有一混合蛋白质样品,如何根据下列各组烃的混合物分电荷性不同将混合物 分离

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蛋白质分离纯化
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分离纯化蛋白质的方法及原理|生​化​第​七​章
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你可能喜欢下列有关ATP和蛋白质的叙述,正确的是A.ATP中的“A”与构成DNA、RNA中的碱基“A”是同一种物质B.ATP中的能量可来源于光能和化学能,也可以转化为光能和化学能C.分离和纯化蛋白质可根据其分子大小、所带电荷的性质_百度作业帮
下列有关ATP和蛋白质的叙述,正确的是A.ATP中的“A”与构成DNA、RNA中的碱基“A”是同一种物质B.ATP中的能量可来源于光能和化学能,也可以转化为光能和化学能C.分离和纯化蛋白质可根据其分子大小、所带电荷的性质等差异进行D.蛋白质的功能特性是由组成蛋白质的氨基酸种类、数量和空间结构决定的
答案BCATP中的A是腺苷,DNA、RNA中的A是碱基,ATP中的能量可来源于光能和化学能,也可以转化为光能和化学能,分离和纯化蛋白质可根据其分子大小、所带电荷的性质等差异进行,白质的功能特性是由组成蛋白质的氨基酸种类、数量、排列顺序和蛋白质空间结构决定的,所以BC选项正确.
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分子量接近,电荷接近的蛋白质怎么分离开来?求各位大侠指教啊
跑长胶,越长越好
双向电泳 纯化么,可以用疏水柱子,两个蛋白的疏水性应该不一样,可以试试,有时候PI相近的蛋白液可以在离子交换上面分开来,因为局部电荷分布不一样。 : Originally posted by younghe at
纯化么,可以用疏水柱子,两个蛋白的疏水性应该不一样,可以试试,有时候PI相近的蛋白液可以在离子交换上面分开来,因为局部电荷分布不一样。 先用DEAE离子交换层析,跑出一个有活性的峰,收集酶液跑RsourceQ离子交换层析有两个相近的有活性的峰,再收集跑superdex 200又是一个有活性的大峰,然后不知道怎么分离了 : Originally posted by youlinglyw at
跑长胶,越长越好
双向电泳 你的意思是,利用他们电荷和分子量的细微差别,跑长距离胶将他们分离开来? : Originally posted by younghe at
纯化么,可以用疏水柱子,两个蛋白的疏水性应该不一样,可以试试,有时候PI相近的蛋白液可以在离子交换上面分开来,因为局部电荷分布不一样。 是同一个蛋白的降解片段么? : Originally posted by 笑笑打dota at
你的意思是,利用他们电荷和分子量的细微差别,跑长距离胶将他们分离开来?... 是的,利用差别。双向电泳是最实用最有效的分立方式 但是双向电泳胶的回收比较麻烦。你可以试试沉淀法。用不同浓度的盐溶液进行沉淀。或者用疏水层析。 : Originally posted by younghe at
是同一个蛋白的降解片段么?... 是纯化之后不确定到底是纯化得到两种酶,还是一种双功能酶 : Originally posted by youlinglyw at
是的,利用差别。双向电泳是最实用最有效的分立方式... 恩,好的,谢谢 : Originally posted by wolfman840 at
但是双向电泳胶的回收比较麻烦。你可以试试沉淀法。用不同浓度的盐溶液进行沉淀。或者用疏水层析。 沉淀法用过了,硫酸铵沉淀的也是有两种酶的活性。好像还是分不开 如果要看是不是两种酶或者一种酶,你可以跑一个长的分子筛,然后收集样品峰进行酶活测定。 可以试试疏水层析,或者查查有没有相关的亲和介质 : Originally posted by wolfman840 at
如果要看是不是两种酶或者一种酶,你可以跑一个长的分子筛,然后收集样品峰进行酶活测定。 老板说让跑天然电泳试试,天然电泳是不是也算一种分子筛? 如蛋白质的电荷相同,要将他们分开,可以根据他们不同分子量或不同疏水性将他们分开。 : Originally posted by 笑笑打dota at
老板说让跑天然电泳试试,天然电泳是不是也算一种分子筛?... 天然电泳应该是算一种分子筛,蛋白是在非变性条件下,跑得快慢取决蛋白分子自身带点量和分子的三维结构大小。 : Originally posted by laohuwang14 at
天然电泳应该是算一种分子筛,蛋白是在非变性条件下,跑得快慢取决蛋白分子自身带点量和分子的三维结构大小。... 恩,好的,谢谢啦,我去试试看
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复杂蛋白质样品中目标组分柱层析分离纯化策略研究
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