721721型分光光度计计为什么颜色淡的反而比颜色深的吸光度要高

721分光光度计使用规范_百度文库
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721分光光度计使用规范
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在使用分光光度计时为什么读数会不断变化?我在使用分光光度计测量吸光度时为什么读数会不断变化?是因为显色反应还没进行完全还是什么其他原因
在使用分光光度计时为什么读数会不断变化?我在使用分光光度计测量吸光度时为什么读数会不断变化?是因为显色反应还没进行完全还是什么其他原因
原因可能是:1 仪器预热时间不够,仪器本身不稳定,导致读数不断变化;2 反应时间不够,显色不完全,溶液的颜色在变化而导致仪器读数变化.也还有其它的原因,比如方测定法本身有问题,溶液显色不稳定.主要原因就是前述两种.&& 查看话题
吸光度值可以大于1吗?
求助各位前辈们,我在做红枣色素的分离纯化,提取液颜色很深,我看过的论文里的吸光度值基本上都是大于1的,但是师兄说有问题,最好把吸光度控制在1以下,问题是我还要过大孔树脂纯化,要是稀释的倍数太大的话,估计纯化效果也会下降吧?
我觉得应该可以,只要大于1时也在线性变化范围之内就行。 吸光值尽量大于1,在0.434左右的吸光值是最准确的,还有如果用到标准曲线的话你的吸光值最后在曲线中间位置。如果你的纯化物吸光值太大你可以纯化后稀释,对测定结果不影响 吸光度可以大于1,但是要看你的波长范围和标准曲线的范围,还有分光光度计的类型! 看你的标准曲线范围!!
你的样品吸光度最好在你标准品吸光度之间,这样比较准 吸光值我最大做到5,这个可以,看你的稀释情况,需求要求。具体问题具体分析。我一般主要看曲线走势。:hand: 我做的一般不会 不想稀释的话,完全可以。只要在你标准曲线的范围之内就行。如果你想准确一点,最好控制在0.2-0.7之间。 : Originally posted by jeff09528 at
不想稀释的话,完全可以。只要在你标准曲线的范围之内就行。如果你想准确一点,最好控制在0.2-0.7之间。 我没标准曲线,因为我提的红枣色素没有标品,我测吸光度值主要是为了计算大孔树脂的吸附率和解吸率,我想在用大孔树脂吸附之前先测一下提取液的吸光值,用大孔树脂吸附之后再测其吸光值,然后计算大孔树脂的吸附率,这样可以吗?还有我能不能在吸附之前将提取液稀释一定倍数测其吸光值,吸附之后再将剩余的残液稀释相同的倍数测其吸光值,然后再算吸附率,这样可以吗?:hand: : Originally posted by 飘飞的雨3219 at
吸光度可以大于1,但是要看你的波长范围和标准曲线的范围,还有分光光度计的类型! 我们实验室的分光光度计好像是7230G,能测的范围是多少?:hand: 理论上,大于1不太好呢。 一般都不大于1了吧,在0.2-0.8范围内那个定律线性关系才好了吧,你选择什么树脂呢。 : Originally posted by swqowen at
吸光值我最大做到5,这个可以,看你的稀释情况,需求要求。具体问题具体分析。我一般主要看曲线走势。:hand: 求问您用的仪器型号?我用的都是1~3的 原液、洗脱液稀释再测,要确信对比是同一物才有可比性。 大于1不标准,你要选择合适的稀释倍数吸光度到0.2到0.8之间 : Originally posted by 碎片时间 at
求问您用的仪器型号?我用的都是1~3的
... UV2550 尽量不要&&太大的话会有正负偏差&&应该在线性范围内 在0.434左右的吸光值是最准确的 0.03-0.8定量最好。 : Originally posted by slake99 at
原液、洗脱液稀释再测,要确信对比是同一物才有可比性。 问题是我的提取液到底都有些什么成分我也搞不清楚,怎么办?721分光光度计使用说明
分光光度计使用说明
1.电源开关
2.灵敏度档
3.比色皿座架拉杆
4.光量调节器(100%)
5.调“0”电位器
6.波长调节器
7.波长指示盘
8.读数表头
9.比色皿盖
  721分光光度计采用经典的光路系统和精良的制造工艺,使仪器的测试精度及稳定性较传统产品有很大的提高;广泛适用于冶金、化工、机械、医学、生物、农业、环保、教学等行业和领域。
  波长范围:360~800nm
  波长精度:360~600±3nm  600~700±6nm
  700~800±8nm
  透射比正确度:±2.5%
  透射比重复性:0.5
  光是一种电磁波,具有一定的波长和频率。可见光的波长范围在400~760nm,紫外光为200~400nm,红外光为760~500000nm。可见光因波长不同呈现不同颜色,这些波长在一定范围内呈现不同颜色的光称单色光。太阳或钨丝等发出的白光是复合光,是各种单色光的混合光。利用棱镜可将白光分成按波长顺序排列的各种单色光,即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等,这就是光谱。有色物质溶液可选择性地吸收一部分可见光的能量而呈现不同颜色,而某些无色物质能特征性地选择紫外光或红外光的能量。物质吸收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱,由于物质的分子结构不同,对光的吸收能力不同,因此每种物质都有特定的吸收光谱,而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比,分光光度法就是利用物质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
在比色分析中,有色物质溶液颜色的深度决定于入射光的强度、有色物质溶液的浓度及液层的厚度。当一束单色光照射溶液时,入射光强度愈强,溶液浓度愈大,液层厚度愈厚,溶液对光的吸收愈多,它们之间的关系,符合物质对光吸收的定量定律,即Lambert-Bear
= lg( I0 / I ) =
 c L, &T=
式中,T 为透过率,I0为入射光强度,I为透射光强度,A为消光值(吸光度),
为吸收系数,L为溶液的光径长度,c为溶液的浓度。从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时,透光率是根据溶液的浓度而变化的。这就是分光光度法用于物质定量分析的理论依据。
实际测量时,现找出待测物质溶液的最大吸收波长。然后,配置一系列该物质已知浓度(c)的溶液,在最大吸收波长处测定吸光度(A),得到A~c关系。一般要求为线性关系(即符合Lambert-Bear定律),所以要先找出符合线性关系的浓度范围,一般是浓度较低时线性关系较好。最后,测定待测溶液的吸光度,从
A~c 直线关系上即可确定溶液浓度。这亦是原子吸收光谱,ICP,紫外可见分光光度计,红外光谱等光学法测定浓度的定量基础。
  721型分光光度计其波长范围360~800nm,色散元件为三角棱镜.
  1. 检查仪器各调节钮的起始位置是否正确,接通电源开关,打开样品室暗箱盖,使电表指针处于“0”位,预热20min后,再选择需用的单色光波长和相应的放大灵敏度档,用调“0”电位器调整电表为T=0%。
盖上样品室盖使光电管受光,推动试样架拉手,使参比溶液池(溶液装入4/5高度,置第一格)置于光路上,调节100%透射比调节器,使电表指针指T=100%。
  3. 重复进行打开样品室盖,调0,盖上样品室盖,调透射比为100%的操作至仪器稳定。
  4. 盖上样品室盖,推动试样架拉手,使样品溶液池置于光路上,读出吸光度值。读数后应立即打开样品室盖。
  5. 测量完毕,取出比色皿,洗净后倒置于滤纸上晾干。各旋钮置于原来位置,电源开关置于“关”,拔下电源插头。
  6. 放大器各档的灵敏度为:“l”
×1倍;“2”×10倍;“3”×20倍,灵敏度依次增大。由于单色光波长不同时,光能量不同,需选不同的灵敏度档。选择原则是在能使参比溶液调到T=100%处时,尽量使用灵敏度较低的档,以提高仪器的稳定性。改变灵敏度档后,应重新调“0”和“100”。
  1. 该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
&&& 3. 注意“0”和“100%”调节电位器的稳定。这个很多不良。
网站管理和编辑:葛华才博士&&

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