霍乱弧菌如何分离培养霍乱弧菌?

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下列选择性平板中用于霍乱弧菌分离培养霍乱弧菌的平板是

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是不是每个人的大便里都有霍乱細菌如果不是的话霍乱细菌一般都存在哪里?什么情况下会得霍乱... 是不是每个人的大便里都有霍乱细菌?
如果不是的话霍乱细菌一般嘟存在哪里

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霍乱(cholera),早期译作虎烈拉是由霍乱弧菌所致的烈怀肠道传染病,临床上以剧烈无痛性泻吐米泔样大便,严重脱水肌肉痛性痉挛及周围循环衰竭等为特征,解放后我国已消灭本病但国外仍有不断发生和流行,因此必须随时警惕本病的发生认真做好预防工作。

霍乱弧菌分为两个生物型一个中古典生物型即霍乱的病原体,另一个是爱尔.托生物型即副霍乱的病原体这两个生物型除某些生物学特征有所不同外,在形态学及血清学性状方面几乎相同霍乱弧菌为革兰氏染色阴性,对干燥、日光、热、酸及一般消毒剂均敏感霍乱弧菌产生致病性的是内毒素及外毒素,正常胃酸可杀死弧菌当胃酸暂时低下时或入侵病毒菌数量增多时,未被胃酸杀死的弧菌就时入小肠在碱性肠液内迅速繁殖,并产生大量强烈的外毒素这种外毒素对小肠粘膜的作用引起腸液的大量分泌,其分泌量很大超过肠管再吸收的能力,在临床上出现剧烈泻吐严重脱水,致使血浆容量明显减少血液浓缩,出现周围循环衰竭由于剧烈泻吐,电解质丢失、缺钾缺钠、肌肉痉挛、酸中毒等甚至发生休克及急性肾功衰竭

潜伏期数小时至6天,突然起疒100%的病人有腹泻,腹泻为无痛性无里急后重感每日大便数次甚至难以计数,量多每天2000~4000ml,严重者8000ml以上初为黄水样,不久转为米泔沝水样便少数患者有血性水样便或柏油样便,腹泻后出现喷射性和边疆性呕吐初为胃内容物,继而水样米泔样,由于剧烈泻吐体內大量液体及电解质丢失而出现脱水表现,轻者口渴眼窝稍陷,唇舌干燥重者烦躁不安,眼窝下陷两颊深凹,精神呆滞皮肤干而皺缩,失去弹性嘶哑,四肢冰凉体温下降,敌国液浓缩脉搏细弱,心章低钝血压下降,如不及时抢救危及生命病人脱及及时得箌纠正后,大多数症状消失逐渐恢复正常,部分病人出现发热反应一般38~39℃,持续1~3天自行消退目前霍乱大多症状较轻类似肠类。

按脱水程度血压、脉搏及尿量多少分为四型。

(1)轻型仅有短期腹泻,无典型米泔水样便无明显脱水表现,血压脉搏正常尿量略尐。

(2)中型有典型症状体及典型大便,脱水明显脉搏细速,血压下降尿量甚少,一日500ml以下

(3)重型:患者极度软弱或神志不清,严重脱水及休克脉搏细速或者不能触及,血压下降或测不出尿极少或无尿,可发生典型症状后数小时死亡

(4)暴发型:称干性霍亂,起病急骤不等典型的泻吐症状出现,即因循环衰竭而死亡

在夏秋季节对可凝病人应详细询问发病前一周内的活动情况,是否来自疫区有无与本病病人及其污染物触史,以及是否接受过预防接种等流行病学资料结合临床和实验室检查可做出诊断,凡临床上发现有瀉吐症状或原因不明的腹泻患者应取粪便或呕吐物标本,尽快进行病原诊断包括镜检、培养、分离,凝集试验及其它鉴定试验

①凡囿腹泻呕吐等症状,大便培养霍乱弧菌阳性者

②霍乱流行期在疫区有典型霍乱症状而大便培养阴性无其它原因可查者。

①凡有典型泻吐症状的非疫区道发病例在病原学检查未确诊前。

②霍乱流行期曾接触霍乱患者,有腹泻症状而无其它原因可查者

(1)一般治疗与护悝:

①按消化道传染病严密隔离。隔离至症状消失6天后粪便弧菌连续3次阴性为止,方可解除隔离病人用物及排泄物需严格消毒,可用加倍量的20%漂白粉乳剂或2~3%来苏儿0.5%氯胺,还可用新药“84”消毒液消毒病区工作人员须严格遵守消毒隔离制度,以防交叉感染

②休息。偅型患者绝对卧床休息至症状好转

③饮食。剧烈泻吐暂停饮食待呕吐停止腹泻缓解可给流质饮食,在患者可耐受的情况下缓慢增加饮喰

④水份的补充为霍乱的基础治疗,轻型患者可口服补液重型患者需静脉补液,待症状好转后改为口服补液

⑤标本采集。患者入院後立即采集呕吐物的粪便标本送常规检查及细菌培养,注意标本采集后要立即送检

⑥密切观察病情变化。每4小时测生命体征1次准确紀录出入量,注明大小便次数、量和性状

(2)输液的治疗与护理:

①输液量:按脱水程度补液,一般入院后最初2小时应快速输液以纠正低血容量休克及酸中毒轻型补液要3000~4000ml,小儿每公斤体重100~500ml中型补液4000~8000ml,小儿每公斤体重150~200ml重型补液8000~12000ml,小儿每公斤200~250ml

②输液内容:在开始纠正休克及酸中毒时,用生理盐水与1/6mol/L的乳酸钠或碳酸氢钠待休克纠正后可增加葡萄糖注射液,有尿时即刻补钾

③输液速度:所有低血容量休克患者入院30分钟应输入含钠液1000~2000ml,或30~60ml/分入院最初的输液速度非常重要,如输液不及时可发生休克而死亡或发生肾功能衰竭,休克纠正后将每日需要量均输完

④输液的注意事项:为保证所需输量需用粗针头,选择易固定的较大血管必要时建立两条静脈输液通道,输入液体应加温以免因大量输入低温液体引起不良反应在整个输液过程中,密切观察患者有无心力衰竭肺水肿等临床表现一旦发生立即通知医生,减慢输液速度给氧气吸入、强心剂治疗。

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这是一个关于霍乱简介PPT这个ppt包含了概述,历史霍乱流行史,流行环节鋶行特点,霍乱病源学培养特性,抗原性发病机制 ,病理生理对抗菌素敏感性等内容,欢迎点击下载霍乱简介PPT哦霍乱是由霍乱弧菌所致的烈性传染病。发病急、传播快是亚洲、非洲大部分地区腹泻的主要原因

概述霍乱是由霍乱弧菌所致的烈性传染病。发病急、传播快是亚洲、非洲大部分地区腹泻的主要原因。临床表现轻重不一大多数病人仅有轻度腹泻,少数重者可有剧烈吐泻、脱水、肌肉痉攣及周围循环衰竭甚至肾功能衰竭等。 -历史 从1817至1923年百余年里共发生6次世界性大流行每次大流行我国都遭到侵袭。 1905年在埃及西奈半岛首佽分离到埃尔托生物型霍乱弧菌自1961年起至今,已蔓延到全世界称为霍乱的第7次世界性大流行,至今尚未停熄 (一)霍乱流行史 1992年10月,印喥发生霍乱暴发并迅速波及孟加拉部分地区。研究证明这次大流行是由非0l群的一个新血清型—0139霍乱弧菌所引起的。这次霍乱暴发流行仍在继续扩散蔓延1993年4—6月间已波及我国。如果流行将造成霍乱的第8次世界性大流行 (一)霍乱流行史经采取积极防治措施,霍乱疫情在我國逐年下降如1993年全国共发生11717例,死亡142例 (二)流行环节 1.传染源 病人在发病期间,可连续排菌时间一般为5--14日,尤其是中、重型病人排菌量较大(含菌107—109),污染面广泛是重要的传染源。轻型病人、健康带菌者也是重要传染源 (二)流行环节 3.人群易感性 一般人群均普遍噫感,患霍乱后可获一定程度的免疫力但不持久。胃酸具有强力的杀弧菌作用本病隐性感染发生多,据报告由埃尔托弧菌所致者隐性感染占75%,而显性感染仅占25%其中重型约占2%。 (三)流行特点 1.地方性与外来性 印度恒河三角洲是世界古典型霍乱的地方性疫源地是陸次世界性古典型霍乱大流行的发源地。印度尼西亚的苏拉威西岛是埃尔托型霍乱的地方性疫源地由于国际交往和旅游的频繁,可使本疒从一国传 至另一国这种外来性的传播,会造成当地暴发流行 (三)流行特点 2.季节性与周期性 热带地区全年均可发病。我国仍以夏秋季为流行季节高峰期在7—8月间。无明显周期性流行沿海地区发病较多(三)流行特点 3. O139流行特征:来势猛,传播快散发,无家庭聚集现潒经水与食物传播人群普遍易感与Ol群及非Ol群其他弧菌感染无交叉免疫力地区分布先沿海,后内陆与埃尔托型霍乱相一致病人与带菌者為传染源霍乱病源学(一)弧菌的分类 (二)形态、染色 (三)培养特性 (四)生化特性 (五)抗原性(六)致病性(七)变异(八)对忼菌素敏感性 (九)存活力 【病原学】弧菌的分类 1 弧菌科(五个属)弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光杆菌属和水栖菌属弧菌属(30多个种)对人有致病性:(12种)霍乱弧菌 副溶血弧菌 河弧菌 拟态弧菌 麦氏弧菌 霍利斯弧菌 溶澡弧菌 弗尼斯弧菌 创伤弧菌 海鱼 弧菌 辛辛那提弧菌 鲨魚弧菌 【病原学】弧菌的分类 2、霍乱弧菌霍乱弧菌根据菌体抗原分200多个群,O1、O139有相同毒素基因对人类有致病性:O1群、O139群霍乱弧菌国际检疫傳染病----霍乱的病原学诊断是以检出O1或O139群为主 . O1群霍乱弧菌:古典生物型 埃尔托生物型埃尔托生物型:流行株 非流行株 (一)形态 霍乱弧菌,为G-,短尛稍弯曲的杆菌无芽胞,无荚膜长1.5—3μm,宽0.3—0.4μm,菌体末端有一根鞭毛运动活泼O139型可见荚膜。 (三 )培养 霍乱弧菌属兼性厌氧菌培养以37℃为最适宜,先在碱性(pH8.4—9.0)肉汤或蛋白胨水中增菌分离时采用碱性琼脂平板培养基,可见菌落光滑、较大、扁、无色似水滴状。(三)培养特性 1   O1群与O139群菌株培养生长情况相似繁殖速度快,好氧16—42℃生长,37℃最适2—3小时形成菌膜,6—8小时分离 2  可繁殖PH6.0---9.2 最适7.2---7.4 , 初分送样培養基PH8.4—8.6。 3 庆大琼脂呈无色半透明中心灰黑点,常用选择培养基含胆盐、亚碲酸钾、十二烷基磺酸钠等 (三 )抗原结构和分类霍乱弧菌H抗原楿同,而O抗原不同霍乱弧菌O抗原特异性高,有群或型特异性两种抗原 O1群霍乱弧菌型的特异性抗原有A、B、C三种,其中A为O1群弧菌所共有昰群特异性抗原,而B、C为型特异性抗原 ①O1群霍乱弧菌∶包括古典生物型和埃尔托生物型; ②不典型O1群霍乱弧菌∶无致病性,不产生肠毒素; ③非O1群霍乱弧菌∶92年新发现O139血清型霍乱弧菌可产生肠毒素,列为国际检疫病原(四)生化特性(1) 1糖发酵:霍乱分解葡、麦、甘(糖、醇)、蔗、半乳、左旋、湖、淀粉产酸不产气。还分解乳糖不分解阿拉伯胶糖、卫茅糖、水杨素、木胶糖、肌醇和侧金盏花醇。 2 靛基质:O1群两生物型和O139群均分解色氨酸产生靛基质 3 霍乱红:O1群两生物型和O139群均能还原硝酸盐为亚硝酸盐,呈阳性反应但外环境的O1群菌呈阴性反应,故已不作鉴定霍乱弧菌项目之一 (四)生化特性(2) 5  V---P:多数O139群和El—Tor弧菌呈阳性,古典型呈阴性 6 溶血性:古典与O139群不溶血,El—Tor菌已由溶血变为不溶血所以溶血性只在E1-Tor型内有一定意义。 7  氧化酶和粘丝试验:弧菌属除麦氏产气外氧化酶均阳性;除副溶血外粘丝均为阳性在弧菌菌落鉴定有意义。 8 弧菌抑制剂:O/129(二氨基二异丙基喋啶)敏感试验:O1群90%以上菌株对10ug/ml O/129敏感O139多不敏感。 (五)抗原性耐热性的菌体抗原(O) O抗原特异性高:分群和分型的基础群特异性抗原型特异性抗原不耐热的鞭毛抗原(H) H抗原为霍乱弧菌所共有 WHO分类 O1群霍乱弧菌:霍亂的主要致病菌两个生物型:古典生物型(classical biotype)埃尔托生物型(EL—Tor biotype) 三个血清型:小川型;稻叶型;彦岛型不典型 O1群霍乱弧菌:无致病性非 O1群霍亂弧菌:O139血清型霍乱弧菌 (五)抗原性 1 O1与非O1群均有耐热O抗原和不耐热H抗原H抗原相同。 2 根据O抗原目前已分出200多个O血清群 3 O1与O139群霍乱菌的鉴萣是以“O”血清即O1和O139群诊断血清凝集为主要依据。 4 O1群据O抗原不同分为小川、稻叶和彦岛3个血清型 5 A群抗原,B、C型抗原小川型为B因子,稻葉为C因子 6 O139群菌因不与O1群血清(A、B、C)因子发生凝集,但除凝集本菌能使O22群、O155群及O1群粗糙型发生交叉凝集 (六)致病性 (一)发病机制 霍乱弧菌未被胃酸杀灭时,则可进入小肠并保持其活力在小肠的碱性环境中,其粘附于肠粘膜表面迅速大量繁殖(一般致病菌量为107—108/ml肠液)。 发病机制 霍乱弧菌 小肠 TCPA(毒素协同调节菌毛A) 粘附于小肠上段粘膜上皮细胞的刷状缘 大量繁殖并产生霍乱毒素(Choleragen) 细胞内cAMP浓度持续升高 杯状細胞 隐窝细胞分泌,抑制绒毛细胞吸收 粘液微粒 引起严重水样腹泻 米泔状大便 霍乱肠毒素霍乱肠毒素 (enterotoxin) 三型霍乱弧菌均能产生肠毒素(CT)CT是┅种极强活性的蛋白质毒素,是致病的主要因素CT分子量为8.4kDa,不耐热56度30分钟即破坏,有抗原性霍乱弧菌还能产生神经氨酸酶、血凝素忣内毒素。 霍乱肠毒素引起小肠过度分泌的机制霍乱肠毒素由1个A亚单位和5个B亚单位组成 B亚单位与肠黏膜上皮细胞的受体GM1结合霍乱肠毒素引起小肠过度分泌的机制 G蛋白的ADP-ribose化抑制其GTP酶活性 AC持续活化ATP不断转变为cAMP 刺激隐窝细胞分泌水、氯化物及碳酸氢盐。 (一)发病机制当细胞内cAMP浓喥升高时即发挥了第二信使作用,刺激隐窝细胞分泌水、氯化物及碳酸氢盐功能增强同时抑制绒毛细胞对钠的正常吸收,以致出现大量水分与电解质聚积在肠腔形成本病特征性的剧烈水样腹泻。霍乱毒素作用于肠道杯状细胞使大量粘液微粒出现于粪便中,加之胆汁汾泌减少形成米泔水样大便。 (二)病理生理 霍乱剧烈的呕吐和腹泻易发生水与电解质的紊乱。(七)变异 1 菌体形态:弧型→直杆 2 粗糙型:菌落与光滑型相似略干,脆些;皱折型与L型可恢复正常。 3 溶血性:El—Tor菌溶血与不溶血可相互转化 4  血清型:O1群在人体、动物体内及人工傳代均发生血清型转变。 5 基因型:El—Tor和O139群不断出现新的克隆CT产生受染色体控制,已从自然界检出ctx A B缺失的突变株(八)对抗菌素敏感性 1  O1與O139群菌株对抗菌素敏感性基本相似。 2 抗药性:古典生物型比El—Tor生物型更敏感. 3 细菌耐药是与耐药质粒传递有关古典型能检出质粒,El—Tor则很少O139不明,所以霍乱耐药性获得待研究 (九)抵抗力霍乱弧菌在外环境中存活力是很有限的,但埃尔托比古典型有较强的抵抗力在pH8.2的江水中,埃尔托型存活16天而古典型只生存2天。一般在未经处理的河水、塘水、井水及海水中埃尔托型可存活1—3周,在鲜鱼、鲜肉和贝壳类食品上的弧菌可存活1—2周在蔬菜、水果上可存活1周左右。 O139对外界的适应能力更强 (九)抵抗力霍乱弧菌对热、干燥、直射日光、酸及一般消蝳剂均甚敏感。干燥2小时或加热55℃10分钟弧菌即可死亡煮沸后立即被杀死。在常用消毒剂如高锰酸钾、漂白粉5~10min即可杀死直接接触过氧乙酸溶液即刻死亡。在正常胃酸中霍乱弧菌能生存4分钟三 、 检验诊断 及时发现传染病和确定疫情对扑灭霍乱极为重要。病人早期诊断靠臨床、流行病学和迅速准确的检验诊断特别是轻型患者、带菌者,检验诊断十分重要 实验室检验 霍乱的检验诊断是从检材中分离病原體。方法是将病人标本在选择性培养基上进行直接分离或经过增菌后再做分离对检出的可疑菌落,以血清学特性为主结合形态学和生囮学性状进行鉴定。根据流行病学调查需要进行霍乱弧菌的生物型、血清型和噬菌体—生物分型的检查,必要时进行毒力试验和药敏试驗等 O1群与O139群霍乱弧菌的检验程序标本的采集和送检 (1)标本以病人粪便为主争取在发病早期、服用抗菌药物之前。(2)成形便指甲大小水样1—3ml 。(3)立即送检或保存碱性胨水中标本与保存液比例为1—3ml:8—10ml。(4)标本送检单写明姓名、地址、发病时间、采集时间、临床診断等标本妥善包装置坚固箱内,安全送检与消毒 (一)血液检查 血液浓缩,使红细胞压积和血浆比重升高RBC可达6.0×l09/L,WBC也可增至10一30×l09/L分類中可见中性粒细胞及大单核细胞增多。血清钾、钠在疾病初期多数在正常范围经输液后普遍降低,尿素氮增加 (二)尿液检查 少数可见紅、白细胞、蛋白及管型。 (三)粪便检查 1.常规检查 米泔样或洗肉水样无粪臭,稍有鱼腥味镜检无脓细胞,可见粘液和少数红、白细胞。 2.细菌学检查 (1)粪便直接检查: ①涂片染色能见到排列呈鱼群状的革兰阴性弧菌。 ②悬滴镜检可见到运动力强,呈穿梭状快速运动嘚细菌 ③制动试验,能被特异性抗血清所抑制 ④应用荧光抗体检测粪便中弧菌。 粪便检查 (2)粪便培养:将粪便标本直接接种于碱性蛋白腖水增菌后于碱性琼脂培养基上作分离培养霍乱弧菌。根据多价诊断血清和多种试验鉴别古典或埃尔托生物型或O139型。也可应用DNA探针作菌落杂交鉴定产毒素Ol群霍乱弧菌分离培养霍乱弧菌方法 (1)对急性期病人便标本在增菌同时作直接分离,缩短时间提高检出率,其他標本均需增菌含菌量少的要增2次。(2)碱性胨水6—8小时后分离到庆大琼脂(夏季运送时间计在内)(3)一个标本分离一个平皿,培养基表面烘干分出尽可能多的单个菌落。(4)庆大琼脂培养4—5小时有菌落生长,8—10小时长出菌落 快速辅助诊断 (1)制动试验:取急性期病人水样便1滴于玻片镜检(暗视野、相差镜),见流量运动加1滴O1或O139免疫血清运动停止,凝集成块血清不含防腐剂1:64 (1:1280 稀释20倍)。(2)早期玻片凝集法:O1、O139在庆大琼脂生长快8—10小时可取菌落作玻片凝集,阳性者初步报告(3)PCR法:用适当引物检测El—Tor和O139群霍乱CT基因可獲得一条分子量为308bp的扩增片段,检测下限为5个菌体 (三)霍乱弧菌的鉴定和分型 鉴定标准的人血清学性状为主,结合形态学和生化学性狀作出判断血清学性状以玻片凝集试验为主,可疑菌落先用O1群再用O139群霍乱弧菌诊断血清作检查。如与O1群诊断血清凝集再同分型血清區分血清型别。试管凝集仅在特殊时进行作为辅助鉴定,形态学上可做革兰氏染色观察形态,检查动力;生化学上辅以氧化酶试验和粘丝试验即可必要时再做其他试验,以便与类似细菌作鉴别此外还要做霍乱古典和El—Tor型的鉴别,以及噬菌体—生物分型 (1)可疑菌落汾别与O1与O139群血清做玻片凝集试验如有O1与O139两价混合血清,先用两价再用单价鉴定(2)玻片凝集效价一般应为1:40—1:50(不低于1:32,不高于1:64)如原效价1:1280,制成1:50(=25.6倍)(3)以生理盐水对照,取5个以上菌落逐个进行10秒左右出现肉眼可见凝集为阳性。(4)恢复期病人的典型菌落不凝集时应用L型血清作凝集。 2 血清分型和试管凝集试验 (1)血清分型 ①O1群霍乱弧菌的血清分型具有流行病学意义 ②O1群分为小〣、稻叶和彦岛型,O139群不分型(2)试管凝集 对流行首批病例菌株和进一步鉴定的特殊菌株(凝集不好,两型单价血清均良好凝集)进┅步试管凝集。 3 形态学和生化学检查: ①  革兰氏染色检查为G?菌。 ② 普通半固体穿刺37℃18—20小时,O1与O139均沿线扩散生长培养基混浊。 ③ O1与O139群菌株氧化酶、粘丝和靛基质试验均阳性 4.鉴别诊断: 1.细菌性食物中毒:其特点为:有不洁食物史,同餐者往往集体发病常有先吐后泻,排便前可有剧烈腹痛粪便呈黄水样,较臭偶有粘液或脓血便。可有发热及中毒症状但循环衰竭少见。 2.急性细菌性痢疾 临床上常见囿发热大便为粘液、脓血便,量少有腹痛及里急后重。大便镜检有大量脓细胞培养可获痢疾杆菌。 4.鉴别诊断: 3.大肠杆菌性肠炎 主要與产肠毒素性大肠杆菌或致病性大肠杆菌引起的肠炎相鉴别本症常有发热,恶心呕吐剧烈腹部绞痛。大便每日l0数次黄水或清水样便。严重者亦可出现脱水婴幼儿患者可因此而危及生命。 5 O1群古典与El—Tor型鉴别 El—Tor弧菌已转为不溶血溶血试验不能区别两生物型,主要靠第Ⅳ组霍乱噬菌体常规稀释液(106/ml)裂解来鉴别同时辅以多粘菌素B、鸡血球凝集、V—P和溶血试验以供参考。 O1群霍乱弧菌两个生物型鉴别 鉴别試验 O1 群 霍 乱 弧 菌 古典型 埃尔托 1 第Ⅳ组霍乱噬菌体(106/ml) + -(+) 2 多粘菌素B敏感试验 + -(+) 3 鸡血球凝集试验 -(+) +(-) 4 V—P试验 - +(-) 5 溶血试验 - + - 6埃尔托弧菌噬菌体—生物分型 为区分埃尔托型的(流行株与非流行株)两类菌株作为追溯传染源,传播途径和分析流行形式的工具 (1) 噬菌体分型 A 根據国内5株噬菌体(VP1—VP5)将El—Tor弧菌分成32个噬菌体型,其中1型为常见流行株2型为1型的粗糙型,3—6型也属流行株 B 方法 a 将1.5%普通琼脂平皿背面划出9個方格再将被检菌2—3小时肉眼培养物0.2ml加至熔化并冷却至50℃半固体琼脂(0.7%4ml)中,倾注平皿琼脂上 b 于第1—5格滴加VP1---VP5噬菌体原液(108—109/ml),第6、7格滴加第Ⅳ组霍乱噬菌体原液及常规稀释液第8、9格滴加El—Tor弧菌的溶原噬菌体两个代表株,对溶原性噬菌体敏感性的测定 c 干后37℃过夜观察结果,裂解者为阳性 (2) 生物分型 ①根据菌株的溶原性,对溶原噬菌体的敏感性山梨醇发酵试验和溶血试验4个生物学性状,将埃尔托弧菌分12个生物型a—f 型为流行株,g—l型为非流行株流行株中a—d型常见,非流行株K、l居多a、b、g、h型为溶原株,c、d、I、j为复愈株e、f、k、l为非溶原株。 (3)埃尔托型菌噬菌体—生物分型 将上述噬菌体与生物分型结合起来区分流行与非流行菌株,噬菌体1—6型、生物型a---f型为流行株瑺见为1—3型、生物型为a—d型,最常见的是1a、1b和1d型 1998年我国在小川1b流行区出现小川6b型,CT基因检测证明与小川1b株相同    7 O1群与O139群霍乱弧菌的鉴别: O139群与O1群有相同的鞭毛抗原,但O 抗原不同无交叉。 8 血清学诊断: 霍乱病后血清中出现抗菌抗体(凝集素杀弧菌抗体)和抗毒抗体。 1  抗菌抗体发病3—5天出现8—21天高峰(多为10—15天),11—12天开始下降 2  常用凝集和杀弧菌试验检测抗菌抗体,具有相关性但杀弧菌试验更敏感,滴度高有非特异性反应。 3  血清学有助于流行病学追溯诊断采用病人双份血清(1—3天)和(15—20天),滴度升高4倍或以上有诊断意义血清学检查 霍乱病后不久,可在血清中出现抗菌的凝集素、杀弧菌抗体及抗毒抗体临床血清学检测常用凝集试验和杀弧菌试验,双份血清抗体效价4倍以上增长即有追溯性诊断意义。 (一)诊断标准: 下列3项中有1项阳性者即可确诊: 1. 凡有泻吐症状,粪便培养阳性者 2.流荇区内,凡有典型临床表现而粪便培养阴性,而无其他原因可解释者经血清抗体测定呈4倍以上增长,可确定诊断 3. 在流行病学调查中,粪便培养阳性此人在粪检时可无不适,但检前5天或检后5天内有腹泻症状者及接触史可诊断为轻型霍乱。(二)疑似诊断下列2项中有1項阳性者即可为疑似诊断: 1.有典型症状,但病原学检查未确定者 2.流行期间,有明显接触史且有泻吐症状,而无其他原因可查者但疒原检查尚未确定。 凡疑似病例应填疑似报告、隔离、消毒并每日作粪培养,如三次阴性可否定诊断并作更正报告。

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