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JMD34-50-0.5 透析袋 扁宽34
截留分子量50000
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北京索莱宝科技有限公司
北京市通州区马驹桥镇联东U谷景盛南四街15号85A三层
产品详细描述
&JMD34-50-0.5 透析袋 扁宽34 &截留分子量50000 solarbio 0.5m/即用型
再生纤维素材质即用型透析袋,无需处理,使用简单方便,耐受性强
北京索莱宝科技有限公司 张净花 010-
透析袋的选择:
1.正确选择合适的截留分子量
截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。为达到合理有效的分离,需分离的两种物质分子量的比率至少为25.
选择截留分子量的经验法则:选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半,以获得至少90%的保留率。
2.正确选择扁平宽度
透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约10-15厘米的透析袋
3.透析袋的化学相容性
化学相容性主要用作使用指导,不作为化学相容的保证。温度,浓度,长时间曝光等因素的改变可能影响产品的使用。建议您自设条件进行测试。
透析袋详细信息
JMD16- 透析袋 扁宽16 &截留分子量1000000&solarbio 0.5m/即用型&500.00
JMD16-300-0.5 透析袋 扁宽16 &截留分子量300000&solarbio&0.5m/即用型 &500.00
JMD31-0.1-0.5 透析袋 &扁宽31 截留分子量100-500&solarbio&0.5m/即用型 &500.00
JMD31-100-0.5 透析袋 &扁宽31 截留分子量100000&solarbio&0.5m/即用型 &500.00&
JMD31-3.5-0.5 透析袋 &扁宽31 &截留分子量&solarbio&0.5m/即用型 &450.00&
JMD18-1-0.5 透析袋 扁宽18 &截留分子量1000 solarbio&0.5m/即用型 &450.00
JMD18-2-0.5 透析袋 扁宽18 &截留分子量2000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD18-3.5-0.5 透析袋 扁宽18 &截留分子量3500 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD18-8-0.5 透析袋 扁宽18 &截留分子量8000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00&&
JMD18-10-0.5 透析袋 扁宽18 &截留分子量10000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD18-15-0.5 透析袋 扁宽18 &截留分子量15000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD18-25-0.5 透析袋 扁宽18 &截留分子量25000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD32-8-0.5 透析袋 扁宽32 &截留分子量8000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00&&
JMD32-10-0.5 透析袋 扁宽32 &截留分子量10000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD32-15-0.5 透析袋 扁宽32 &截留分子量15000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD34-25-0.5 透析袋 扁宽34 &截留分子量25000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD34-50-0.5 透析袋 扁宽34 &截留分子量50000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD38-1-0.5 透析袋 扁宽38 &截留分子量1000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD38-2-0.5 透析袋 扁宽38 &截留分子量2000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD45-1-0.5 透析袋 扁宽45 &截留分子量1000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD45-10-0.5 透析袋 扁宽45 &截留分子量10000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD45-12~14-0.5 透析袋 扁宽45 &截留分子量1 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD45-15-0.5 透析袋 扁宽45 &截留分子量15000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD45-2-0.5 透析袋 扁宽45 &截留分子量2000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD45-3.5-0.5 透析袋 扁宽45 &截留分子量3500 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD50-8-0.5 透析袋 扁宽50 &截留分子量8000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD18-5-0.5 透析袋 扁宽18 &截留分子量5000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD30-5-0.5 透析袋 扁宽30 &截留分子量5000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
JMD40-5-0.5 透析袋 扁宽40 &截留分子量5000 solarbio 0.5m/即用型 &450.00
MD10-14-5 透析袋MD10()D 美国 5M 卷 240.00
MD25-14-5 透析袋MD25()D 美国 5M 卷 100.00
MD34-14-5 透析袋MD34()D 美国 5M 卷 110.00
MD44-14-5 透析袋MD44()D 美国 5M 卷 120.00
MD77-14-5 透析袋MD77()D 美国 5M 卷 320.00
MD34-7-5 透析袋MD34 ( 7000 D ) 美国 5M 卷 360.00
MD34-3.5-5 透析袋MD34 ( 3500 D ) 美国 5M 卷 400.00
MD44-3.5-5 透析袋MD44 ( 3500 D ) 美国 5M 卷 440.00
TXDJZ-40 透析袋夹子 美国 40mm 个 120.00
TXDJZ-60 透析袋夹子 美国 60mm 个 16.00
TXDJZ-80 透析袋夹子 美国 80mm 个 24.00
普通透析袋和即用型透析袋的区别
一、普通干型透析袋(美国联合碳化Viskase,甘油涂层,使用前需处理)
技术参数:&
△PH稳定范围&:&5-9
△污染物水平:&硫化物&0.3%;&重金属&50ppm
△化学兼容性:&与很多盐兼容,比如CaCl2,&(NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙***。
△温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
△蛋白吸附:&每克透析袋吸附蛋白量小于1ng&
储存条件:&
透析袋可存放于10-29度;每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
透析袋使用前处理方法:
1.&把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2.&在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和&1mmol/L&EDTA(pH&8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3.&用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4.&放在&1mmol/L&EDTA(pH&8.0)中将之煮沸10分钟。
5.&冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6.&用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
7.实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮10min即可使用。
截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1万左右,要根据各种透析袋的材料来定,29KD的,就是29000&道尔顿。
二、高精度、即用型透析袋(生物级,使用前无需处理,去除了硫化物和重金属离子,含0.05%叠氮钠防腐液)
生物技术透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物,无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
为满足不同实验室透析需求,有两种不同生物技术等级透析袋:纤维素透析袋和再生纤维素透析袋。
1.韧性膜材料,不易破损
2.杂质含量极少,可无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用
3.孔径标准均一
4.对溶质的吸附性小
5.可选分子量范围广100-300000
6.特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质
三、透析袋的区别
纤维素透析袋
再生纤维素透析袋
普通型透析袋
100-500;500-k;20k;50k;100k;300k
1k,2k,3.5k,8k,10k,25k,50k
普通型透析袋
化学兼容性
适用于:甲醇,乙醇和异丙醇等低碳醇(短时间、低浓度)。不适用于:强极性溶剂(如丙***,甲乙***,二恶烷)
适用于:烃,卤代烃,醇,***,酯,氧化物,含氮溶剂。不适用于:盐酸(浓度&25%),***(浓度&25%),96%硫酸,25%高***,1N氢***和10%的***酚水溶液
普通型透析袋
普通型透析袋
污染物水平
不含重金属和硫化物
不含重金属和硫化物
普通型透析袋
湿型,0.05%叠氮化钠
湿型,0.05%叠氮化钠
普通型透析袋
10,16,24,31mm
10,12,18,24,28,38,45,50,53mm
普通型透析袋
普通型透析袋
普通型透析袋
无需预处理,只需用蒸馏水清洗即可使用
无需预处理,只需用蒸馏水清洗即可使用
普通型透析袋
四、透析袋应用:
去除盐类,表面活性剂和溶剂
样品溶液的缓冲液置换和PH值的调节
浓缩蛋白质,多肽和抗体
电泳前稀释蛋白的制备
小分子污染物清除
组织培养的提取纯化
五、透析袋的使用:
下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。在开始透析之前应考虑到许多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量,透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率,因此,一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化。
1.&把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的样品)
2.&裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度(约占总样品体积量的20%)作为头部空间。
3.&把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹3-5毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋。
4.&由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹。
5.&把透析样品放在合适的透析缓冲液中。
6.&透析要根据具体的应用需求。通常情况下,允许过夜透析。在持续透析的过程中,至少要进行3次全部更换透析液。建议在(透析后)2-4小时,6-8小时和10-14小时(第2天早晨)更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行2小时的透析。
注:对于高浓度污染物,样品可能需要较长的时间透析,透析液需要更频繁的更换。
7.&透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃,再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃。
六、透析袋的贮存和保质期:
在适当的储存情条件下,保质期为两年。干燥的透析袋要在室温或4℃储存在聚乙烯袋中。未开封的透析袋4℃储存。一旦变湿,透析袋应浸泡在下列之一的溶液中:0.05%叠氮化钠,1%的***甲酸钠或1%甲醛。(备注:一旦变潮湿,不要让透析袋干燥。不断干燥会造成孔隙结构不可恢复的倒塌)
七、透析袋的历史
&&&&透析技术自Thomas&Graham&于1861年发明到现在已有一百多年的历史,它已成为生物化学实验室最简便,最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,去除盐、少量有机溶剂、小分子杂质、样品浓缩和改变微量样品的缓冲系统等都要用到透析技术。&
&&&&生物样品的透析只需使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子等物质不断扩散透析到袋外,直到袋内、外两边的浓度达到平衡。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为&保留液&,袋(膜)外的溶液称为&渗出液&或&透析液&。
&&&&透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的溶质浓度梯度形成的。透析的速度同欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度、膜的面积和温度成正比,与膜的厚度成反比。升高温度可加快透析速度。为最大限度地保持生物大分子的活性,通常采用4℃透析。&
&&&&透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜。目前较常用的是美国Union&Carbide&(联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,其截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常从700到数万不等。&
&&&&商品化的透析袋可制成管状,其扁平宽度为6~50&mm不等。为防干裂,出厂前一般都经10%的甘油处理,透析袋中含有微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。新购进的透析袋必须经过处理才能使用。50%的乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01&mol/L碳酸氢钠和0.001&mol/L&EDTA溶液洗涤,再用蒸馏水冲洗后即可使用。实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。使用后的透析袋洗净后可存于蒸馏水中,置4℃保存。若长时间不用,可加入适量的叠氮钠(NaN2),以抑制微生物的生长。干的透析袋弯折时易出现裂口,用时必须仔细检查。&
&&&&经过处理的透析袋,使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满蒸馏水,用手指稍加压,检查是否漏液,确证无误后,再用蒸馏水洗净,方可装入待透析样品。装入样品时通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,因透析样品中的小分子浓度较大,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加是正常的,有时甚至可达50%以上。透析可以使用烧杯、量筒和塑料桶等容器,容器的大小以20-50:1为宜。少量样品溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。&
&&&&通常为了把握透析效果,有时需要对透析液中欲去除的小分子残留物进行分析,如甘氨酸、二甲基甲酰胺、甲醛、戊二醛、碳酸根、偶联剂等。小分子残留物的检测分析方法很多,如&(NH4)2SO4可用1%的BaCl2检查,NaCl、KCl等可用1%的AgNO3&检查。有些检测方法比较复杂,或需要一定的条件,如确有必要可参考相关文献资料。&
&&&&为了加快透析速度,提高透析效率,除及时更换透析液外,还可使用磁力搅拌,还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。美国生物医学公司(Biomed&Instruments&Inc.)生产的各种型号的Zeineh&透析器,由于使用对流透析的原理,使透析速度和效率大大提高。
附:普通透析袋的处理
&1.&根据需要,把透析管剪截成适当长度(10&20cm)。
&2.&在大体积的2%(w/v)碳酸氢纳和1mmol/L&EDTA(pH8.0)中将透析管煮沸10分钟
&3.&用蒸馏水彻底清洗。
&4.&于EDTA(1mmol/L,pH8.0)中煮沸10分钟,&
&5.&或将透析管置盛有蒸馏水的烧杯内,高压蒸汽灭菌10分钟。
&6.&冷却后,存放于4℃。透析管必须确保始终浸于溶液中。
&7.&从此时起取用透析管时总须戴手套。
&8.&用前将透析管用蒸馏水清洗干净后即可使用。
产品订购说明:
1、绝大部分产品备有现货(公司库存现货3000多种),一般情况下都能订货当日发货。&
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。&
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日最新价格为准。
4、每日订单截止时间为17点30,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请***完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、电话等以传真、EMail、短信、电话等形式通知我们。&
6、详情请咨询010-&联系人:张净花
北京索莱宝科技有限公司不仅提供优质的产品同时提供优质的服务
目前直接使用单位:
&&&&北京大学、北京大学医学部、清华大学、北京林业大学、中国人民解放军总医院(301医院)、中国食品药品研究所(中检所)、中国协和医科大学基础研究所(基础所)、北京协和医院、军科院、复旦大学、广东省农科院果树研究所、杭州师范大学、河南农业大学、黑龙江省农垦科研育种中心、华东师范大学、华中农业大学、吉林省农科院生物技术中心、吉林省农业科学院、吉林省农业科学院生物技术研究中心、江南大学、江苏省农业科学院&、南京大学、南京农业大学、南京农业大学水稻研究所、内蒙古科技大学、山东师范大学、山西省农业科学院棉花研究所、上海辰山植物科学研究中心、上海辰山植物园、上海大学、上海交通大学、上海隆平农业生物技术有限公司&、上海农科院、&上海应用技术学院、深圳华大基因研究院、沈阳农业大学、四川大学、四川农业大学生理院生化教研室、苏州大学、同济大学、潍坊科技学院、西北农林科技大学、扬州大学、浙江大学、浙江省农业科学院、中国科学院动物研究所、中国科学院青岛生物能源与过程研究所、中国科学院微生物研究所、中国农业大学、中国农业科学院、中国农业科学院生物技术研究所、中国农业科学院油料作物研究所、中国农业科学院油料作物研究所、中国农业科学院植物保护研究所、中国热带农业科学院生物技术研究所、中国热带农业科学院橡胶研究所、中国水稻研究所、中科院成都生物科研所、中科院上海计算生物学研究所和中科院植生所等单位。
公司简介:
&&&&北京索莱宝科技有限公司始创于2000年,是一家集产品研发、生产、销售、服务于一体的大型高科技生物企业。
&&&&公司总部坐落于北京中关村科技园区,拥有1200平米研发生产中心,2000平米仓储基地,并配有先进的物流系统。同时在全国30多个省市设有分公司及直销、分销机构。服务网络覆盖全国,是国内最大的生命科学研发试剂供应商之一。并通过阿里巴巴国际网站将产品输入美、日、欧等发达国家,得到了国际市场的高度认可。目前公司提供的产品近万种,超过5000种常备现货,涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等相关领域,并不断推陈出新扩充种类,为用户提供最优秀、最专业的产品。
&&&&公司拥有数十名由博、硕士组建的专业研发技术团队,并聘请了众多国内知名专家担任技术顾问。严格按照GMP和ISO9000标准生产和管理,致力于为用户提供最先进的试剂,最完善的解决方案,致力于打造国际一流的民族品牌。
&&&&&为科研服务,为生命尽责&。是每一个索莱宝人发自内心的服务理念。
&&&&同时,我们建立了一套先进的企业-高校合作模式,共同利用彼此平台和优势,互通有无,并为高校学生提供各项实验技能培训,实现双赢。此时,我们也期待能与更多科研单位深入合作,共同为中国生命科学研究的发展而努力,互惠共赢。
&&&&Solarbio品牌的诞生,是中国民族企业在生命科学领域的一次大胆挑战,面对几乎被外国企业垄断的市场,面对严酷的竞争环境,索莱宝人依然坚定不移的走自主品牌战略,立足国内,放眼全球,为中国生命科学产业的发展默默的付出自己的努力。同时,我们也相信,不久的未来中国民族生物企业也一定能够屹立于世界最高端!
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请填写所需产品描述请问关于透析袋及其使用
03:16:59&&&来源:&&&评论:&&
[请问关于透析袋及其使用] 因实验需要,要使用透析带(不是透析袋),因为很贵,想问一下, 透析带一般能重复使用几次?使用前后的处理方法?另外,网络上有提到透析袋和透析膜两种,好像前处理方法不同,想问一下这两种透析用品有什么差别?另外能否推荐一些透析袋厂商?最好分子量在左右的,性价比高一点的吧。 关键词:[透析袋 分子质量 透析 半透膜 有限公司 分子大小 溶液]…
因实验需要,要使用透析带(不是透析袋),因为很贵,想问一下, 透析带一般能重复使用几次?使用前后的处理方法?
另外,网络上有提到透析袋和透析膜两种,好像前处理方法不同,想问一下这两种透析用品有什么差别?
另外能否推荐一些透析袋厂商?最好分子量在左右的,性价比高一点的吧。回复好的一般是pierce 质量要好,
国产的像生工也有
透析袋我们一般都不重复利用的 会对你下次的透析产生影回复
好的一般是pierce 质量要好,
国产的像生工也有
透析袋我们一般都不重复利用的 会对你下次的透析产生影 生工是指哪家公司?回复
好的一般是pierce 质量要好,
国产的像生工也有
透析袋我们一般都不重复利用的 会对你下次的透析产生影 质量一般的就可以了回复我只用过pierce的国产的没有用过 效果不知道如何
你看看上海生工的目录吧我记得是有的价格应该比pierce的便宜好多回复
生工是指哪家公司? 应该是上海工程有限公司吧回复
应该是上海工程有限公司吧 貌似百度不到这家公司回复
貌似百度不到这家公司 /
生工生物(上海)有限公司回复透析袋的处理
分子在半透膜间的分离是由膜两侧溶液的浓度差驱动的,受相对于膜内微孔尺寸的分子大小(分子质量)的限制。微孔尺寸决定着截留分子质量,截留分子质量的定义是当90%的溶质分子可被膜截留时的分子质量。实际某一溶质的通透性不仅取决于分子的大小,还取决于分子的形状、分子的水化程度及其所带的电荷。这些参数均受溶剂的性质、pH以及离子强度的影响。因此截留分子质量只能作为参考,而不能绝对地用来预测在各种溶质和溶剂下的透析行为。市售的透析膜孔径范围很大(从100Da到2 000kDa)。在透析大多数质粒DNA和许多蛋白质时,截留分子质量在1Da之间比较适合。
(1)将透析管剪成适当长度(10~20cm)的小段,即形成透析袋。
(2)在大体积的2%(m/v)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10 min。
(3)将透析袋用水彻底漂洗。
(4)将透析袋置1 mmol/L EDTA(pH 8.0)中煮沸10min。
(5)待透析袋冷却,存放于4℃,应确保透析袋始终浸没在液体中。
重要:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
(6)在使用之前要用水将透析袋里外加以清洗。
也可将透析袋放在广口瓶中充满水,松动瓶盖,于20psi(1.40 kg/cm2)高压灭菌10min代替第4步用1 mmol/L (pH8.0)煮沸10min的操作。
使用完后将浸泡在70%乙醇中以免长菌。回复
分子在半透膜间的分离是由膜两侧溶液的浓度差驱动的,受相对于膜内微孔尺寸的分子大小(分子质量)的限制。微孔尺寸决定着截留分子质量,截留分子质量的定义是当90%的溶质分子可被膜截留时的分子质量 ... 那使用后呢?透析袋难道就只用一次,然后就扔掉了?回复生工是上海生工生物工程有限公司啦~我是这个公司员工,厦门办事处
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频道本月排行实验室透析常见问题解答
来源:仕必纯贸易(上海)有限公司
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实验室透析常见问题解答
Q1:如何准备透析膜管?
透析膜管的准备因膜管材质和生产工艺的差别而有所不同。注意,我们不推荐煮沸处理,因其可能损坏膜管并改变膜孔径。
A)生物技术级RC、CE及PVDF膜可以用DI水冲洗15-30分钟,去除防腐剂叠氮化钠。
B)Spectra/PorR 7 标准级RC膜已经预处理,去除了重金属和硫化物,只需在去离子水中浸泡15-30分钟,去除叠氮化钠即可。
R 1-6 标准级RC膜,一般情况下,在水中漂洗足以去除甘油或防腐剂,而对于亲和研究之类极其敏感的透析应用或者重金属及硫化物会影响透析样品下游分析的应用,可能需要一些额外的处理以去除在生产过程中引入的痕量水平重金属及硫化物,仕必纯提供两种膜预处理溶液:及,具体产品信息请参考“”网页说明。
Q2:透析的原理是什么?一般需要多长时间才能完成?
透析是指溶质在浓度梯度的驱使下,选择性扩散通过半透膜,从而达到大/小分子分离,膜两侧浓度平衡,即小颗粒的溶质通过膜,而大分子物质不能通过,被截留在膜另一边。
如果将样品置于透析膜管内,通过置换膜管外部的透析缓冲液,可将小颗粒物质清除,从而达到纯化大分子物质的目的。一般来说,一天之内置换3-5次缓冲液,然后在室温条件下,放在搅拌台上隔夜透析,即可达到高效的透析结果。标准的透析操作一般需要16-24小时。许多因素会影响透析效率,包括:扩散系数、pH值、温度、时间、物质浓度、样品体积、透析缓冲液体积、透析缓冲液的置换次数、膜表面积、膜厚度、分子带电荷及缓冲液搅拌速率。
Q3:透析一个样品需要多少体积的透析缓冲液?缓冲液置换频率怎么安排?
透析缓冲液的体积越大,小分子扩散的驱动力越大。我们一般推荐缓冲液和样品的体积比为100:1。当扩散速率降低,膜两侧溶液趋于平衡时,通过置换缓冲液,可维持小分子扩散驱动力和透析速率。我们一般推荐在12-24小时内,置换缓冲液2到3次,具体安排如下:
第一次缓冲液置换:透析开始后2-3小时
第二次缓冲液置换:透析开始后4-5小时
最后一次缓冲液置换:透析隔夜之前
Q4:如何选择正确的截留分子量(MWCO)?
截留分子量应该竟可能的大,以使透析速率最大化。但是,为了获得最大的样品回收率,选择的截留分子量应至少为需纯化的大分子物质分子量的一半。对于需对几种分子进行分离的应用,分子之间的分子量差至少为5倍,才能完成有效的膜透析。若不能满足分子量差的要求,可能需要使用其它的分离技术,如色谱方法或切向流过滤。
Q5:那种膜的蛋白质结合率最低?
每种膜对不同的分子具有不同的亲和性。对于球状蛋白,相对的结合亲和性由低到高为 CE& RC
Q6:怎样为膜管选择合适大小的膜夹?
标准RC膜(Spectra/Por 1-7)和生物技术级RC膜由柔韧的再生纤维素聚合物制造,可使用任何一种透析膜夹密封。生物技术级CE & PVDF膜由相对刚性的聚合物制造,需要使用相对温和的通用膜夹。鉴于通用膜夹对于所有类型的膜管都能起到很好的密封作用,如不确定选择哪种膜夹合适,使用通用膜夹即可。标准膜夹一般只用于标准级RC膜管。
膜夹的密封宽度一般需比膜管的扁平宽度长4-10 mm。通用膜夹的最小密封宽度为50 mm。对于所有扁平宽度规格的仕必纯生物技术级膜管,均有相应的膜夹可供选择。
Q7:透析膜的保存时间为多长?
干包装的透析膜可保存5年。湿包装的透析膜(0.1% 的叠氮化钠溶液)保存期限为3年。辐照灭菌的透析膜可保存1.5年。
Q8:透析膜变干或冻存之后是否仍可使用?
湿润的透析膜变干之后,孔径受到不可逆的影响,膜变得脆弱易碎,容易泄露,不推荐继续使用。
透析膜冻存之后,冰晶会使膜破裂,导致泄露,此时不推荐使用该膜。
Q9:透析膜完全不含内毒素吗?
仕必纯确认所有透析膜不含有内毒素,符合普通实验室使用规格要求。
Q10:我需要担心透析膜上的皱纹、滚痕或折线吗?
只要膜是完整的,滚痕或者折线不会影响膜的扩散特性。
Q11:CE膜比RC膜更具刚性,且不透明吗?
纤维素酯(CE)膜内的聚合物交联形成相对刚性的晶格,而再生纤维素(RC)聚合物形成更加柔韧的网格结构。不透明性是由网格中孔眼的大小所决定的,孔眼越大,膜越不透明。
Q12:透析膜可以化学密封或热密封吗?
CE和RC透析膜只能机械密封,但PVDF透析膜可以机械密封或热密封,通常用于样品“封装”目的。
Q13:处理相同的蛋白样品,Spectra/PorR 透析膜可重复使用吗?
我们不推荐重复使用透析膜,因为特定的处理操作可能会对膜造成污染,一定的透析条件(pH值、温度、化学接触等)也会对膜的完整性造成损害,和/或导致泄漏,特别是在打开和重新夹上膜夹时。
Q14:膜孔径有多精确,什么是MWCO?
透析膜微观下呈海绵状结构,因此,更适合通过评定其截留性能来间接地定义“孔径”,亦即“截留分子量”(Molecular Weight Cut Off,MWCO)。MWCO定义为在17个小时内,膜截留率为90%的溶质分子量。基于此定义,选择透析膜时,MWCO应小于需要截留的分子的大小。
Q15:透析膜Spectra/PorR &2和4有什么区别?
R &2和4都有12-14 kD的截留分子量。Spectra/PorR 透析膜更适合温和透析,Spectra/PorR 2可提供特定的更大和更小的扁平宽度,和/或渗透性;也就是说,Spectra/PorR 2的水渗透性比Spectra/PorR 4更优越。
Q16:关于膜表面积和样品量之间的关系有没有经验法则?
表面积与体积的比值取决于膜管扁平宽度。如果有两段相同长度的膜管,扁平宽度较小的膜管具有较高的比表面积,而扁平宽度较大的膜管比表面积相对较小,也就是说,前者的透析速率更快。原因是扁平宽度较小的膜管,溶质的扩散距离较短,溶质之间通过膜孔的竞争也较小。而扁平宽度大,亦即溶质到达膜表面的距离也较长,溶质之间对膜孔的竞争也较大。一般而言,比表面积越大,透析越快。
Q17:如果膜两侧的摩尔渗透压浓度相等,但浓度梯度仍然存在,物质的通过效率如何?
大多数透析结束时膜两侧渗透压相同。透析过程是由膜管内外两侧的浓度梯度驱动的。如果渗透压力有很大的差别,水会通过膜以平衡膜两侧的渗透压。如果过多的水通过膜,透析膜管可能会随水运动的方向增大或缩小,在体积增加到一定程度时,有可能导致膜夹松动或膜管破裂。
Q18:进行超滤时,透析膜能承受多大的压力?
透析膜设计不适合用于压力过滤。在不影响截留分子量的前提下,最大推荐压力为1.5 psi。
Q19:一般推荐使用哪种透析液(缓冲液)?
生物分子必须保存在严格的pH值控制条件下,以稳定其分子极性。典型的透析缓冲液pH范围为6-8。以下为常用的几种可以作为缓冲液的生化溶液:
l氨基酸缓冲液
Q20:为什么使用微米vs道尔顿(MW)单位,怎么转换?
溶解的分子大小以分子量来定义,单位为道尔顿,而颗粒和细胞大小常以直径来定义,由于分子的结构和形态不同,相同分子量的物质,分子大小和形态可能相差较大,两者之间没有精确的对应关系。出于这个原因,许多常见的生物材料都已特别定性,并将大约的尺寸标注在转换表上作为估算的参考,以用于透析、超滤和微滤应用。道尔顿与微米单位之间的转化,请参考仕必纯官网“”。
Q21:对于盐浓度较高的样品,最佳的透析方法是什么?
如果可能,我们推荐使用低盐浓度的缓冲液。不推荐直接使用纯DI水作为缓冲液,因为渗透压力可能将水引入膜管,使样品体积膨胀并可能导致膜管破裂。使用一系列浓度逐渐降低的溶液作为缓冲液可防止渗透压力导致的膜管膨胀。每次缓冲液置换,可将溶质浓度降低十分之一,也就是说,透析一个5M NaCl的样品,可使用500 mM NaCl的缓冲液。
Q22:可以使用绳子结扎膜管,而不使用膜夹吗?
我们不推荐使用绳子结扎膜管。因为绳结对膜管的损害具有很大的不确定性,并且可能不能提供有效的密封,而导致泄露。只有膜夹才能提供足够的密封性,从而保护样品。
Q23:透析膜管应该剪多长?
对于每种膜管扁平宽度,仕必纯提供相关的容积/长度比,可方便计算透析样品所需的膜管长度。如果扁平宽度为16 mm,容积/长度比为0.79 ml/cm,要容纳5 ml的样品,则需要大约6.5 cm长的膜管。但是,为保持样品漂浮,一般需要在顶部空间预留10-20%膜长(约为1 cm)。此外,也需在两端为膜夹各预留2 cm。所以总的膜管长度应至少为11.5 cm。
可根据以下公式计算膜管长度:
总长度=(样品体积)/(容积/长度)+(额外的10-20%)+4 cm
浏览网页,使用仕必纯,根据样品体积和扁平宽度,计算所需的膜管长度。
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