脉附近，肝细胞水肿、空泡变，局部肝细胞坏死，少许细胞脂肪变，血窦被挤压变窄，尤以3d和7d时最为严重，14d略有好转，但未恢复至正常。
6.与正常组相比，辐射组小鼠脾指数在1d时即显著降低，7d恢复正常。光镜结果显示，正常组小鼠脾脏白髓与红髓分界清楚，淋巴细胞排列紧密，辐射组小鼠脾脏出现淤血，部分小血管玻璃样变性，血管内皮细胞肿胀，尤以3d组最为严重，7d时逐渐好转，14d时恢复正常。
7.与正常组相比，辐射组BMNC、肝及脾全基因组DNA甲基化水平下降（P0.05），但BMNC和肝分别在14d及3d恢复正常,脾脏在14d仍未恢复正常。
8.与正常组相比，辐射组BMNC DNMT1及DNMT3A表达显著升高（P0.05），14d时仍未恢复至正常， DNMT3B的表达也显著升高（P0.05），但在7d时已恢复至正常。
9.与正常组相比，辐射组肝脏DNMT1及DNMT3A表达显著升高（P0.05），14d时仍未恢复至正常。DNMT3B的表达也显著升高（P0.05），但在7d时已恢复至正常。
10.与正常组相比，辐射组脾脏DNMT1及DNMT3A表达显著降低（P0.05），DNMT3B未检测出，DNMT114d时仍未恢复正常，DNMT3A在7d时已恢复至正常。
结论：1）单次1Gy x射线照射可导致小鼠BMNC凋亡率及增殖能力的增高，全基因组DNA甲基化水平的降低及DNA甲基转移酶表达的升高。2）单次1Gy x射线照射可导致小鼠肝脏和脾脏组织学结构的紊乱，肝脏和脾脏全基因组DNA甲基化水平的降低及DNA甲基转移酶表达的紊乱，且DNA甲基转移酶表达的改变具有组织和器官特异性。
【学位授予单位】：重庆医科大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2014【分类号】：R818
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刘晓冬;焦本蒸;刘杉珊;易贺庆;孔德娟;赵广通;高琳;马淑梅;;[J];辐射防护通讯;2009年05期
谢漪;党秉荣;张红;邴涛;郝冀芳;郭红云;王小虎;;[J];辐射研究与辐射工艺学报;2006年03期
谢漪;党秉荣;邴涛;张红;郝冀芳;郭红云;王小虎;;[J];航天医学与医学工程;2006年05期
朱亮;邢福祺;全松;张文颖;杜建新;;[J];基础医学与临床;2010年01期
金铁峰;张美花;林贞花;;[J];基础医学与临床;2011年02期
史金铭;黄磊;李文建;孙野青;;[J];激光生物学报;2009年05期
曲保忠;张建;徐俊杰;沈楠;吕士杰;;[J];吉林医药学院学报;2012年03期
许英晨;周军年;曾泉;袁红丰;岳文;裴雪涛;;[J];军事医学科学院院刊;2010年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库
贾峰;魏庆华;杜铮;王彩霞;黄晓书;刘卫群;;[J];山东农业科学;2010年06期
吕喆,刘扬,王珍琦,马淑梅,刘光伟,孙延红,龚守良;[J];吉林大学学报(医学版);2004年06期
孙祖玥,傅静宜,刘淑春,吕喆,孙丽光,李修义,赵勇,龚守良;[J];吉林大学学报(医学版);2005年04期
杨岩;陈晓;李薇;王冠军;;[J];吉林大学学报(医学版);2008年01期
唐继红;傅必莽;董丽英;唐波;朱洪;刘亚飞;;[J];大理学院学报;2010年12期
张力元,江家贵,宁萍,陈列松,朱永进;[J];辐射研究与辐射工艺学报;2004年05期
夏景光,李文建,王菊芳,郭传玲,金晓东,高清祥;[J];辐射研究与辐射工艺学报;2005年01期
谢漪;张红;党秉荣;郝冀芳;郭红云;王小虎;;[J];辐射研究与辐射工艺学报;2007年06期
刘淑春;龚平生;王志成;孙丽光;龚守良;;[J];辐射研究与辐射工艺学报;2008年02期
李时恩;周丽丽;董豪杰;吴逸明;;[J];工业卫生与职业病;2010年05期
中国重要会议论文全文数据库
刘银雪;刘华珍;张建宾;宋卉;逯志强;刘志伟;彭克美;;[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
包慧君;徐春生;张莉;李梅英;陈秋生;;[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
许文静;吴艳秋;郭建光;符杰;施美莲;高静华;徐平;;[A];第十届中国实验动物科学年会论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库
佟庆;[D];北京中医药大学;2011年
王瑞霞;[D];山东中医药大学;2011年
王巍;[D];哈尔滨工业大学;2011年
包慧君;[D];南京农业大学;2010年
杨岩;[D];吉林大学;2007年
徐晓华;[D];吉林大学;2007年
周晓中;[D];苏州大学;2007年
徐炜;[D];苏州大学;2012年
国贺;[D];吉林大学;2014年
陈明;[D];苏州大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库
刘伟;[D];安徽农业大学;2010年
彭珍珍;[D];兰州大学;2010年
石建华;[D];山西医科大学;2011年
郭娜;[D];昆明医学院;2011年
孙秀红;[D];暨南大学;2011年
艾昊;[D];兰州大学;2011年
王娟;[D];济南大学;2011年
陈琦;[D];长春中医药大学;2011年
郭广平;[D];中国林业科学研究院;2011年
萧淑宜;[D];广州医学院;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库
汪谦,程庆君,郭金鹏;[J];蚌埠医学院学报;1991年01期
李啸峰,迟宝荣,马琳,张铭;[J];白求恩医科大学学报;2001年05期
冯虎元,徐世健,安黎哲,刘志杰,王勋陵;[J];西北植物学报;2001年01期
刘全达,马宽生,何振平,丁钧,董家鸿,何长生;[J];第三军医大学学报;2003年04期
李淑萍;何津祥;李敏;杜兰宁;刘兆辰;;[J];辐射防护;2007年06期
何淑杰,金顺子,刘树铮;[J];辐射研究与辐射工艺学报;2000年04期
何淑杰,谢风,刘树铮;[J];辐射研究与辐射工艺学报;2001年02期
李啸峰,马琳,张铭,迟宝荣;[J];辐射研究与辐射工艺学报;2002年02期
刘树铮，苏旭，张迎春;[J];辐射研究与辐射工艺学报;1994年01期
赵勇，龚守良，刘树铮;[J];辐射研究与辐射工艺学报;1996年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库
;[J];中国法医学杂志;2000年01期
龚志君,陈林立;[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2000年05期
吴伟,崔光华;[J];国外医学.药学分册;2000年02期
;[J];中国病理生理杂志;2001年11期
;[J];中国病理生理杂志;2001年11期
姚湧;夏立照;;[J];热带病与寄生虫学;2001年01期
高春芳;王皓;高国华;宓庆梅;孔宪涛;;[J];世界华人消化杂志;2001年05期
,张小如;[J];福建医药杂志;2002年06期
李伟文;[J];国外医学.遗传学分册;2002年04期
,耿惠杰;[J];现代中西医结合杂志;2002年18期
中国重要会议论文全文数据库
梁金玲;吴玲玲;周剑章;林仲华;;[A];第十三次全国电化学会议论文摘要集（下集）[C];2005年
范新萍;;[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年
郑利雄;李放娟;吴育庆;张桂梅;何桂荞;熊峰;;[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
邵勇;刘亭丽;张罡棋;朱晓青;;[A];中国化学会第十五届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文集[C];2009年
关明;;[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
;[A];第一届全国生物物理化学会议暨生物物理化学发展战略研讨会论文摘要集[C];2010年
张新跃;;[A];中国草学会饲料生产专业委员会第十六次学术研讨会论文集[C];2011年
Michael M.Y;[A];首届粤港生物物理学术研讨会论文集[C];1999年
邓用川;陈菊培;罗越华;李冠一;林栖凤;;[A];植物分子育种——第四届全国植物分子育种学术研讨会论文集[C];2004年
李延;张成孝;;[A];中国化学会第十届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2004年
中国重要报纸全文数据库
记者 徐敏;[N];解放日报;2005年
刘工;[N];经济参考报;2002年
北京大学生命科学学院
侯巧明;[N];计算机世界;2001年
陈丹;[N];科技日报;2001年
郭朝元;[N];民营经济报;2005年
本报记者 翟永太 聂同钢;[N];人民公安报;2006年
张梦然;[N];科技日报;2008年
韩梁;[N];新华每日电讯;2009年
郑晓春;[N];科技日报;2009年
王艳红;[N];新华每日电讯;2001年
中国博士学位论文全文数据库
李艳伟;[D];山东农业大学;2009年
张凤梅;[D];中国疾病预防控制中心;2009年
蔡宏;[D];华东师范大学;2003年
李雪梅;[D];青岛科技大学;2006年
梁乐;[D];中国科学院研究生院（上海应用物理研究所）;2014年
王延峰;[D];华中科技大学;2007年
蒋伟;[D];华中科技大学;2007年
鲁卫平;[D];重庆医科大学;2009年
樊浩;[D];华东师范大学;2010年
周剑章;[D];厦门大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库
陈雪姣;[D];湘潭大学;2010年
王平红;[D];海南大学;2006年
郭爱敏;[D];中南大学;2007年
李春宏;[D];广西医科大学;2008年
罗兴;[D];湖南大学;2012年
杨青喜;[D];长春理工大学;2013年
冯媛媛;[D];青岛科技大学;2009年
赵剑;[D];陕西科技大学;2010年
史庭燕;[D];东南大学;2004年
杨培菊;[D];西北师范大学;2005年
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