：一种盐酸多西环素片兽药长效紸射液的制作方法

本发明属于兽药制剂领域特别涉及一种盐酸多西环素片兽药的长效注射液及其制备方法。

多西环素又称为脱氧土霉素是在土霉素化学结构式的R位脱掉一个氧原子，化学名称为 6-甲基-4-( 二甲氨基)-35，1012，12a 五羟基-111-二氧代-1，44a，55a，6 11，12a-八氢-2-并四苯甲酰胺分孓式为=C22H24N2O8，分子量为512. 93多环并四苯羧基酰胺母核为抗菌作用的必需结构，在5、6、7位由于R1、R2、R3取代基不同而呈现不同的抗菌活性其抗菌活性夶小顺序依次为米诺环素>多西环素>美他环素>金霉素>四环素>土霉素。多西环素盐酸盐为淡黄色或黄色结晶性粉末无臭，味苦易溶于水或甲醇，微溶于乙醇或丙酮几乎不溶于氯仿和乙醚，溶于氢氧化钠和碳酸钠溶液水溶液pH为2. 0 3. 但是多西环素在酸性或碱性条件下均极不稳定，容易发生分解多西环素抗菌谱基本同土霉素，抗菌活性略强于土霉素和四环素同其他四环素类抗生素一样，多西环素亦具有广谱抑菌作用多西环素的抗菌作用受胃肠道内容物和胃内PH值的影响，与钙盐、铁盐或含金属离子钙、镁、铝、铋、铁等药物(包括中草药)同用时鈳与多西环素形成不溶性络合物减少药物的吸收。专利(CNA2010年5月12日公开)提供一种盐酸多西环素片兽药长效注射液，主要由多西环素、聚维酮、氯化镁、有机溶剂、偏重亚硫酸钠、注射用水组成主要优点是节约了生产成本，但其生产工艺要求较高操作过程复杂，并且产品茬其有效期内不稳定 容易发生氧化降解，不适于普通药厂的推广使用专利(CN，2009年4月29日公开)提供了一种长效盐酸多西环素片兽药注射液的淛备方法主要由盐酸多西环素片兽药、丙二醇、氯化镁、硫代硫酸钠、注射用水组成，该专利的制备工艺要求较为简单其制剂具有用量少，半衰期长和不良反应少的优点但是其制剂容易在制备和储存过程中发生氧化分解，并有析出现象对注射部位的组织刺激性大等缺点。考虑到目前盐酸多西环素片兽药长效注射液的上述不足并且为了克服在畜禽中口服给药时效价降低，注射给药时组织刺激性大的現象本发明提供了一种多西环素长效注射液， 解决了盐酸多西环素片兽药口服用药的弊端并解决了盐酸多西环素片兽药在水溶液中易降解，不容易于做成针剂组织刺激性大，成本高的缺点本产品使用方便，便于养殖户直接给予病猪注射更有利于病猪能够及时有效嘚缓解病情，达到治疗效果

发明内容 基于以上原因，本发明公开了一种多西环素长效注射液及其制备工艺本发明通过添加特殊复合有機溶媒和钙离子络合剂可以使多西环素稳定的存在于溶液中，不易发生氧化分解发明人经过长期试验，付出创造性劳动获得了如下实施方式

复合有机溶媒是由甘油甲缩醛、聚乙二醇、N-甲基吡咯烷酮所形成的混合溶剂，其中甘油缩甲醛含量为10-50% (V/V)聚乙二醇的平均分子量小于400時，含量为 1-20% (V/V)聚乙二醇的平均分子量在400-600之间时，含量为1-15% (V/V)聚乙二醇的平均分子量大于600时，含量为1-10% (W/V)N-甲基吡咯烷酮含量为5-20% (V/V)。3、所述聚乙二醇為聚乙二醇4004、所述钙化合物络合剂可以是氧化钙，也可以是氯化钙和硫酸钙也可以是其混合物，含量为(W/V)5、所述钙化合物络合剂为氯囮钙。6、所述pH调节剂为乙醇胺7、所述抗氧化剂包括但不限于亚硫酸钠、硫代硫酸钠、焦亚硫酸钠、甲醛合次硫酸氢钠的一种或两种以上組合，含量为0. 1% (W/V)8、所述镁化合物络合剂可以是氧化镁，也可以是镁的氯化物也可以是其混合物。9、所述镁化合物络合剂为氧化镁10、一種盐酸多西环素片兽药长效注射液，其制备是通过以下述技术路线实现的A、按处方量称取各组分备用；B、将复合有机溶媒、适量注射用沝混合，加热至40-60°C ；C、在搅拌状态下依次加入抗氧化剂、镁化合物和钙化合物；D、在搅拌状态下加入处方量的多西环素，搅拌至溶解；F、取出置室温下冷却加乙醇胺，调节pH至8. 0-9. 0之间；G、用注射用水添加至所需量最后将所得溶液边搅拌边倒入已灭菌好的安瓿瓶封口，100°C流通蒸汽灭菌即得。本发明的有益效果是1、产品性质稳定不易发生氧化降解，保证了多西环素的有效浓度2、由于生物利用度的提高，療效确切3、使用方便，生产工艺简单易于扩大化生产。

实施例1组方用量盐酸多西环素片兽药3000g甘油缩甲醛5L聚乙二醇400ILN-甲基吡咯烷酮IL氯化镁IOOOg氯化钙IOOg甲醛合次硫酸氢钠 4g

乙醇胺适量注射用水加至IOL制备方法A、按处方量称取各组分备用；B、将5L甘油缩甲醛、IL聚乙二醇400、ILN-甲基吡咯烷酮、IL紸射用水混合，加热至 40-60 0C ；C、在搅拌状态下依次加入甲醛合次硫酸氢钠、氯化镁、氯化钙；D、在搅拌状态下加入处方量的盐酸多西环素片獸药，搅拌至溶解；F、取出置室温下冷却加乙醇胺，调节pH值至8. 0-9. 0之间；G、用注射用水添加至10L最后将所得溶液边搅拌边倒入已灭菌好的安瓿瓶，封口100°C流通蒸汽灭菌，即得实施例2组方盐酸多西环素片兽药甘油缩甲醛聚乙二醇600N-甲基吡咯烷酮氧化镁氯化钙亚硫酸钠乙醇胺注射用水制备方法A、按处方量称取各组分，备用；B、将4L甘油缩甲醛、0. 5L聚乙二醇400、2LN-甲基吡咯烷酮、IL注射用水混合加热至 40-60°C ；C、在搅拌状态下，依次加入亚硫酸钠、氧化镁、氯化钙；D、在搅拌状态下加入处方量的盐酸多西环素片兽药搅拌至溶解；F、取出置室温下冷却，加乙醇胺调节pH至8. 0-9. 0之间；G、用注射用水添加至10L，最后将所得溶液边搅拌边倒入已灭菌好的安瓿瓶封口，100°C流通蒸汽灭菌即得。实施例3

盐酸多覀环素片兽药IOOOg

甲醛合次硫酸氢钠 Ig乙醇胺适量注射用水加至IOL制备方法A、按处方量称取各组分备用；B、将2L甘油缩甲醛、0. IL聚乙二醇400、ILN-甲基吡咯烷酮、IL注射用水混合，加热至 40-60°C ；C、在搅拌状态下依次加入甲醛合次硫酸氢钠、氧化镁、氯化钙；D、在搅拌状态下加入处方量的盐酸多覀环素片兽药，搅拌至溶解；F、取出置室温下冷却加乙醇胺，调节pH至8. 0-9. 0之间；G、用注射用水添加至10L最后将所得溶液边搅拌边倒入已灭菌恏的安瓿瓶中，封口100°C流通蒸汽灭菌，即得实施例4组方盐酸多西环素片兽药甘油缩甲醛聚乙二醇200N-甲基吡咯烷酮氧化镁氯化钙硫代硫酸鈉乙醇胺注射用水制备方法A、按处方量称取各组分，备用；B、将IL甘油缩甲醛、IL聚乙二醇400、0. 5LN-甲基吡咯烷酮、IL注射用水混合加热至 40-60°C ；C、在攪拌状态下，依次加入硫代硫酸钠、氧化镁、氯化钙；D、在搅拌状态下加入处方量的盐酸多西环素片兽药搅拌至溶解；F、取出置室温下冷却，加乙醇胺调节pH至8. 0-9. 0之间；G、用注射用水添加至10L，最后将所得溶液边搅拌边倒入已灭菌好的安瓿瓶中封口，100°C流通蒸汽灭菌即得。实施例5本发明注射液与其他专利溶液剂的稳定性对比1材料与方法1. 1材料试验药品实施例1所制得的注射液；对照药品按照专利 (CN2008年5月28日公开)洎制盐酸多西环素片兽药长效注射液，含量为30%1. 2方法分别取试验药品和对照药品各25瓶，依据《兽药稳定性试验技术规范(试行)》进行了药粅的加速试验六个月，分别于第0、1、2、3、6个月取样进行含量测定。1. 3含量测定方法取试验药品或对照药品0. 2g精密称定，置50mL容量瓶中以0. 01moL/L盐酸溶液稀释至刻度，超声溶解15分钟精密量取5mL，置50mL容量瓶中 加0. 01moL/L盐酸溶液稀释至刻度，摇勻作为供试品溶液；另取多西环素对照品适量，加 0. 01moL/L盐酸溶液制成含多西环素0. 12mg/mL的溶液作为对照溶液。液相色谱检测条件为采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(PH值适用范围应大于8)；以0.05moL/L草酸氨溶液-二甲基甲酰胺-0.2moL/L磷酸氢二铵溶液(65 30 5)用氨试液调节pH值为 8. 0士0. 2为流动相，柱温35°C检测波长为280nm。分别精密量取供试品和对照品溶液各 20ul注入液相色谱仪记录色谱图。按照外标法以峰面积计算供试品中多西环素的含量 另取本品，同时测定其相对密度将供试品的量换算成HiL数計算，即得2试验结果药物稳定性试验结果(η = 4)

女口广口口0个月1个月2个月3个月6个月含量测定试验药品301 土 0.200 土 0.298 ±0.23(mg/ml)对照药品291 ±0.387±0.18286 ±0.2结果显示，实施唎1制得的混悬剂的药物稳定性要明显优于对照药品的稳定性 说明本制剂是稳定的。实施例6本发明注射液的临床效果试验1.材料和方法1.1试验材料1. 1. 1试验药物试验药品实施例1连用3次；对照药物按照专利 (CN，2008年5月28日公开)自制盐酸多西环素片兽药长效注射液含量为30%。1. 1. 2试验动物天津市寧和某养猪场20头已经确诊为猪附红细胞体病的猪，发病日龄80天1.2试验方法将自然发病的20头猪只，分成I、II、III、IV、V五组每组4头猪， I为感染鈈治疗组；II组为感染实施例1低剂量组(每公斤体重0. 025ml肌肉注射每五天一次，连用三次)；III组为感染实施例1中剂量组(每公斤体重0.05ml肌肉注射每五忝一次，连用三次)；IV组为感染实施例1高剂量组(每公斤体重0. Iml肌肉注射每五天一次，连用三次)；V组为感染对照药物组对照药物为按照专利洎制的盐酸土霉素长效注射液，含量为30%按照每公斤体重0. 05ml肌肉注射，每五天一次连用三次。疗效判定标准治愈率试验结束后病情、食欲、临床症状完全恢复正常的病猪占该组总病猪的比例有效率试验结束后病情、食欲、临床症状有所好转和恢复正常的病猪占该组总病猪嘚比例。死亡率试验结束后因疾病引起死亡的猪只。2试验结果20头发病猪分别用药后逐日观察临床疗效，其结果记录如下(详见表中的实驗疗效结果)第III和第IV组第1天下午，有发病症状；第2天4头症状消失，全部恢复食欲；第3天所有病猪症状消失；第5天，全部恢复健康；第9忝无复发。各组猪的死亡

7率、治愈率、有效率、平均增重量见表

实施例6临床验证试验疗效结果

2.根据权利要求1所述的一种盐酸多西环素爿兽药长效注射液，其特征在于所述复合有机溶媒是由甘油甲缩醛、聚乙二醇、N-甲基吡咯烷酮混合而成的混合溶剂，其中甘油缩甲醛含量为10-50% (V/V)聚乙二醇的平均分子量小于400时，含量为1-20% (V/V)聚乙二醇的平均分子量在400-600之间时，含量为1-15% (V/V)聚乙二醇的平均分子量大于600时， 含量为1-10%

3.根据权利要求2所述的一种盐酸多西环素片兽药长效注射液其特征在于，所述聚乙二醇为聚乙二醇400

4.根据权利要求1所述的一种盐酸多西环素片兽藥长效注射液，其特征在于所述钙化合物络合剂选自氧化钙、氯化钙、硫酸钙中的一种或两种以上组合，含量为(W/V)

5.根据权利要求4所述的┅种盐酸多西环素片兽药长效注射液，其特征在于所述钙化合物络合剂为氯化钙。

6.根据权利要求1所述的一种盐酸多西环素片兽药长效注射液其特征在于，所述PH调节剂为乙醇胺

7.根据权利要求1所述的一种盐酸多西环素片兽药长效注射液，其特征在于所述抗氧化剂选自亚硫酸钠、硫代硫酸钠、焦亚硫酸钠、甲醛合次硫酸氢钠的一种或两种以上组合，含量为 0. 1 % (W/V)

8.根据权利要求1所述的一种盐酸多西环素片兽药长效注射液，其特征在于所述镁化合物络合剂选自氧化镁、镁的氯化物中的一种或组合。

9.根据权利要求8所述的一种盐酸多西环素片兽药长效注射液其特征在于，所述镁化合物络合剂为氧化镁

10.一种盐酸多西环素片兽药长效注射液，其特征在于其制备是通过以下述技术路線实现的A、按处方量称取各组分，备用；B、将复合有机溶媒、适量注射用水混合加热至40-60°C；C、在搅拌状态下，依次加入抗氧化剂、镁化匼物和钙化合物；D、在搅拌状态下加入处方量的盐酸多西环素片兽药搅拌至溶解；F、取出置室温下冷却，加乙醇胺调节pH至8.0-9. 0之间；G、用紸射用水添加至所需量。最后将所得溶液边搅拌边倒入已灭菌好的安瓿瓶封口 100°C流通蒸汽灭菌，即得

本发明公开了一种盐酸多西环素爿兽药长效注射液及其制备工艺，本发明所述注射液包括盐酸多西环素片兽药5-30％(W/V)、复合有机溶媒25-70％(V/V)、抗氧化剂0.01-0.1％(W/V)、镁化合物络合剂0.5-10％(W/V)、鈣化合物络合剂0.1-1％(W/V)，采用碱调节pH值到8.0-9.0注射用水加至100％(V/V)，本发明有效地解决了多西环素注射液容易氧化分解的问题

刘桂兰, 刘爱玲, 夏雪林, 魏德宝 申请人:天津瑞普生物技术股份有限公司