目的了解基于载体的siRNA对HepG2.2.15细胞中HBV的抑制作用,观察特异性siRNA载体对细胞的毒副作用及可能的非靶向效应,探讨新的抗病毒治疗手段方法根据GenBank收录HepG2.2.15细胞系中HBV基因全序列,设计构建针对HBV的C基因区的3条siRNA的双链复合体,经退火连接入p-Silencer-Cmv4.1载体,连接产物转化JM109细胞,载体经聚丙烯酰胺凝膠电泳及测序鉴定后中量超纯手机公积金提取流程图质粒,定量后与转染试剂siPort
DNA拷贝数降低102个数量级。而MTT检测表明该特异性siRNA表达载体不影响细胞的生长曲线与生长率,治疗组与对照组比较无差异ELISA法检测表明特异性siRNA并不影响细胞干扰素的表达,p-C1、p-C2、p-C3组与未转染组、p-NC组比较表达均无差異。结论基于载体的特异性siRNA在体外可抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达该抑制作用是特异性的,同时对细胞无明显毒副作用。该作用为基因水平的裂解作用,不会出现耐药现象
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【摘要】:目的观察六月青(Liuyueqing,LYQ)含药血清的体外抗乙型肝炎病毒的作用方法以MTT法检测药物在体外对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用,采用酶联免疫法(ELISA法)检测HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg、HBeAg的滴度。结果LYQ含药血清对HepG2.2.15细胞50%生长抑制率的给药剂量为11.56g.(kg.d)-1;而对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg50%生长抑制率的给药剂量为0.178g.(kg.d)-1,其治疗指数(TI)为64.94;另外,LYQ含药血清对HBeAg抑制作用不明显结论LYQ含药血清在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低。
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目的:探讨乙肝健药液及其含药血清对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的抑制作用方法
:培养HepG2.2.15细胞,24h后加入6组不同浓度乙肝健药液和其含药血清,并与空白对照组、空白血清组对照,继续培养48h,MTT检测各组细胞存活力;根据MTT结果选取3组浓度乙肝健药物,ELISA法检测各组48h和96h后上清液中HBsAg和HBeAg的含量;流式细胞术测定3组不同浓度乙肝健药液
第二┿二届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班
中国江苏苏州
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