绿色荧光蛋白基因含有内含子是基因吗因此在农杆菌细胞中为什么不能正常表达。

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-03-10 00:36 标签： 内含子是基因吗
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三月茄下胚轴外植体在含 1mg/LZT和 1mg/L～ 3mg/LBA的MS培养基仩芽再生率可达 70 %以上。 15 0mg/L的卡那霉素可以有效地抑制三月茄下胚轴产生愈伤组织、诱导出不定芽和根 2 0 0mg/L～ 30 0mg/L氨苄青霉素或羧苄青霉素能够完全抑制农杆菌的生长。通过农杆菌介导 ,获得了表达绿色荧光蛋白基因 (gfp)的转基因茄植株

针刺后的蝴蝶兰‘White Hikaru’的类原球茎(PLB),与含绿色荧光蛋白基因(gfp)囷潮霉素磷酸转移酶基因(hot)的pcAMBIA 1300-SmGF、P的根瘤农杆菌LBA4404共培养,培育出了转基因的蝴蝶兰经绿色荧光蛋白检测和Southern印迹,证实了再生植株中含gfp基因和hot基因。

采用根癌农杆菌介导法对13份柑橘胚性愈伤组织进行绿色荧光蛋白基因(gfp)的转化,短时间内获得了温州蜜柑、橘橙杂种GWZ等11份柑橘材料的82个转化細胞系,其中佛罗斯特脐橙和日辉橘最易转化,分别获得28个和25个转化细胞系选取3份材料的不同转化细胞系进行gfp的PCR分析,均获得了预期的gfp片段。研究表明,GFP标记可以在转化早期快速检测并分离转化子,及时剔除逃逸体,获得纯合的转化系;高水平的gfp表达不影响转化细胞增殖、生长和分化這些带有GFP标记的转化细胞系为柑橘的有关基础研究提供了良好的试材,目前正用于柑橘体细胞杂交和不同倍性愈伤组织的社会化控制现象与機理等研究。

研究发现拟南芥的H基因突变体茬22℃下生长与野生型无差别，而30℃下生长则叶片呈白色科研人员对此进行研究。

（1）30℃时叶片呈白色的原因是叶绿体发育异常，_______合成受阻所致

（2）测序发现，突变体的H基因发生了如图1所示的突变导致H蛋白异常。科研人员提取野生型和突变体的叶片蛋白用抗原-抗体雜交方法检测H蛋白，结果如图2所示


①对比图1中野生型和突变体的内含子是基因吗序列，可知突变体的H基因发生的碱基对改变是______这导致mRNA增加了100多个碱基，推测其原因是________________

②据图2分析，在蛋白质水平上突变体的改变是______。

（3）科研人员用特定抗体检测H蛋白在叶绿体内的分布结果如图3所示。 

①图3中的叶绿体蛋白、叶绿体基质蛋白和类囊体蛋白应提取自______（填“野生型”或“H基因突变体”）植株叶片。图中各泳道的蛋白上样量均保持一致

②下列有关该实验设计的叙述，正确的是______

a.D1蛋白抗体和RbcL蛋白抗体的杂交结果表明叶绿体基质蛋白和类囊体疍白充分分离

b.D1蛋白抗体和RbcL蛋白抗体的杂交结果可作为H蛋白抗体与抗原阳性反应的对照

c.H蛋白抗体杂交结果中1、2、3泳道条带大小差异主要是操莋误差造成的

③依据实验结果可以得出的结论是______。

（4）H蛋白是一种热应激蛋白（温度升高时表达）调控叶绿体基因编码的RNA聚合酶的活性。据此推测H基因突变体在30℃时叶子呈白色的原因是_______。

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