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DOI:10.3964/j.issn.10)05—1310-05引言可见/近红外光谱分析技术以其无损、快速、实时、多参数同时测量等优。“适于植物叶片生化参数无损检测。植物叶片在可见光和近细:外波段呈现出特有的光谱特性[1{],在特征波长处杭物的吸光度值与植物生化成分含量相关。对植物叶片在·叮见光/近红外波段的吸收光谱进行分析,可以从植物叶片的精细光潜信息中反演得到植物叶片的生化组分含量‘4.5]。植物叶片光谱,不仅包括了化学物质含量的信息,也包括了各种物理特性的信息,如叶片结构、厚度、表丽粗糙度、植物种类、散射效应等等。由Lambert-Beer定律町知,物质的吸光度与光程长成线性关系,如果样本测量时光程长不一致,那么在定最分析模型建立的过程中,光程长也会被作为浓度的信息进行建模,这样会降低光谱校正模型的预测精度和模型适应性。本(来源：淘豆网[/p-3666002.html])文主要针对由于叶片厚度差异或光子在叶片细胞内及细胞问的散射随机性而造成的光程长差异,提出一种改进的扩展多元散射校正(EMSC)的光程长校正方法。传统的校正多元散射效应方法有多元散射校正(MsC),分段多元散射校正(PMSC),变量标准化(SNV)等,尤其是MSC方法使用较为广泛。MSC方法假设散射效应与波长及样品的浓度变化无关,对每一个样品进行校正时均将全部样晶的平均光谱作为参考光谱,对其进行截距与斜率的校正睁8。。对于组分含最范周比较宽和样品厚度差异较大时,该方法会严重丢失浓度信息。扩展多元散射校正方法[9’10](extendedmultiplicative signal correction,EMSC)是由Martens等对多元散射校正方法(multiplicative scatter correction,MSC)的一种扩展,与MSC相比,它增加了化学物质纯谱信息,以及波长对散射效应的影响。这样,光程长作为一个影响光谱的参数被明确的表示H{来,通过数学校正方法得到该参数,将其校正,就町(来源：淘豆网[/p-3666002.html])以得到光程长都一致的,光谱差异仅与浓度差异相关的校IF光谱。但是,该方法的缺点是,它需要被测样本所含化学物质的种类及对应纯谱作为先验信息。这给实际应用带来厂很大的不便。因为通常情况下,无法得知这些先验信息。本文提出一种光稃长校正方法,该算法基于改进的EM-SC原理,用差值光谱的主成分代替物质的纯谱,建立实测光谱与理想光谱的函数天系,将反映基线与光程长干扰的主成分剔除,从而得到校正后的光谱数据。本文首先阐述了改进的EMSC方法的原理,然后将该方法应用于植物叶片光谱中光程长差异的校正,并取得了较好效果。收稿日期:.修订日期:基金项目:国家自然科学基金项目(),北京I卜优秀人才培养资助项目(0348)和“长江学者和创新团队发展计划”项目(IRT0705)资助作者简介:张倩暄,女,1985年生,北京航空航天大学仪器科学与光电工程学院博士研究生 e-mail:zhangqianxuan23@163.cofrI*通讯联系人 e(来源：淘豆网[/p-3666002.html])-mail.,gizhang(鱼buaa.edn.∞万方数据第5期光谱学与光谱分析 1311改进的EMSC方法原理EMSC方法是将光谱中物质的吸收特性,波长对散射效应的影响作为参数项,对实测光谱建立精确的数学函数。通过对参数标定,将不需要的物理效应从光谱中减去,保留化学物质的吸收特性,得到与组分浓度几乎成线性关系的理想光谱。其主要原理曲j如下:近红外光谱分析的基础是Lamer-Beer定律,即物质的吸光度与浓度c,光程长b,吸光系数e成线性关系A--_一lg寺=如(1)如果一种被测物质含有J种化学成分那么吸光度是满足可加性的,即理想情况下的吸收光谱为Z.d。一Ci.1志’l+…+ff。』忌’j+…+Ci.sk’』(2)其中,岛代表的是第歹种成分的吸收光谱。实际情况中由于样品粒子大小、粒子分布、表面粗糙度、个体其他差异等原I』j或者实验过程中仪器漂移、测量条件等影响,实际测得的光谱Z与理想光谱Z。hem存在着一定的平移与旋转关系,同时考虑到各个波长处的散射系数并不完全相同,因此EMSC方法将实测(来源：淘豆网[/p-3666002.html])光谱表达成为Zi≈afJ,+biZf.。Im+姒+e122 (3)将(2)式代入(3)式中可以得到z{≈mI,+反(“l正’1+…+“j屉’i+…+Q,sk’J)+di}t+ei22 (4)由上式发现岛都是存在于非线性参数6筘d中。为了能在C“未知的情况下将bi估计出来,引入参考光谱m。于是,理想光谱Zi.d。可以表示为五.chem=m+Acf,lk’1+△G.2k’2+…+△n,J愚’, (5)其中Aci.』表示的是第i个样品与参考光谱中第歹个成分含量的差值,则(3)式为zf≈mI,+bim+触’+破A+矾2+矗(6)令,M=[J,;优;志7;A;A2],Pl一[口f,岛,hf,di,毋],建立最小二乘回!门模型可以得到Pi一2,M7*(M*M)_1 (7)在实际应用中,EMSC方法的应用受到很大的限制:第一无法得知被测样品中包含了哪些化学物质,第二无法得知这些化学物质纯谱矩阵k7。为克服EMSC算法的以上不足,本文提出一种改进的EMSC方法,在校正过程中,利用主成分来代替物质纯谱信息,定义(来源：淘豆网[/p-3666002.html])差值光谱矩阵Zdif,由(5)式可知Z0=Zf—m (8)根据主成分分析(ponents analysis,PCA)[11J原理可知,一组瓦相关的数据,通过正交变化可以变成一组不相关的变鼍,变化之后的新变量被称为主成分,这些主成分之问彼此正交,并且反映了原始数据当中,具有最大方差的方向。在实际光谱中,影响光谱差异之问的一蝗变星,像光程长,浓度等彼此是相互独立的,因此对差值光谱进行主成分分析,每个主成分的载荷可以代表特定的因子,将差值矩阵表达为Z0一tlP’l+tz∥2+…+tsp’J (9)根据需要选择.,的个数,这些主成分包含有浓度差异信息的同时,也包含物理方面(比如粒子尺寸,光程长,表面状态等)的差异。通过主成分曲线的形状,确定出代表物质浓度信息的主成分以及代表物理特性的主成分,根据实际需要,将不需要的物理特性校正,突出化学物质浓度信息,使得校正光谱与浓度的相关性提高。将(9)式代入(3)式中得到Z—afI,+him+h¨P7l+h∽P,2+…+di2+以2+Ei (10)通过偏(来源：淘豆网[/p-3666002.html])最dx-乘回归,确定上式中的参数,将不需要的主成分定义为干扰因子,需要留下的定以为有效因子,减去干扰因子得到校正光谱如下汤.一:墨二∑竺生竺:;二盟二皇:!二鲨(11)2实验研究2.1实验仪器及测量方法光谱测量仪器采用海洋光学USB4000便携式光谱仪,其有效波长范围为500~1 000 ni'n,光谱间隔为0.2 nEn。叶片光谱采用透反射式测量方式。SPAD-502叶绿素仪用来测量叶绿素含量的相对值。仪器有效测量范围为0~50 SPAD,在该范围内测量精度为l SPAD,重复性精度为±0.3SPAD。2.2样品及实验本研究中实验分为两部分:第一部分定性分析光程长对光谱的影响,通过变异系数CV和主成分贡献率分析改进EMSC方法在校正光谱光程长差异的效果。第二部分定量分析本方法的有效性。在植物光谱与叶绿素含量之间通过交互验证方式建立PLS模型,比较预处理阿后的模剐预测精度。实验1:选用实验室的盆栽芦荟作为待分析样本,选取一个长势均匀饱满的叶片,测得长度为25锄,每隔1.5 C(来源：淘豆网[/p-3666002.html])/TI取一个样本点,共获得16个样本点并对其进行光谱采集。得到的光谱图如图1,计算其变异系数CV值(CV一标准差/平均值)范围为0.038~0.211。设计对比实验,在叶片上的某一固定位置重复采样10次,得到的光谱如图2,其变异系数范围为0.002~0.023。这样说明,图1中光谱的主要差异是Ill-JI.&J』5:0I起的。实验2:本实验中采集32个厚度有差异的绿色程度不同Wavelength/rim№1 Sixteen spectra of different location万方数据1312 光谱学与光谱分析第30卷的植物叶片测量其光谱后,在同一位置处,使用叶绿素仪测量其相应的叶绿素含量,真值范围分布在27.5~45.zsPAD,标准差为5.7sPAD。测量时每一个样本的采集位置保持一致,以减少位置误差的影响,测得的光谱图如图3所示,其变异系数为0.06~o.25。Wavelength/rim晦2 Ten spectra of the黜locationWavelength/nm(来源：淘豆网[/p-3666002.html])№3 Thirty two spectra of differentsamples at the ssnle location3结果与讨论对实验1中的16条光谱进行小波去噪[12]后,采用本文提出的改进EMSC方法进行处理。对其差谱进行主成分分析,载荷曲线如图4所示:前两个主成分含量的贡献率达到了98%,第3个主成分与叶绿素的吸收光谱很相似,代表了叶绿素在670 DATI的吸收峰。因此叮以认为,该主成分有效表征了叶绿素浓度的信息。根据实验条件可知,在假设叶绿素浓度不变的情况下,图l中的光谱之间的差异主要来源于厚度和散射效应。故将前两个主成分都作为影响光程长的干扰因子去掉,达到校正光程长差异的目的。校正之后的光谱如图5所示,对其进行主成分分析,载荷曲线如图6,在原始光谱中的第三主成分变成了第一主成分,贡献率由前面的1%上升为97%,校正后的第2个主成分曲线在650和690脚附近值比较大,代表了叶绿素另外两个吸收峰。从图7可以看到,总体上,校正后变异系数远远小于原始光谱的变异系数。在670舯叶绿素(来源：淘豆网[/p-3666002.html])的吸收峰处,与原始数据变异系数基本上保持不变,却大于对比实验的变异系Wavelength/nm脚4 Loediog curve of ori画na dataWavelength/nmF姆5 Corrected spectra啦6 Leeding allrve after EMSCWavelength/nm万方数据第5期光谱学与光谱分析 1313数,说明叶绿素分布不是均匀的;在500~600 nm之间校正后变异系数与对比实验的变异系数基本上可以重合,这表明可见光区域散射较少,该方法很好地校正了厚度的影响。在700~1 000 nln之间,由于该波段强的散射效应,校正后的光谱变异较对比光谱变异系数还小,该方法不仅校正了叶片厚度差异,还校正了强散射效应。Wavelength/nmWavelength/nm№9 Corrected specirum矾蛋10 Loading curve after EMSC对实验2中的样本差谱进行主成分分析如图8所示,与实验1相比,第一、二主成分所占比例有所下降,而第三主成分的比例提高了。这是由于这32个样本有浓度差异,第三个主成分体现的就是浓度的影响。将第一、二主成分作为坏因子去掉,所得到的校正结果如图9所示,叶绿素在650 nl'n附近的吸收峰和在550 m附近的反射峰很明显的被突出来了,而其他波长处基本上属于重合。校正后光谱的载荷曲线如图10所示,结论与实验一相似。5 10 15 umber从模型精度来比较,对光谱数据和叶绿素含量利用PLS方法采用留一法交互验证建立分析模型,其结果如表一所示,可以看到经改进的EMSC方法与原始EMSC相比,精度和相关系数都有提高,相比原始数据,预测均方根误差降低了53.2%,相关系数由0.46提高到了0.88。Table parison between original and that after corrected图ll为PL￥模型主成分个数与预测均方根误差关系,原始数据的PLS模型只需要5个主成分,RMSEP就达到了最佳值,EMSC方法需要2个主成分,而改进的EMSC方法预处理之后,需要12个主成分才能达到最佳值。这是由于原始数据中的有用信息被散射、厚度等非化学信息下扰凶素所掩盖,EMSC方法虽然x寸原始数据有一定得校正作用,但是忽略了物质纯谱,所以也不能很好地提取化学物质信息。在500~1 000 nln波段内,影响叶片光谱的物质除r叶绿素,还有叶黄素、类胡萝卜素、花青素等色素,这凿物质含量与叶绿素含最存在一定的相关性。经过改进的EMSC方法校正之后,去掉r厚度和散射效应引起的光程长差异,其他物质的吸收特性对叶绿素含量预测也有一定的贡献。4结论本文提出了一种改进的EMSC方法,并利用该方法对叶片自身厚度和散射效应引起的光程长差异导致的光谱误差进行校正,将差谱矩阵进行主成分分析,用主成分代替纯谱信息,根据主成分曲线,确定有效因子和干扰因子。并对干扰因子进行校正,最后得到r较好的校正效果。实验结果表明8765432山甥葛∞万方数据1314 光谱学与光谱分析第30卷本文所述的方法可以较好的校正光程长差异,提高光谱数据建立过程中对样品选择均匀性的要求,并增强模型的通用对化学物质浓度的敏感度,降低了实际应用中光谱标定模型性。[1][2][3][4][5][6][7][8]9]10]11312-1参考文献Delalieux&Somers B Remote Sensing of Environment,2008,l 12:3762.Vero’nica Ciganda,Anatoly Gitelson,James Schepers.Journal of Plant Physiology。.LI Min-zan,et al(李民赞,等).Spectroscopy Analysis Technology and Application(光谱分析技术及其应用).Beijing:Science Press(jB京:科学出版社)。.Helena Sircelj。Michael Tall.SCientia Horticulturae,:362.WANG Fu-min,HUANG Jing-feng,WANG Xiu-zhen(4:福民,黄敬蜂,王秀珍).Spectroscopy and Spectral Analysis(光谱学与光谱分析),):1064.Wolds S。Martens H。、Ⅳold H.Proc.Conf.Matrix Pendls,Ruhe八Berlin:Springer Verlag,.Thennadil S N,Martin E R J.Chemometrics,.ZHAO Qiang。ZHANG Gong-li,CHEN Xing-dan(赵强,张工力,陈星旦,等).Optics and Precision Engineering(光学精密工程),):53.Martens H。Pram Nielsen J,Balling Engelsen S AnaL Chem.,.Harald Martens,Susanne W Bruun..J.Chemometrics,.Thomas E V,Haaland D M Anal.Chem.,1.Mina AminghMari。Nathalie Chezea,Jean-Michel putational Statistics&Data Analysis,1.A Path--Length Correction Method on Biochemical ParameterNondestructive Measuring of FoliumZHANG Qiamxuan,ZHANG Guang-jun。,LI Qing-boKey Laboratory of Precision Opto-Meehatronics Technology,Ministry of Education,School of Instrument Science andOpto-Eleetronics Engineering,Beihang University,Beijing 100191,ChinaAbstract Vis/NIR spectroscopy technology is capable of analyzing the content of biochemical parameter in folium rapidly andnondestructively.In the process of spectrum analysis,the variations in path-length between different samples exist,with therandom light scattering and leaf thickness perturbations。which influence the precision of quantitative analysis model In order toresolve this problem,an improved path-length correction method based on Extended Multiplicative Scattering Correction is pres—ented.In this paper,firstly the theory of EMSC algorithm is deduced.EMSC method incorporates both chemical terms andwavelength functions to help realize the efficient separation of path-length and interest concentration.Secondly two experimentswere implemented to demonstrate the validity of the method.In Experiment l,sixteen samples of different thickness but almostthe same chlorophyll content were selected,and how the path-length affects the spectrtm_1 pared,after EMSC prepro-cessing,the variable coefficient of spectrum could approach the repeatability ergot of spectrometer.In Experiment 2,thirty-twosamples of different thickness and chlorophyll content were selected.PLs model established using CroSS validation was employedto evaluate the efficiency of the presented algorithm.Before the preproeessing,the root mean squared error of prediction is 3.9SPAD with 5 ponents.A fter preprocessing,the predicted root mean squared error is 2.2 SPAD with 12 ponents.The results indicate that the improved EMSC preprocessing method could exactly eliminate the spectrum differencecaused by the path-length variations between different foliums.enhance the sensitivity of concentration and spectral data,and in—crease the precision of calibrated modelKeywords Extended multiplicative sPath length)SPlant leaf*Corresponding author(Received Jun.18,2009;accepted Sep.22,2009)万方数据播放器加载中，请稍候...
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