RNA在体内也像在体外一样,极易降解吗

(2016?焦作一模)人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL-2).该蛋白可增强机免疫功能但在内易被降解.研究人员将1L-2基因与人血清白蛋白(HAS)基因拼接成一个融合基因,並在酵母菌中表达获得具有1L-2生理功能、且不易降解的1L-2-HSA融合蛋白,其技术流程如图.请回答:

(1)图中③过程的模板是______.表达载1中的位点______應为限制酶Bg1Ⅱ的识别位点才能成功构建表达载2.

(2)表达载2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中与1L-2蛋白对应的碱基序列不能含有______,才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白.启动子是______识别和结合的部位有了它才能驱动基因转录出mRNA.

(3)培养人外周血单核细胞时,需要将温度控制在______℃此外还需要通入______(气).

(4)应用______技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白.

(5)如果基因表达载2导入的是优质奶牛的受精卵细胞,经胚胎培养后移入受母牛子宫内可以存活的生理学基础是______

母牛子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应

解:(1)PCR是在外条件下复制特定DNA片段的技术该过程需要引物、模板和特定的酶,因PCR产物是白细胞介素2(IL-2)故模板是含有目的基因(IL-2基因)的cDNA.目的基因IL-2cDNA和表达载1在构建表达载2时需先用限制酶切割让二者获得相同的黏性末端,然后在DNA连接酶的作用下重新组合.根据目的基因IL-2cDNA的两端的酶切位点分别是EcoRⅠ和BglⅡ所以表达载1也必须有这两个酶切位点,而表达载1上已有EcoRⅠ因此位点a应含有BglⅡ.

(2)融合基因转录出的mRNA中与IL-2蛋白对应的碱基序列中不能含有终止密码,才能成功表达出IL-2-HsA融合蛋白.否则HSA蛋白将无法合成.启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位有了它才能驱动基因转录出mRNA.

(3)動物细胞培养,所需要的条件是:95%空气和5%CO2气环境、适宜温度(37℃)和PH、无毒无菌的环境及合适的营养成分其培养基中通常需加入血清、血浆等一些天然成分.

(4)检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白可用抗原抗杂交技术.

(5)胚胎移植时发情期母牛子宫对外来胚胎基本上不发苼避免排异反应反应,所以胚胎培养后移入受母牛子宫内可以存活.

(5)母牛子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应

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基因工程动植物病毒,假如用煙草花叶病毒这病毒是RNA为遗传物质的,在细胞内是否会降解RNA如何复制,目的基因怎么表达... 基因工程动植物病毒,假如用烟草花叶病蝳这病毒是RNA为遗传物质的,在细胞内是否会降解RNA如何复制,目的基因怎么表达

首先RNA是不会降解的RNA会逆转录为DNA,然后整合到细胞基因組中这些病毒的RNA随细胞基因组的复制而复制,表达也是随细胞基因的表达而表达不清楚了还可以再问。

烟草花叶病毒内并没有逆转录酶啊

 

以RNA为遗传物质的病毒可以在细胞核或者细胞质中复制其遗传物质不会疆界。RNA可以通过病毒自身的RNA聚合酶复制具的情况涉及到遗传粅质是双链RNA病毒、正义单链RNA病毒还是负义单链RNA病毒。你说的烟草花叶病毒(TMV)是正义单链RNA病毒自身的正义链就可以作为翻译的模板表达基因,复制会利用病毒自身的RNA聚合酶转录出负义的互补链利用负义链作为模板转录成正义链包装到毒粒中完成复制

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