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【求助】pP38,pERK,pJNK western blot 条带，大家帮我看看给点意见~~
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这个帖子发布于9年零104天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
图是我用大脑海马组织做western blot，任意样本，用来做练习的，左边的暴光时间长一点，右边的暴光时间短一点。pJNK和pERK条带出来了，pp38没出来，为什么呢？三个都是在一样的条件下做的。一抗用cell signaling的，1：1000，4摄氏度过夜，二抗用Amersham的，1：1000室温1小时。还有pERK和pJNK的条带为什么不像最下面的一行条带那样出来的不漂亮呢？那也是我以前用海马组织作的别的蛋白条带。希望western专家们多给点建议，谢谢！！
不知道邀请谁？试试他们
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哎~~ 自己顶了，好像上样量太多了点，减少后好多了。
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磷酸化的蛋白想做出条带首先必须确保样本磷酸化，为什么这么说呢，以前我用细胞做过lps引起的磷酸化western，当时没掌握好时间（lps引起的磷酸化是有时间周期性的）吃了不少苦头。再有，我做磷酸化蛋白western时，抽提蛋白的时候总是加NaF, Na3VO4和PMSF，据说他们是稳定磷酸化的。其他的就得自己摸索经验了。
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我也想做这几个指标的western，是肾皮质里的，想请问一下，磷酸化和去磷酸化的这三种蛋白有什么区别吗？是不是磷酸化的是有活性的，去磷酸化的是失去活性的？测定的结果会和RT-PCR测定的这三种基因的表达有很大差异吗？
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关于丁香园　　作为网络产品经理，主管说要派我去巴西出差两三个月（不过论坛里说经常被扣半年一年的），还说后续可能会安排在那边常驻。　　但个人感觉时差，距离，语言，工作量，治安等问题一直让我心里怪难受的。出差还是挺想去的，但是常驻的话还真不想，而且看了下天涯，巴西感觉好恐怖啊　　现在想请去过那边出差或者常驻过的同事分享下经验，那边到底怎么样？是否适合生活，是否适合带老婆一起过去？　　请各位说下那边的情况　　谢谢
楼主发言：1次 发图：0张 | 更多
　　据说有个人刚累死在那里
　　治安没有问题，语言不是问题，时差距离是问题。　　　　看你领导是不是真的要你回去，还是已经想好让你留巴西了
　　补充一句，环境很不错，适合家属生活，但员工工作比较累。
　　从心底里说希望你过来，你过来我们才能回去，呵呵。不是说的恐怖，干起活来才真的恐怖！
　　哎，不会吧，华为巴西这么恐怖，我也要被拍到巴西常驻，但我是中兴的，不知道是什么情况，哎。。。。
　　巴西美女多
　　巴西美女多
　　ZHIDING
我也想去　　
　　@maupassant9
21:53:00　　　　哎，不会吧，华为巴西这么恐怖，我也要被拍到巴西常驻，但我是中兴的，不知道是什么情况，哎。。。。 　　-----------------------------　　中兴要好点吧，听说还要在巴西建厂活收购。但是压力也不小，总得有业绩不是？巴西长期就是华为的天下，因为有这么大一帮不知累死半活的兄弟们在苦苦支撑。
　　看看巴西领导的嘴脸，然后再决定是否要去吧　　　　http://www.tianya.cn/techforum/content/516/1/112043.shtml
　　谢谢大家的分享，根据我最近了解的情况，巴西还是很不错的，所以现在非常坚定要去巴西了，而且发现好多同事同学都在那边　　巴西，非你不去
请遵守言论规则，不得违反国家法律法规回复(Ctrl+Enter)1<input type="button" value="GO" onclick ="var val = Number(jQuery(this).parent().children(':text').val()); if (isNaN(val) || val
2){val = 2;}window.location.href = '/30-30100-detail--0-__id__.html'.replace('__id__', val); ">
我想买在布吉，各位给点意见
alicederose
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我想买在布吉，各位给点意见
各位大神啊，我想买在布吉，据说半岛苑还比较便宜，不知那到底如何，请各位在那住的大神们，给点意见吧
烦恼的卖房人
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去宇宏健康花城看看吧，是新盘，89平三房
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半岛苑真的很好，环境优美，空气宜人，适合住家，房价也合理，邻里关系还和睦，来吧，半岛苑欢迎你
alicederose
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但是1栋和13栋是不是不能买，求解答
齐富扬企业
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小区挺好的，户形也不错，只是离地铁口稍远了些，如果有车的话不成问题，而且公园近，空气好，老人爬山也方便，自己喜欢就好。
alicederose
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谢谢，但是就是纠结靠路边的那两栋是不是很吵？灰是不是多？能不能住家的？有住这两栋的业主给点意见好么？
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alicederose
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这个是说半岛苑涨的最少是吧？
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中海怡翠山庄还是不错，绿化好，居家氛围强烈
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布吉看木棉湾布吉小学&文体中心都动工了，未来要是成立布吉新区，那里就是区政府！还有南门屯旧改去东站也近。
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阳光花园呢？[房叔]( 13:48:17)
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这是哪里的数据啊？[房叔]( 13:48:17)
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半岛苑旁边的加油站，是不知道还是不介意？
alicederose
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想知道加油站影响小区？
深圳学位房置业向导
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布吉不是新开了个楼盘么？有米可以考虑
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我上个月买的&&半岛苑性价比可以的
房事我知道
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可以买健康花城，比旧小区还便宜
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在哪上班啊？布吉早高峰盛况要考虑一下哦。
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后海堵的比布吉还严重。[山民-01-19 08:44:07)在哪上班啊？布吉早高峰盛况要考虑一下哦。
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不在乎地铁买花城，朝花园的户型噪音影响不大[alicederose]( 13:46:30)谢谢，但是就是纠结靠路边的那两栋是不是很吵？灰是不是多？能不能住家的？有住这两栋的业主给点意见好么？
多姿多彩921
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买了桂芳圂
1<input type="button" value="GO" onclick ="var val = Number(jQuery(this).parent().children(':text').val()); if (isNaN(val) || val
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（家在广告业务）佳能450D1855套头实在伤不起，想换镜头？给我点意见吧。
<p class="detail" data-data='本人做淘宝的，平时拍点服装，室内有两个柔光箱，1855拍的锐度实在太差，后期PS锐化很难看，最让人受不了的是颜色变色的问题，太严重了，故想换个镜头。经济拮据，打算入一2000元左右的镜头，二手的也行。考虑到房间拍摄，焦距最大24MM，再大我就的站在窗台上了，这是一个很严重的局限。考虑的房间大小+2000价格，剩下的可以选的镜头就不多了。麻烦各位给个意见，选哪个好些吧，谢谢！！1.腾龙（Tamron）SP AF17-50mm F&#47;2.8 XR Di II LD 标准变焦镜头(佳能卡口)2.适马（SIGMA）AF 18-50mm F2.8-4.5 DC OS HSM（佳能卡口）3.佳能（Canon） EF 24MM F&#47;2.8 广角镜头 4.佳能（Canon） EF-S 18-135mm f&#47;3.5-5.6 IS 镜头我还有其它选择吗？上面四款哪个好些呢？锐度和色彩过的去就行。给我点建议吧，先谢谢了！！选定了，我就去到二手市场找找看。'>本人做淘宝的，平时拍点服装，室内有两个柔光箱，1855拍的锐度实在太差，后期PS锐化很难看，最让人受不了的是颜色变色的问题，太严重了，故想换个镜头。经济
按时间排序
首先偏色大多是白平衡设置问题，属于机器问题。四只镜头之中，适马18-50、原厂18-135的成像都是与18-55同一个等级的，绝对的不推荐考虑，以你要求，买了白买。剩下的17-50和24/2.8，个人更偏向于17-50，毕竟焦段方便，除了干活，日常也可以挂机使用，画质比18-55更是有大进步。24/2.8虽是定焦，锐度有保证，但毕竟全幅头，用在半幅机上有点可惜了广角（但如果对其他焦段没需求，并且只用于拍摄产品，此头还是可以一用）。
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确定要取消此次报名，退出该活动？我的两年速锐，油耗越来越高，大家给点意见怎么破_速锐_比亚迪
& 我的两年速锐，油耗越来越高，大家给点意见怎么破 (发表于 )
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我的两年速锐，油耗越来越高，大家给点意见怎么破 速锐vvl买了两年了，油耗从来没掉过九个，夏天基本是10个油，出远门全程高速还跑出过7个以内，可一到冬天，这油耗基本维持在14个，咋开也掉不下来，稍微堵点都能干到15去，单位的a6都比我这个省油啊，4s去了一顿检查，说啥都正常，在这次保养之前节气门，喷油嘴，都清洗了，保养时又换了火花塞，六万多的车保养一回坑我900多，也是无语了，可这油耗根本掉不下来啊，4s也给不出结果，就说是因人而异，我手动挡的，1.5的车开出14个油还能是人的问题吗？而且上下班都不堵车，正常等红绿灯。这车我是无语了，冬天，天一冷，平衡杆胶套就枝丫丫响，冷车打方向，车直往出穿，手刹线，拉上就冻住，上次我是拖着抱死的后轮，在冰上，打出溜滑开到4s的，现在我也见怪不怪了，其他的异响都不算什么了，我现在只希望油耗能降下来，我过了年把他处理掉，也省了心啦，太闹挺了。油耗飙到14是家常便饭 用户名 操作 操作时间 查看全部 ...