北京索莱宝自产 蛋白Marker试剂 Western Blot Marker6次
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北京索莱宝自产 蛋白Marker试剂 Western Blot Marker货号：PR1800规格：10T（50μl） /20T（100μl）Western Blot Marker是专门为Western Blot试验设计的分子量标准。
北京索莱宝自产 蛋白Marker试剂 Western Blot Marker货号：PR1800规格：10T(50μl) /20T(100μl)保存：-20℃可保存至少六个月。避免反复冻融，建议分装保存。产品说明：Western Blot Marker是专门为Western Blot试验设计的分子量标准。传统的Western Blot试验需要使用预染蛋白Marker来跟踪检测阳性抗原信号和转膜效率。但预染蛋白Marker用在Western Blot试验中有三大缺点：（1）预染蛋白Marker无法在胶片上曝光，曝光信号需要根据膜上的预染蛋白Marker来判断，因此后续的图片需要拼接才能两者合而为一；（2）预染蛋白Marker都经过化学修饰，经过化学修饰的蛋白在SDS-PAGE电泳过程中迁移率发生改变，分子量信息不再准确，往往导致Western Blot结果判断出现较大偏差；（3）预染蛋白Marker无法检测作为杂交过程的阳性对照。Western Blot Marker由6种不同分子量的蛋白组成（20、40、60、70、80、120 KDa），其中70KDa条带为蓝色预染marker，其它五个条带都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合。 Western Blot Marker可以直接结合二抗， 或通过结合一抗间接结合二抗， 因此蛋白Marker就能与抗原在同一张胶上曝出信号， 阳性信号可以直接通过Western Blot Marker的位置来判断。 Western BlotMarker不经过任何化学修饰，分子量精确。使用说明:1. 取出后于室温放置融化；2. 温和地充分混匀，取 5μl 该 Western Blot Marker 至上样孔中，进行 SDS-PAGE 电泳。3. 电泳完毕后转至 PVDF 膜，与一抗二抗孵育。4. 孵育完毕，将 Western Blot Marker 与抗原一起通过 ECL 曝光至胶片。Lane 1,2,3:上样量为5、10、20 μl的Western Blot Marker注意事项:1. 本产品可直接使用，不需要加热。2. 及时更换电泳缓冲液并使用新配制的凝胶，以免影响电泳结果。北京索莱宝自产 蛋白Marker试剂 Western Blot Marker相关产品：PR1400&& &低分子量蛋白MARKERPR1500&& &次高分子量蛋白MARKERPR1600&& &预染低分子量蛋白MARKERPR1700&& &预染次高分子量蛋白MARKERPR1800&& &Western blotting蛋白MARKERPR1900&& &预染超低分子量蛋白MARKERPR&& &彩虹180广谱蛋白Marker（11-180KD)PR1910-20&& &彩虹180广谱蛋白Marker（11-180KD)PR1910-50&& &彩虹180广谱蛋白Marker（11-180KD)PR&& &彩虹180广谱蛋白Marker（11-180KD)PR&& &彩虹245广谱蛋白Marker （11-245KD)PR1920-20&& &彩虹245广谱蛋白Marker （11-245KD)PR1920-50&& &彩虹245广谱蛋白Marker （11-245KD)PR&& &彩虹245广谱蛋白Marker （11-245KD)PR&& &彩虹245plus广谱蛋白Marker（5-245KD)PR1930-20&& &彩虹245plus广谱蛋白Marker（5-245KD)PR1930-50&& &彩虹245plus广谱蛋白Marker（5-245KD)PR&& &彩虹245plus广谱蛋白Marker（5-245KD)北京索莱宝自产 蛋白Marker试剂 Western Blot Marker
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【求助】Western-blot图片结果问题
向园子里的高手们请教一个问题：1. 论文中Western-blot的结果应该如何表示？我用考马斯亮蓝染色的Marker条带照片放于DAB显色的膜照片旁，显示膜上条带的分子量，可以不？老师说不应该放“考”的照片，可是我觉得不能说明条带的位置，应该如何解决？2. 论文中ELISA直方数据图表示时是不是必须得有标准差？ELISA用三个复孔取平均值的结果是否可行？ELISA是不是必须得做三次实验，每次做三个复孔？还是只做一次就可？方法成熟的前提下。谢谢各位大侠！1. 没必要放“考”的照片。现在有专门用于western-blot的Marker了，用这个是最好。不用的话，可以直接在图片旁边人工标明分子量就可以。借用SCI杂志编辑的话（我的理解，呵呵）：“没有人会凭空怀疑作者标注的真实性，因为真实是科研工作者的生命。”2.最好有标准差。用三个复孔取平均值是可以的，做三次实验也可以，两者得出的统计学意义不同。如果实验结果分析与ELISA的方法本身无关，则不应做3次实验了。一点拙见。对，用预染marker吧，比较好。谢谢楼上的两位大侠！迫于实验室经费有限，只能用普通MARKE了。另外，to kingtea:“用三个复孔取平均值是可以的，做三次实验也可以，两者得出的统计学意义不同。” 能否详细的解释一下二者的区别？我还想问下，在什么情况下才应做三次实验呢？谢谢！据我看到的文献，多是做两次试验，每次试验做三个重复孔。非常感谢楼上的高手！我刚开始也是坚持用三个复孔，但学校有位老师说他们一般做酶联都是用两个复孔，所以我也用的是两个复孔。不知道哪位知道正规的应该是什么样子？
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WB（western blot）试验常见问题解答 文档
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3秒自动关闭窗口　　Westernblot法是检测蛋白样品中特异性抗原的一种分析方法。　　本期伯乐生命()专家详细介绍Westernblot法实验原理及方法。　　Westernblot法操作步骤是：　　伯乐生命专家强调第一步将被分析的蛋白样品做SDS—PAGE凝胶电泳，使样品中的蛋白质按分子量大小在凝胶中分成条带。　　Westernblot法第二步把凝胶中的蛋白转移到膜上(所谓印迹)，其中用得最多的材料是硝酸纤维素膜(NC膜)和PVDF膜。蛋白转移的方法多采用电转移，也有用吸印法转移的(原理与Southern blotting类似)电转移又有半干法和湿法之分，本实验采用后者。　　bio-rad专家还提到Westernblot法最后一步是用特异性的抗体检测，看印迹膜上是否存在相应抗原。免疫检测的方法可以是直接或间接的，现在一般都是采用间接免疫配标的方法。在用特异性的第一抗体染色后，再用酶标的第二抗体(辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)标记的抗第一抗体的抗体)染色，再加酶的底物显色，通过膜上显现出的颜色或经化学发光在x光底片上出现的曙光条带来显示抗原的存在。　　【Westernblot法实验材料】　　1、IgG标准品、辣根过氧化物酶(HRP)标记的免疫球蛋白IgG抗体：　　2、转移缓冲液、TBS、漂洗液(TTBS)、封闭液、DAB显色液、脱色　　液、氨基黑染色液；　　3、转移电泳仪、硝酸纤维素膜NC、滤纸、剪刀、手套、小尺、培养　　皿等。　　【Westernblot法实验方法】　　样品的SDS—PAGE检测　　按SDS—PAGF实验的操作步骤进行，采取对称加样，电泳结束时，一份用于免疫鉴定，一份用于蛋白染色显带，以利于相互对比，分析Westernblot法实验结果。　　2、Westernblot法转移印迹　　(1)转移前准备：将滤纸、NC膜剪成与胶同样大小，NC膜先浸入蒸馏水中10一20min，.再浸入转移缓冲液中平衡30min 。　　(2)凝胶平衡：将电泳后的SDS—PAGE胶板置于转移缓冲液中平衡30一60min，按“凝胶三明治”结构(海绵垫—滤纸—凝胶—NC膜—滤纸—海绵垫)逐层铺平，各层之间勿留有气泡和皱折。　　(3)装入转印夹中，、Westernblot法转印时凝胶侧接负极，NC膜侧接正极，可将转印电泳槽置于冰浴中，200ma恒流转印lho　　(4)转印结束后，按加样7L的位置.剪下蛋白分子量标准的膜条用氨基黑染色，观察转印效果，其余NC膜浸入封闭液中，4℃过夜。　　(5)TBS洗膜l一2次，每次10min。　　(6)加入HRP标记的抗体，室温振摇lh。　　(7)TBS洗3次，每次10min。　　(8)将NC膜浸入DAB底物显色液中，置暗处反应，待显色反应达到最佳程度时，立即用三蒸水或双蒸水洗涤终止反应。　　【Westernblot法注意事项】　　1、Trik—甘氨酸转移缓冲液pH为8.3，比大多数蛋白质的等电点(P1)要高，蛋白质带净电荷并向阳极迁移，常用于湿转。　　2、影响Westernblot法成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位的性质。只有那些能识别耐变性表位的抗体可与抗原结合，多数多克隆抗血清中或多或少地含有这种抗体，所以在、Westernblot法实验中常选用多克隆抗体。而多数单克隆抗体不能与变性抗原反应，其识别的表位依赖于抗原蛋白正确折叠所形成的三维结构构象。　　3、常用提高Westernblot法灵敏度的方法：在电泳前应用免疫沉淀法将极低浓度抗原进行纯化和浓缩，可使用三重检测系统增强信号的强度，例如：使一抗，二抗和三抗相继与抗原结合形成复合物，使得结合物中标记抗体分子的数量增多。　　【Westernblot法研发品】　　　　预染 SDS-PAGE 标准品应用于 SDS-PAGE 和 Western 印迹，方便快速地监测蛋白电泳分离进程和估算印迹膜转移效率。每批 Kaleidoscope 和预染 SDS-PAGE 标准品都经过单独校准，以便对样品分子量进行估算。　　伯乐生命Kaleidoscope 标准品　　Kaleidoscope 标准品是由多种颜色的预染蛋白组成，可在 SDS-PAGE 和 Western 杂交膜上即时定位。当在 Tricine 凝胶上分离多肽和小蛋白时，可使用 Kaleidoscope 多肽标准品。Kaleidoscope 预染标准品为宽分子量范围的蛋白标准品。　　下期，伯乐生命专家将介绍Westernblot法百科(三)：你不知道Westernblot法故事，敬请关注gammaH2AX western blot 扫膜图疑问请问上面那条带是什么?中间的是泛素化的,最下面的是gammaH2AX ,_百度作业帮
gammaH2AX western blot 扫膜图疑问请问上面那条带是什么?中间的是泛素化的,最下面的是gammaH2AX ,
gammaH2AX western blot 扫膜图疑问请问上面那条带是什么?中间的是泛素化的,最下面的是gammaH2AX ,
啥意思，我师姐说她做的没有，而我做的就多了这一条
你这抗体是不是多抗啊
要么就是你批细胞状态不一样 蛋白有降解 或者有可变剪切啥的～
抗体不是多抗，一直用的这抗体，细胞都是取的同一个皿的，状态应该一样，即使有可变剪切也不可能再多一条带啊，蛋白降解对结果有啥影响呢？谢谢了
你问的是最上面那条是么 可能是蛋白前体 未加工完全的