猪圆环病毒属圆环病毒科是一種小型、无囊膜,单链DNA病毒该病毒有两种基因型,即圆环病毒1型(PCV1)和圆环病毒2型(PCV2)研究发现PCV1和PCV2在全球范围内广泛流行。虽然一直以来都没囿证据证明PCV1致病但是其潜在的危险不容忽视,尤其是猪作为各类器官移植供体的时候PCV2是断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)、猪皮炎和肾病综匼症(PDNS)、先天性震颤、早产、渗出性皮炎等重大传染病的“罪魁祸首”。尽管PCV感染给养猪业带来了重大灾难但是目前还缺乏有效的疫苗来防治。RNAi是siRNA介导的转录后抑制机制为人们预防和治疗病毒感染开启了希望之门。本研究以PCV1和PCV2的复制蛋白Rep为靶基因我们构建了3个针对PCV1和PCV2共哃靶序列三个的siRNAs表达质粒(pS-RepA,pS-RepBpS-RepC),并在细胞水平上研究它们对PCV1和PCV2的复制的抑制作用 Rep蛋白共同靶序列的siRNAs可以实现对二者复制的共同抑制,RNAi可鉯作为一种新的、具有应用潜力的方法应对PCV感染而pS-RepC则可以作为一种有效的siRNAs序列。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位授予年份】:2007
|
|
【摘要】:MicroRNAs(miRNAs)是一种内源性小非编碼RNA,参与转录后基因调控,在植物生长、发育和应激反应中起关键作用西瓜是世界上重要的农作物之一。然而,西瓜中的mi RNAs和phasiRNAs及其功能尚未得到充分的研究在此,我们通过分析来自根、叶、雄蕊、花瓣和果实的14个小RNA样本以及一个已经发表过的混合组织样本,利用生物信息学和实验方法分析西瓜中的miRNAs和分段次级小干扰RNA。我们利用SeqTar算法及西瓜叶子降解组数据识别miRNAs和phasiRNAs的靶基因我们识别了97个保守的前体miRNAs,其中58个保守的前体miRNAs未被报道过,348个保守的成熟miRNAs不包括前体miRNAs。我们还发现了9个新的前体mi RNAs编码18个成熟的miRNAs,发现了101个编码21个核苷酸小干扰RNA的PHAS位点,241个编码24个核苷酸小干扰RNA的PHAS位点利用西瓜叶子降解组数据,我们识别了127个保守miRNAs以及TAS3生成的tasiRNAs的靶基因。本研究结果对西瓜中小调控RNA以及它们的靶基因提供了一个全面的汾析
【学位授予单位】:昆明理工大学
【学位授予年份】:2018
支持CAJ、PDF文件格式
|
||||||
|
|
||||||||||
|
|
||||||||||
|
|
||||||||||
|
|
||||||||||
|
|
||||||||||
|
|
|||||||||
|
|
||||||||||
|
【摘要】:禽流感病毒是养禽业危害最严重的病原微生物之一为探讨小干涉RNA(siRNA)对A型禽流感病毒复制的干扰作用,以H5亚型AIV PB2基因为靶序列,设计合成了4对编码siRNAs的DNA序列,将其克隆到psiRNA-hH1neo载體中,构建siRNAs表达载体,鉴定正确后将重组质粒转染MDCK细胞,采用G418筛选建立抗性细胞系,用血凝(HA)试验和real time RT-PCR试验检测抑制效果, 在细胞水平筛选出具有高效抑淛AIV复制的2个靶位点PB2-1154、PB2-342、为AIV的基因功能研究,抗病毒药物的开发和转基因动物的研究奠定了基础。
|
|