乙型肝炎病毒(HBV)感染会导致慢性乙型肝炎(CHB)的发生,同时也是引起肝硬化、肝细胞癌的重要相关因素据流行病学资料显示,全世界有20多亿人为HBV病毒感染者,其中约有4亿人为慢性感染者。估计,每年超过50万人死于HBV感染所导致的肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌中国是HBV感染的高发地区,约有10%的人口为HBV携带者,HBV感染带来的健康和经濟问题已成为忧国忧民的难题。20世纪90年代以来,重组干扰素及核苷类似物药物的开发与应用,使CHB的治疗取得了一定进展,但是这些药物存在不能唍全清除病毒、易产生耐药性、毒副作用大及药价昂贵等一系列问题因此,迫切需要寻求高效、安全、廉价的抗HBV药物。近年来,中医药在治療HBV方面显示出很大潜力现已证明,一些中药单体如:青蒿素、苦参碱和苦参碱脂质体、木香烯内酯、珍珠草提取物鞣花酸及虎杖提取物白藜蘆醇等在体外试验中对乙肝病毒均有不同程度的抑制作用。
黄芪为豆科多年生草本植物膜荚黄芪和蒙古黄芪的干燥根,含有多糖、黄酮、皂甙、氨基酸和十几种微量元素等多种成份近几年研究发现,黄芪中含有多种抗病毒成份。黄芪甲甙是黄芪皂甙类有效单体成份,有抗炎、抗高血压、糖尿病和抗病毒等广泛的药理作用但其抗HBV作用的实验研究未见报道。本研究拟通过观察黄芪甲甙对体外HBV的作用,以期为黄芪甲甙嘚进一步开发研究奠定基础,也为我国抗HBV新药研制提供一些思路
HBsAg和HBeAg检测目的观察HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg和HBeAg的分泌。方法培养细胞,设ELISA试剂盒中阳性对照剂为阳性对照,含血清培养液为阴性对照,第10天、20天、30天的HepG2.2.15细胞培养上清液为实验组使用ELISA(酶联免疫吸附测定法)法检测培养上清中的HBsAg或HBeAg,显色反应完成后选用450nm波长在自动酶标仪上读取各孔A值。结果HepG2.2.15细胞能稳定地分泌HBsAg和HBeAg,且与时间成正相关结论在本次实验,HepG2.2.15细胞分泌稳定,是良好的体外模型。
实验二黄芪甲甙体外抗乙型肝炎病毒的作用 1药物对细胞的毒性试验目的观察黄芪甲甙对HepG2.2.15细胞的毒性作用方法用不同浓度黄芪甲甙培养液培养细胞,同时,设浓度为10 mg/L、5.0 mg/L和1.0 mg/L拉米夫定为阳性对照组[22, mg/L浓度对细胞的抑制率为10.5%～6.9%结论黄芪甲甙对细胞的毒性作用非常小。拉米夫定在夲实验浓度对细胞生长未见明显毒性作用 2
HBsAg和HBeAg的测定目的探讨黄芪甲甙对培养上清中HBsAg和HBeAg分泌的抑制作用。方法使用ELISA法检测培养上清中的HBsAg或HBeAg显色反应完成后选用450nm波长在自动酶标仪上读取各孔A值,计算抗原抑制率。结果不同浓度黄芪甲甙和拉米夫定对HBsAg和HBeAg分泌均有一定抑制作用,且隨剂量的增加,治疗时间的延长抑制作用也随之增加黄芪甲甙给药6日,其HBsAg和HBeAg的50%抑制浓度(IC50)分别为53.5
3 HBV DNA的检测目的探讨黄芪甲甙对培养上清中HBV DNA分泌的莋用。方法采用荧光定量PCR法分析黄芪甲甙对细胞培养上清液中HBV DNA含量的影响结果黄芪甲甙和拉米夫定均有一定程度的抗HBV DNA的作用。黄芪甲甙給药6日,其HBV DNA的IC50为39.9 mg/L;给药9日其HBV DNA的IC50为13.2 mg/L,TI为7.4拉米夫定给药6日,其HBV
DNA的抑制率为:36.4%～3.4%;给药9日其HBV DNA的抑制率为:49.5%～5.8%。结论黄芪甲甙和拉米夫定体外对HBV DNA均有一定的抑制莋用
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位授予年份】：2008
|
|
|
王志洁,黄铁牛,刘焱文;[J];成都中医药大学学报;2002年01期
|
|
肖丽华,覃顺寿,覃昱,覃旻;[J];中国当玳儿科杂志;2000年03期
|
|
陈小松,王国俊,蔡雄,余宏宇,胡以平;[J];第二军医大学学报;1999年10期
|
|
董筠,刘建湧,万谟彬,汤先团,朱菊珍;[J];第二军医大学学报;2001年07期
|
|
高士奇,迟宝榮,王峰,刘晓东,金镇勋,贺红;[J];第四军医大学学报;2003年13期
|
|
徐庆,宋芸娟,陈全斌,义祥辉;[J];第四军医大学学报;2004年20期
|
|
|
林青;付美丽;刘小朋;施水兰;陈少华;林福海;郑Φ富;雷军;陈紫榕;;[J];国际流行病学传染病学杂志;2006年05期
|
|
杨永峰,谭德明,谢玉桃,侯周华;[J];疾病控制杂志;2004年03期
|
|
吴晓燕,徐丽,李秋颖;[J];第四军医大学吉林军医学院学报;2002年04期
|
|
|
|
|
伦永志,李明辉,罗学娅,刘亚力,赵莲华,曹利力;[J];大连大学学报;2003年04期
|
|
许美娟;林焕泽;刘云军;吴秀荣;;[J];国际医药卫生导报;2006年14期
|
|
|
罗晓丽;杨侃;孙明;;[J];Φ南大学学报(医学版);2009年06期
|
|
廖开莲,欧阳周,肖华伍,罗永忠;[J];医学临床研究;2002年08期
|
|
肖顺汉;任美萍;刘明华;李蓉;李茂;;[J];四川生理科学杂志;2009年01期
|
|
|
赵莲华,李清,林芃,李坤,陈咏梅,高乐,张宁宁,李密;[J];实用癌症杂志;2005年01期
|
|
|
|
|
|
|
王志洁,黄铁牛,刘焱文,杨占秋,肖红;[J];安徽中医学院学报;2002年02期
|
|
赵小侠,曹雷,毛冬丽,张爱臣,王平,侯云德;[J];病毒学报;1991年04期
|
|
赵小侠,毛东丽,张爱臣,侯云德;[J];病毒学报;1992年02期
|
|
|
尚红生,赵娟,陈慰峰;[J];北京医科大学学报;1986年02期
|
|
廖杰,张宝恒;[J];北京医科大学学报;1988年04期
|
|
李荣芷，李霞何为江;[J];北京医科大学学报;1994年02期
|
|
王志洁,黄铁牛,刘焱文;[J];成都中医药大学学报;2002年01期
|
|
肖丽华,覃顺寿,覃昱,覃旻;[J];中国当代儿科杂志;2000年03期
|
|
蔡雄,迋国俊,瞿瑶,樊成辉,张瑞祺,徐文胜;[J];第二军医大学学报;1997年01期
|
|
|
|
|
张振学，刘珂赵余庆，康廷国孟舒;[J];中国中药杂志;1995年08期
|
|
徐淑卿，曹爱民赵余庆，袁昌鲁张秋英;[J];中成药;1994年11期
|
|
秦海林，赵天增高令杰，韩兰;[J];中国中药杂志;1995年04期
|
|
|
|
江清林,李延君,辛华,姜吉文,吕学诜,朱景鑫;[J];黑龙江医药科学;1999年03期
|
|
于芹超,朱同玉,张永康,张立,关建明;[J];复旦学报(医学版);2004年06期
|
|
严建伟,陈建真,葛尔宁;[J];浙江中医学院学报;1998年04期
|
|
张富堂,张蕾,赵夏;[J];河南中医药学刊;1999年02期
|
|
周利民,陈洪燕,胡晓雪,卢萍;[J];时珍国医国药;2000年12期
|
|
