李斯特菌_百度百科
斯特菌（学名：Listeria monocytogenes），又名单核球增多性李斯特菌、李氏菌，是一种兼性厌氧细菌，为李斯特菌症的病原体。李斯特菌是革兰氏阳性菌，属厚壁菌门，取名自约瑟夫·李斯特。它主要以食物为传染媒介，是最致命的食源性病原体之一[1]
。李斯特菌在环境中无处不在，在绝大多数食品中都能找到李斯特菌。、蛋类、禽类、海产品、乳制品、蔬菜等都已被证实是李斯特菌的感染源。李斯特菌中毒严重的可引起血液和脑组织感染，很多国家都已经采取措施来控制食品中的李斯特菌，并制定了相应的标准。
李斯特菌概况
国际上公认的李斯特菌共有十个菌株：
1．增生李斯特菌(L.monocytogenes)
2．绵羊李斯特菌 (L.iuanuii)
3．英诺克李斯特菌(L.innocua)
4．李斯特菌(L.welshimeri)
5．西尔李斯特菌 (L.seeligeri)
6．格氏李斯特菌(L.grayi)
7．默氏李斯特菌 (L.murrayi)(存疑，WHO以及The Prokaryotes(
Rosenberg, Eugene & DeLong, Edward F.)中10个species里有L. marthii 而没有L. murrayi)
8. L. rocourtiae
9. L. fleischmannii
10. L. weihenstephanensis　　
其中根据16S rRNA序列，L. grayi已经从genus Listeria中分离出去,属于genus murraya。
其中单增李斯特菌是唯一能引起人类疾病的。单核增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一种常见的，在土壤中它是一种，以死亡的和正在腐烂的为食。它也是某些食物（主要是鲜奶产品）中的一种污染物，能引起严重。单核细胞增生是一种人畜共患病的。它能引起人、畜的李氏特菌病，感染后主要表现为、和单核细胞增多。它广泛存在于中，食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。关于在一系列不同生长条件下单核增生李斯特菌（细胞中的全部mRNA转录体）的一项新的研究，搞清了从腐生到致病生活方式的这种转变的性质。该研究的数据显示了一个转录程序，其复杂程度出乎意料，它涉及50个，同时还有一系列新的调控RNA，包括几个长反义。在感染过程中，李斯特菌通过协调的全组转录变化成功重塑其转录程序，其中某些非编码RNA优先在小肠或血液中生长的细胞中表达。
李斯特菌特点
1．分布广：存在于、水域(地表水、污水、废水)、、、、、、、。
2．生存环境可塑性大：能在2-42℃下生存(也有报道0℃能缓慢生长)能在冰箱冷藏室内较长时间生长繁殖。
3．适应范围大：酸性、碱性条件下都适应。
4．带菌较高的食品有：牛奶和乳制品；(特别是牛肉)；蔬菜；沙拉；海产品；冰淇凌等。
李斯特氏菌广泛分布在自然界中，在腐烂的植物、土壤、动物粪便、污水、青贮饲料和水中均可找到其踪迹。总体上说，李斯特氏菌可能存在于有乳酸菌、索丝菌和一些棒状杆菌生活的地方。它们和奶制品、青贮饲料的关系，与乳酸菌与这些产品的关系一样，是众所周知的。在苏格兰进行的一项针对海鸥粪便、白嘴鸦和青贮饲料的研究中发现，在污水处理场觅食的海鸥携带李斯特氏菌的比例比其他地方要高，白嘴鸦粪便样品中通常含有少量的李斯特氏菌。单核细胞增生李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌是经常发现的菌种，而西尔李斯特氏菌仅在一份样品中被发现。在这个研究中，44%的发霉的青贮饲料和22．2%的大捆的青贮饲料中发现了单核细胞增生李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌。在丹麦，75个青贮饲料样品中的15%呈单核细胞增生李斯特氏菌阳性，75个母牛的粪便样品中52%含该菌。在pH值高于和低于4．5的青贮饲料中均发现单核细胞增生李斯特氏菌。在麦地、牧场、淤泥、动物粪便、野生动物饲养场及其他相关来源的8．4%～44%的样品中分离到了此菌。已经证实单核细胞增生李斯特氏菌可以在潮湿土壤中存活295天甚至更长。在对加利福尼亚沿海水域的研究中，37个淡水或者低盐水样品中的62%与46个淤泥样品中的17.4%呈阳性，而在35个牡蛎样品中没有培养出单核细胞增生李斯特氏菌[1]
李斯特菌流行情况
1999年底，发生了历史上因食用带有李斯特菌的食品而引发的最严重的食物中毒事件，据美国疾病控制和防治中心资料显示，在美国有14人因食用被该菌污染的“热狗”和熟肉而死亡，在另外22个州97人患此病，6名妇女流产。
年出产的奶酪及猪肉中发现李斯特菌，2001年11月以来，我国质检部门多次从、、、、、等二十多家肉类加工厂进口的、猪肚、猪耳、小排等三十多批近千吨猪副产品中检出单增李斯特菌、等。
美国疾控中心日说，美国已有18个州72人因食用受李斯特菌污染的甜瓜而染病.美国《侨报》报道 李斯特菌已致全美16人死亡。这是美国自1998年以来致死人数最多的一次食源性疾病疫情。 　李斯特菌潜伏期长，从食用受污染食品至发病，一般间隔1至8周，因此疾控中心估计，随着10月份更多者的症状开始明显，确诊将持续增多。
李斯特菌比常见的沙门氏菌和某些大肠杆菌更为致命。美国上次暴发李斯特菌大规模感染是在1998年，21人因食用受这种病菌感染的热狗等肉类熟食死亡。1985年，52人死于食用受这种病菌感染的软干酪。
经调查，位于的延森农场是这次大规模感染李斯特菌事件的源头。这家农场从9月14日起宣布召回其生产的“罗基·福特”牌。不过，目前仍不清楚李斯特菌是如何污染这种水果的。美国食品和药物管理局局长马格丽特·汉伯格说，这是首次发现李斯特菌能进入完整的甜瓜内部，该局正努力寻找其原因。延森农场说他们向美国25个州销售了该品牌的香瓜，但食品和药物管理局认为区域可能更广，因为疫情爆发地已经超过了这家农场的销售清单。延森农场说，他们了超过30万盒问题香瓜，每盒5至15个，因而香瓜召回总数在150到450万个之间。
疾控中心主任弗里登说，尽管受污染的香瓜已经下架，这种病菌仍可能“作乱”，因为它生命力强，能在甚至冰箱内存活。
李斯特菌通常在过期速食、黄油、冻肉和奶酪上蔓延滋长。食品和药物管理局说，全美每年有大约800例李斯特菌染病病例，大多数因为食用上述食品，农产品一般不是使人染病的元凶。老年人、孕妇和慢性病患者等免疫力较差人群最易感染李斯特菌。疾控中心说，13名死者多是年长者，平均年龄为78岁。
据悉，一旦感染李斯特菌，轻则出现发烧、肌肉疼痛、恶心、腹泻等，重则出现头痛、颈部僵硬、身体失衡和痉挛等症状。受感染的孕妇可能出现早产、流产和死产，婴儿健康也可能受影响。[2]
李斯特菌流行病学
单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中，不易被冻融，能耐受较高的，在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以动物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播。据报道，健康人粪便中单增李氏菌的携带率为0.6-16%,有70%的人可短期带菌，4-8%的水产品、5-10%的奶及其产品、30%以上的肉制品及15%以上的家禽均被该菌污染。人主要通过食入软奶酪、未充分加热的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、、冰激
李斯特菌落
凌、生牛排、羊排、卷心菜、芹菜、、法式馅饼、冻猪舌等而感染，约占85-90%的病例是由被污染的食品引起的。
该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进入体内而造成感染，孕妇感染后通过胎盘或产道感染胎儿或新生儿,栖居于阴道、子宫颈的该菌也引起感染，性接触也是本病传播的可能途径，且有上升趋势。
季节性特点：春季可发生，而发病率在夏、秋季呈季节性增长。
食品种类：主要食品有乳及乳制品、肉制品、水产品蔬菜及水果。
食品中李斯特菌的污染来源和中毒的原因：
牛乳中李斯特菌的污染主要来自粪便；由于肉尸在屠宰过程易污染，在销售过程中，食品从业人员的手也可造成污染。由于该菌能在冷藏条件下生长繁殖，雇用冰箱冷藏食品，不能抑制它的繁殖。该菌重度主要为大量李斯特菌的活菌侵入肠道所致；此外也与李斯特菌溶血素O有关[1]
李斯特菌致病性
单增李斯特菌进入人体是否得病与菌量和宿主的年龄免疫状态有关，因为该菌是一种细胞内寄生菌，宿主对它的清除主要靠细胞免疫功能，因此，易感者为新生儿、孕妇、40岁以上的成人，免疫功能缺陷者。
李斯特菌潜伏期
在感染后3-70天出现症状，健康成人可出现轻微类似流感症状，易感者突然发热，剧烈头痛、恶心、呕吐、腹泻、败血症、脑膜炎、孕妇出现流产。
单增李氏菌的结构与毒力无关，它的致病性与毒力机理如下：
1．寄生物介导的细胞内增生，使它附着及进入肠细胞与。
2．抗活化的巨噬细胞，单增李氏菌有细菌性，使它能抗活化巨噬细胞内的过氧物（为杀菌的毒性游离基团）分解。
3．溶血素，即李斯特溶血素O，可以从培养物上清液中获得，为SH活化的细胞溶素，有α和β两种，为毒力因子。
李斯特菌临床表现
健康成人个体出现轻微类似流感症状，新生儿、孕妇、患者表现为呼吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性、发热、抽搐、昏迷、、脑膜炎、败血症直至死亡。
李斯特菌控制
单增李斯特氏菌在一般热加工处理中能存活，热处理已杀灭了竞争性群，使单增李斯特氏菌在没有竞争的环境条件下易于存活，所以在食品加工中，中心温度必须达到70℃持续2分钟以上。单增李斯特氏菌在中广泛存在，所以即使产品已经加工处理充分了单增李斯特氏菌，但有可能造成产品的二次污染，因此蒸煮后防止二次污染是极为重要的。由于单增李斯特氏菌在4℃下仍然能生长繁殖，所以未加热的冰箱食品增加了食物中毒的危险。冰箱食品需加热后再食用，如果是生鱼片之类的海鲜，专业酒店都会存放于零下40摄氏度左右的大型冰柜，以确保杀灭寄生虫及防止感染。
[美]杰伊，[美]罗西里尼，[美]戈尔登．现代食品微生物学．北京：中国农业大学出版社，2008
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单核细胞增生李斯特菌及其检验&Listeria monocytogenes
单核细胞增生李斯特菌 (L. monocytogenes)归属于李斯特菌属(Listeria)。单核细胞增生李斯特菌是李斯特菌属中唯一对人致病的病菌。
&&& 李斯特菌是一种细胞内寄生菌，它不仅可能存在于肉类产品中，也可能存在于乳制品、蔬菜、沙拉及海产品等日常食物里面。此菌广泛分布于自然界中，在土壤、排污下水、地表水、青贮饲料、烂菜中均可分离到。人也可作为无症状携带者。据报道，健康人粪便中该菌的携带率为0.6％～16％，4％～8％的水产品、5％～10％的奶及其制品、30％以上的肉制品及15％以上的家禽均被该菌污染。李斯特菌能在1～45℃的温度下生存，能在家用电冰箱的冷藏室内较长时间生长、繁殖。
&&& 人感染的主要来源是食用被该菌污染的食品，主要通过粪-口途径传播。自然感染的传播途径包括消化道、呼吸道、眼结膜以及皮肤损伤。本菌主要引起致死性的脑膜炎和脓毒症，孕妇流产和新生儿细菌性脑炎。此菌的致病力强，尤其是免疫缺陷病人感染后，病死率可高达30%～70%。近几年来，李斯特菌病已呈世界性分布，北美和西欧等许多国家人食源性李斯特菌病日渐增多，且引起多起病人的死亡。因此，食品中存在的单核细胞增生性李斯特氏菌对人类的安全具有危险，如今已有20多个国家把它列为“食品致病菌”。
二、生物学特性
(一)形态与染色特性
该菌为革兰氏阳性短杆菌，有的菌体略弯曲，两端钝圆，大小约为0.4～0.5&m & 0.5～2.0&m。多单在，有时是V字型排列。& 无芽孢，不产生荚膜。在陈旧培养物中或粗糙型菌落的菌体长度可达6～20&m或更长的丝状。在20～25℃培养时可产生2～4根鞭毛而运动，但在37℃培养时鞭毛发育不良，无运动性。
(二)培养特性
本菌需氧或兼性厌氧，生长温度为1～45℃，最适温度为30～37℃。对营养要求不高，可在普通培养基中生长，但在血培养基或胰酪胴琼脂上生长更好。加入0.2％～1％(W/V)的葡萄糖及2％～3％(V/V)的甘油生长更佳。在含1%(W/V)NaCl的复合培养基中能生长。在4℃可缓慢增殖，形成菌落约需7d。
在液体培养基中培养18～24h后，肉汤呈轻度均匀混浊，数天后形成粘稠沉淀附着于管底，摇动时沉淀呈螺旋状，继续培养可形成颗粒状沉淀。不形成菌环、菌膜。
在营养琼脂上，光滑(S)型可形成直径0.5～1.5mm、圆形、露滴状半透明、低隆起、边缘整齐、表面有细致纹理的蓝灰色菌落，斜射光照射时，菌落呈特征性蓝绿光泽。R型菌落表面起伏不平，边缘不整齐，细菌难以乳化。
在血液琼脂培养基上，可形成狭窄的β-溶血环，常不超出菌落边缘，移去菌落才可见。弱溶血或疑似溶血菌株可用协同溶血试验(CAMP)鉴定。
半固体培养基：沿穿刺线呈云雾状，随后缓慢扩散，在培养基表面下3～5mm处呈伞状。
(三)生化特性
该菌接触酶阳性，阴性。能发酵多种糖类，产酸不产气，如发酵葡萄糖、果糖、海藻糖、乳糖、鼠李糖、麦芽糖、山梨糖，不发酵木糖、阿拉伯糖、棉子糖、蔗糖、甘露醇、蜜二糖、菊糖、纤维二糖和侧金盏花醇。不利用枸橼酸盐。不还原硝酸盐，不产生靛基质和硫化氢。甲基红及VP试验呈阳性。不液化明胶和凝固。可水解七叶苷和马尿酸钠。
(四)抵抗力
该菌对理化因素抵抗力较强，在土壤、粪便、青贮饲料和干草内能长期存活。对碱和盐的抵抗力强。常规的巴氏消毒法不能杀灭它，60～70℃经30 min才能杀死此菌。该菌体外试验对青毒素、氨苄青霉素、四环素均敏感，对土霉素敏感性差，对磺胺、枯草杆菌素和多粘菌素有抵抗力。
Listeria monocytogenes is a Gram-positive rod-shaped bacterium. It is the agent of listeriosis, a serious infection caused by eating food contaminated with the bacteria.
The disease affects primarily pregnant women, newborns, and adults with weakened immune systems.
Listeriosis is a seriou the overt form of the disease has a mortality greater than 25 percent. The two main clinical manifestations are sepsis and meningitis. Meningitis is often complicated by encephalitis, a pathology that is unusual for bacterial infections.
This normal inhabitant of the gastrointestinal tract and of animal feces led to a 1986 outbreak in Massachusetts hospital patients.
Oxoid Limited has launched a new chromogenic medium for the improved isolation, enumeration and identification of Listeria from food samples.& In addition to providing presumptive identification of Listeria species, Oxoid Chromogenic Listeria Agar ( OCLA ) Plate (PO5165A) is also able to differentiate pathogenic Listeria monocytogenes and Listeria ivanovii from other Listeria species.
常规细菌学检验 &&检验规程见GB/T 03
1. 涂片镜检&&& 用生理盐水制成菌悬液，在油镜或下观察，该菌出现轻微旋转或翻滚样的运动。
2. 增菌培养&&& EB增菌液30±1℃培养48h～7d。LB1增菌液培养24h，取出0.1mL，加入10mL LB2增菌液中二次增菌。
3. 分离培养&&& 将EB增菌液和LB2二次增菌液划线于选择培养基琼脂平板上，30±1℃48h，挑选可疑菌落，用白炽灯斜光照射平板，李斯特氏菌的菌落为灰蓝或蓝色、小的圆形菌落。
选5个以上的上述可疑菌落接种三糖铁(TSI)琼脂和EIM动力培养基，培养于25±1℃，观察是否有动力，及成伞状或月芽状生长。一般观察2～7d，阳性者可做下一步鉴定。将上述有动力、形成伞状者并在三糖铁琼脂培养基上层、下层产酸而不产硫化氢的可疑培养物接种于胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA-YE)上，做纯培养供做以下鉴定。
4. 细菌鉴定
(1)对小鼠的致病力试验：取0.5mL浓缩菌液注射小白鼠腹腔，接种3～5只，观察小鼠死亡情况。致病株2～5d 内死亡。单核细胞增生李斯特氏菌对小鼠有致病性，在肝和脾可见到局部坏死，并能从脏器和心血中分离出细菌。
(2)协同溶血试验(CAMP)：在血平板上平行接种金黄色葡萄球菌和马红球菌(R.equi)，在它们中间垂直接种可疑李斯特氏菌，但不要触及，30℃培养24～48h，检查平板中垂直接种点对溶血环的影响。靠近金黄色葡萄球菌接种点的单核细胞增生李斯特菌的溶血增强，西尔李斯特氏菌的溶血也增强，而绵羊李斯特氏菌在马红球菌附近的溶血增强，有助于鉴别。
5. 结果报告&&& 根据病料涂片镜检结果可作出初步判断；依据细菌分离培养和细菌鉴定的各项试验结果，可作出从检样中检出单核细胞增生李斯特菌的报告。
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各位朋友，本人第一次接触李斯特菌，想要培养李斯特菌，想问下它的液体、固体培养基可以用LB液体培养基和营养琼脂固体培养基么？不能的话应该用什么呢？最好是便宜点的，如果可以给个配方之类的，不胜感激啊！
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1.李斯特菌：为革兰阳性杆菌，营养要求不高，在含有肝浸液、腹水、血清或葡萄糖的培养基中生长良好，在5%养血平板上形成细小圆形光滑而有狭窄beta溶血圈的菌落。常用头孢菌素类或beta内酰胺类或青霉素类抗生素药杀菌，具体那种要做药敏试验才能确定。
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营养要求不高的话，那用LB液体培养基和营养琼脂固体培养基来培养也是可以的对吧。
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5.1 增菌以无菌操作取样品25 g（mL）加入到含有225 mL LB1增菌液的均质袋中，在拍击式均质器上连续均质1 min～2 min；或放入盛有225 mL LB1增菌液的均质杯中，8000 r/min～10000 r/min均质1 min～2 min。于30 ℃±1 ℃培养24 h，移取0.1 mL，转种于10 mL LB2增菌液内，于30 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。取LB2 二次增菌液划线接种于PALCAM 琼脂平板和李斯特氏菌显色培养基上，于36 ℃±1 ℃培养24 h～48 h，观察各个平板上生长的菌落。典型菌落在PALCAM 琼脂平板上为小的圆形灰绿色菌落，周围有棕黑色水解圈，有些菌落有黑色凹陷；典型菌落在科玛嘉李斯特氏菌显色培养基上为小的圆形蓝色菌落，周围有白色晕圈。5.3 初筛自选择性琼脂平板上分别挑取5 个以上典型或可疑菌落，分别接种在木糖、鼠李糖发酵管，于36 ℃±1 ℃培养24 h；同时在TSA-YE 平板上划线纯化，于30 ℃±1 ℃培养24 h～48 h。选择木糖阴性、鼠李糖阳性的纯培养物继续进行鉴定。5.4 鉴定5.4.1 染色镜检：李斯特氏菌为革兰氏阳性短杆菌，大小为（0.4 μm～0.5 μm）×（0.5 μm～2.0 μm）；用生理盐水制成菌悬液，在油镜或相差显微镜下观察，该菌出现轻微旋转或翻滚样的运动。5.4.2 动力试验：李斯特氏菌有动力，呈伞状生长或月牙状生长。5.4.3 生化鉴定：挑取纯培养的单个可疑菌落，进行过氧化氢酶试验，过氧化氢酶阳性反应的菌落继续进行糖发酵试验和MR-VP 试验。单核细胞增生李斯特氏菌的主要生化特征见表1。5.4.4 溶血试验：将羊血琼脂平板底面划分为20 个～25 个小格，挑取纯培养的单个可疑菌落刺种到血平板上，每格刺种一个菌落，并刺种阳性对照菌（单增李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌）和阴性对照菌（英诺克李斯特氏菌），穿刺时尽量接近底部，但不要触到底面，同时避免琼脂破裂，36 ℃±1 ℃培养24 h～48 h，于明亮处观察，单增李斯特氏菌和斯氏李斯特氏菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环，英诺克李斯特氏菌无溶血环，伊氏李斯特氏菌产生大的透明溶血环。5.4.5 协同溶血试验 （cAMP）：在羊血琼脂平板上平行划线接种金黄色葡萄球菌和马红球菌，挑取纯培养的单个可疑菌落垂直划线接种于平行线之间，垂直线两端不要触及平行线，于30 ℃±1 ℃培养24 h～48 h。单核细胞增生李斯特氏菌在靠近金黄色葡萄球菌的接种端溶血增强，斯氏李斯特氏菌的溶血也增强，而伊氏李斯特氏菌在靠近马红球菌的接种端溶血增强。5.5 可选择API listeria 10300 生化鉴定试剂盒或全自动微生物鉴定系统等生化鉴定系统对5.3 中3 个～5 个纯培养的可疑菌落进行鉴定。
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纯培养的话营养琼脂好像长的不好 还是推荐的TSA-YE好一点，长得多。。
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官方公共微信单核细胞增生李斯特菌血清型、耐药性研究--《中国抗生素杂志》2010年10期
单核细胞增生李斯特菌血清型、耐药性研究
【摘要】：目的了解河北省年91株食源性致病菌单核细胞增生李斯特血清型、耐药性特点。方法血清凝集试验确定实验菌株的血清型;微量肉汤稀释法检测实验菌株对β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、糖肽类、磺胺类等抗生素的药物敏感性。结果 91株单核细胞增生李斯特菌分属5个血清型(1/2a,1/2b,1/2c,4b和3a),主要血清型为1/2a型,占49.5%,分离到8株致病力较强的4b血清型。耐药性分析表明单核细胞增生李斯特菌对四环素耐受最为严重,耐药率为15.4%(14/91),且4.4%(4/91)菌株对强力霉素交叉耐药;少量菌株对临床治疗李斯特菌病抗生素氨苄西林、庆大霉素、复方磺胺甲噁唑、万古霉素、红霉素出现耐药;有2株菌耐5种以上抗生素;所有菌株对氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南、莫西沙星、左氧氟沙星敏感。结论存在具有较强的致病性1/2a,1/2b和4b血清型菌株,及耐药株及多重耐药株出现,说明存在潜在的单核细胞增生李斯特菌引起食品安全问题。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R378【正文快照】：
单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes),是细胞内寄生的革兰阳性短杆菌,一种重要的食源性人兽共患病原菌,能引起人和动物李斯特菌病,如人类的脑膜炎、败血症、肺炎、热性胃肠炎、流产等疾病[1-2],该菌致病性强、致死率高达30%[2]。该菌在自然界分布极为广泛,如土壤、
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