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&用液体培养基把大肠杆菌摇出来了,但是接种到平板上怎么就一点不长呢
用液体培养基把大肠杆菌摇出来了,但是接种到平板上怎么就一点不长呢
作者 muzheng88
如题,取1mL大肠杆菌原液(冰箱里4℃五个月,液体培养基)在三角瓶里的液体培养基中,摇了一天没长出来,但是在之后的5个小时内液体培养基变浑浊了,然后我又摇了10个小时。我取其1mL稀释了10的四次方,五次方和六次方做平板,一个菌都没长,哪些大虾帮帮忙,分析下原因,怎么就没长菌落呢。
1.你做个G染色,看看是不是有很多大肠杆菌。
2.平板的培养基,我觉得大肠挺容易长的吧,一般培养基的营养都ok啊。你调下ph7.2~7.4试试。
3.是不是稀释的时候不匀或者涂布的时候烫死了?你试试直接用接种环沾点菌液,三区划线?
4.如果你的大肠杆菌是有抗性的,但是你刚刚活化,先不要往培养基里面加抗生素吧,等它在普通平板长出来之后,再往有抗生素的平板转接,抗生素浓度先低一些,再逐渐升高。
以上是个人愚见,如有不对的,不要喷我哦,
1.用同样的培养基不加接种的菌液摇48h看看有没有浑浊——判断是否培养过程污染;
2.不稀释,直接用原液接种平板——判断是否稀释倍数过高(可能性不大,都浑浊了,起码10E7);
3.用平板涂布法,不用倾注法——可能细菌刚刚复苏,抗性不大,像楼上说的,被烫死了(最可能的原因);
4.直接用非选择性培养基NA、TSA、LB+Agar试试,用平板涂布法
染菌 抗性平板杀死了非E.coli
或者长出的是无抗性E.coli 上抗性平板不长
4度5个月的菌种还能用?换-80度的吧
是不是已经死了,你摇出来的是杂菌,所以涂板没有抗性不长
杂菌本身没有什么抗性,在在你液体培养基中慢慢诱导出来的
我们实验室诱导耐药菌株都是这样慢慢诱导的
我的也是,隔一段时间没做实验,开始做了就是不长
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平板培养计数法与发酵法检测大肠菌群的比较
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平板培养计数法与发酵法检测大肠菌群的比较
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平板培养计数法与发酵法检测大肠菌群的比较
□ 梁盛年 陈雄伟
摘 要:大肠菌群的有无及其存在的数量是评价食品卫生的重要指标。目前,食品和饮用水中的大肠菌群检测执行的是GB规定的传统乳糖胆盐发酵法,但该法工作量大,操作步骤繁琐,检测时间长,成功报告一个阳性结果需要72h。本实验选用151份样品用COLI ID选择性显色培养基平板培养计数法(以下简称平板法)对大肠菌群数进行快
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金月芽期刊网 2018急问:平板怎么长成了这样(培养箱,单菌落,大肠杆菌,质粒) - DNA技术 - 生物秀
标题: 急问:平板怎么长成了这样(培养箱,单菌落,大肠杆菌,质粒)
摘要: [急问:平板怎么长成了这样(培养箱,单菌落,大肠杆菌,质粒)] 我从国外买了大肠杆菌(Escherichia coli)(含质粒):1、先挑取单菌落入3 5ml LBamp过夜培养;2、从过夜培养物中取100ul涂布平板(LB amp);3、放培养箱进行过夜培养;
今天上午去看,发现平板上细菌长的连成一大片,几乎没有几个分开的单菌落,怎么回事呀? 还有,发现培养箱的温度竟然有近40度了!这有什么影响呀? 急盼解答!谢谢! 关键词:[单菌落 培养箱 质粒 大肠杆菌 细菌 温度 培养物]……
我从国外买了大肠杆菌(Escherichia coli)(含质粒):1、先挑取单菌落入3.5ml LBamp过夜培养;2、从过夜培养物中取100ul涂布平板(LB amp);3、放培养箱进行过夜培养;
今天上午去看,发现平板上细菌长的连成一大片,几乎没有几个分开的单菌落,怎么回事呀? 还有,发现培养箱的温度竟然有近40度了!这有什么影响呀? 急盼解答!谢谢!
回复可能的原因:1,涂的太多了,其实用接种环挑一点划线就可以的到单菌落了;2,平板中忘了加抗生素(antibiotic)?培养箱温度过高应该不是长的密的原因回复倒LB平板时加入抗生素(antibiotic)时的温度不要超过80°C,超过80度AMP容易分解失去抗生素(antibiotic)的作用,请明确是否是自己倒的平板,有没有严格控制倒平板时的温度;另外做细菌的分离纯化,最基本的方法是划线培养而不是用涂布棒涂匀后培养,]主要原因可能是抗生素(antibiotic)失效导致菌落长成一片。回复哦,谢谢指教!我准备再制备几个平板,进行划线培养!回复很可能是平板的没有抗性回复涂得太多了,化线即可
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