细菌鉴定的细菌分布实验报告告

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-11-13 14:29 标签： 细菌的分布实验报告
细菌的生理生化反应实验报告_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
细菌的生理生化反应实验报告
上传于||暂无简介
阅读已结束，如果下载本文需要使用1下载券
想免费下载本文？
定制HR最喜欢的简历
你可能喜欢第二节 细菌血清学鉴定法-第四军医大学基础医学教学实验中心
┆┆┆┆┆┆┆┆┆
当前位置：教材教案&&教材&&电子教材内容页
第二节 细菌血清学鉴定法
血清学反应是指相应的抗原与抗体在体外一定条件下作用，可出现肉眼可见的沉淀或凝集现象。在微生物检验中，常用血清学反应来鉴定分离到的细菌，以最终确认检测结果，是临床细菌性疾病诊断和病原菌鉴定的重要手段之一。血清学试验可分为血清学鉴定和血清学诊断两部分。用已知抗体(即含特异抗体的免疫血清或单克隆抗体等)检测标本中或分离培养物中未知细菌的种、型或细菌抗原，称为血清学鉴定；而用已知细菌或特异性抗原检测患者血清中有无相应抗体及其效价的动态变化，作为某些感染性疾病的辅助诊断，称为血清学诊断。血清学试验基本类型包括凝集反应、沉淀反应和补体结合反应等。
一、玻片凝集试验
【实验目的】
1. 掌握玻片凝集试验的操作方法，了解其特点和用途。
2. 学习玻片凝集试验结果的观察方法。
【实验原理】
当颗粒性抗原与相应抗体特异结合后，在适量电解质存在的条件下，可逐渐聚集，出现肉眼可见的凝集现象。
【试剂与器材】
1． 诊断血清：1∶10稀释的伤寒杆菌诊断血清。
2． 菌种：伤寒杆菌、痢疾杆菌24 h琼脂斜面培养物。
3． 器材：载玻片、毛细吸管。
4． 试剂：生理盐水。
【实验方法与步骤】
1． 取清洁玻片一张，用蜡笔划为三格，并注明号码。无菌操作下，用接种环于1、2格内加1∶10稀释伤寒杆菌诊断血清1～2滴，第三格加1～2滴生理盐水。
2． 无菌操作下，用接种环取伤寒杆菌培养物少许，混于第三格中，再混于第一格中（不能先混第一格再混第三格，因为这样将使诊断血清混入盐水而影响对照结果），将细菌与盐水或血清混合均匀使呈乳状液。此时取菌量不可过多，使悬液呈轻度乳浊即可。
3． 同法取痢疾杆菌培养物少许，于第二格内混匀。
4． 轻轻摇动玻片，经1～2min后肉眼观察，出现乳白色凝集块者，即为阳性反应；仍为平等的乳浊液者，即为阴性反应。如结果不够清晰，可将玻片放于低倍显微镜下观察。
二、试管凝集反应——肥达反应
【实验目的】
1. 掌握肥达的操作方法，了解其特点和用途。
2. 学习肥达反应结果的观察方法。
【实验原理】
试管凝集反应是一种半定量的凝集反应。常用已知抗原测定受检血清中有无相应抗体及其含量，以辅助临床诊断或供流行病学调查分析。
【试剂与器材】
1． 诊断血清：1∶10稀释伤寒杆菌“H”血清、1∶10稀释伤寒杆菌“O”血清。
2． 菌液：伤寒杆菌“H”菌液、伤寒杆菌“O” 菌液。
3． 试剂：生理盐水。
4． 器材：小试管、吸管。
【实验方法与步骤】
1． 取洁净小试管14只分两排排列于试管架上，每排7只依次用蜡笔注明号码，于每管中分别加入0.5 ml生理盐水。
2． 在第1排第1管中加入1∶10稀释伤寒“H”血清0.5 ml，使血清与盐水充分混合，而后吸出0.5 ml注入第2管，同样予以混匀后吸出0.5 ml注入第3管。以此类推，稀释到第6管，自第6管吸出0.5 ml弃去。此时，自第1管至第6管的血清稀释倍数为1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640。第7管不加血清作为对照。
3． 同法用吸管吸取1∶10稀释伤寒杆菌“O”血清加入第2排第1管，并依次如上法予以稀释。
4． 用移液管吸取伤寒杆菌“H”菌液，加入第1排各管中每管0.5 ml，此时血清稀释倍数又增加了一倍。
5． 同法于第2排各管中加入伤寒“O”菌液0.5 ml。
6． 将各管振荡混匀，放37℃水浴箱中2~4h或37℃孵育箱中过夜，次日取出观察结果。
【观察结果】
1． 对照管无凝集现象，管内液体仍呈混浊状态。但如放置时间较长，细菌堆于管底成小圆点状，为阴性反应。
2． 试验管与对照相比可见管底有不同大小的圆片状边缘不整齐的凝集物，上清则澄清透明或不同程度混浊。凝集的强弱可用“+”号表示如下：
“++++”凝集很强，管内液体完全澄清，凝集块完全沉于管底；
“+++”凝集强，管内液体不完全澄清稍有轻度混浊，凝集块沉于管底；
“++”凝集中等强度，液体半澄清，凝集块沉于管底；
“+”凝集弱，管内液体混浊，少量凝集块沉于管底；
“－”不凝集，管内液体和对照管同样混浊，无凝集块。
3． 记录观察的结果并判断凝集效价。通常以能产生明显凝集（++）的血清大于稀释倍数作为该血清的凝集效价。如血清的最低稀释度（即第1管1:40）仍无凝集应报告为低于1:40。如血清的最高稀释度（即第6管1:1280）仍显完全凝集现象，应报该血清效价高于1:1280。
【注意事项】
观察切勿摇动试管，以免凝集块分散。
&　思 考 题
1. 生理生化反应鉴别细菌的原理是什么？
2. 细菌生理生化反应试验中为什么要设对照？
3. 血清学试验有哪些类型类型？
4. 影响血清学试验的因素有哪些？
第四军医大学基础医学教学实验中心电话：029- Email:jxsyzx@求细菌穿刺实验详细过程
AOI圣诞二0823
目的要求　　1．掌握脓液及穿刺液的标本采集方法.　　2．掌握脓液及穿刺液标本的细菌学检验程序和方法.器材和试剂　　1．标本 穿刺液、脓液或创面分泌物或模拟标本.　　2．培养基 血平板、厌氧培养瓶；O-F试验管、KIA、MIU、硝酸盐还原、柠檬酸盐等常用生化反应管.　　3．试剂 革兰染色液、3％过氧化氢、1％盐酸四甲基对苯二胺、吲哚试剂、新鲜血浆.　　4．其他载玻片、显微镜.步骤和方法　　1．标本采集　　　(1)腹水：由临床医师无菌采集胸腔或腹腔积液5～10ml,置无菌试管中送检.　　　(2)封闭性脓肿：在病灶局部外表,消毒后,用无菌方法穿刺抽取脓液5～10ml,置无菌试管中送检.怀疑为厌氧菌感染时,抽取脓液后立即排尽注射器内空气,将脓液注入厌氧运送小瓶中送检.　　　(3)开放性脓肿：先消毒病灶周围,清理病灶表面,然后用无菌棉签采取病灶深部脓液及分泌物,置无菌试管中送检.　　　(4)大面积烧伤的创面分泌物：烧伤的部位和创面不同,细菌的种类也不同.故应在多部位用无菌棉签采集标本,放人无菌试管中,注明部位后送检.　　　(5)瘘管：可用无菌操作采取部分坏死组织,或用无菌棉签挤压瘘管,选取有特征性的如“硫磺颗粒”送检,也可将灭菌纱布条塞入瘘管中,次日取出送检.2．检验程序见图5—8.3．常见致病菌的检验及报告方式　　　(1)肉眼观察：观察标本的性状、颜色及有无放线菌颗粒.标本呈绿色,可能是铜绿假单胞菌感染；有恶臭的标本可能是厌氧菌或变形杆菌感染；脓液中有“硫磺颗粒”,提示放线菌感染.　　　(2)涂片检查：将标本直接涂片,用革兰染色后镜检,根据镜下细菌的形态和染色特点,可报告“直接涂片找到革兰×性x菌”.　　　(3)需氧菌培养：通常选用血平板和EMB平板做划线分离,35℃孵育18～24h.观察菌落形态,涂片染色观察.根据菌落形态,涂片染色的结果,初步判断细菌的种类,再按各类细菌的鉴定要点进行鉴定.　　　　1)金黄色葡萄球菌：血平板上中等大小、突起、湿润的圆形菌落,有β溶血环,金黄色或白色菌落.涂片染色镜检为革兰阳性、葡萄状排列球菌；触酶阳性,发酵甘露醇,血浆凝固酶阳性,新生霉素敏感,耐热核酸酶阳性.可报告“检出金黄色葡萄球菌”.　　　　2)铜绿假单胞菌：在血平板上,菌落扁平、边缘不整齐、湿润、向四周扩散、培养基上常有水溶性的蓝绿色色素,有β一溶血环和特殊气味.革兰染色为革兰阴性的直杆菌,两端钝圆.氧化酶阳性、氧化葡萄糖和木糖产酸不产气,还原硝酸盐为亚硝酸盐或产生氮气.利用柠檬酸盐、精氨酸双水解酶阳性.42℃生长.符合以上鉴定要求的可报告“检出铜绿假单胞菌”.　　　　3)变形杆菌：在血平板上,菌落扁平呈迁徙性弥漫生长,湿润、灰白色.由于细菌蛋白酶的作用,可见有类似溶血的现象,有恶臭.革兰染色为革兰阴性杆菌,多形性；氧化酶阴性、触酶阳性、苯丙氨酸脱氨酶阳性、KIA：K／A、H2S：+、产气；MIU：动力(+)、靛基质 (+)、脲酶(+).符合以上要求可报告“检出普通变形杆菌”.　　　(4)脓液及穿刺液标本常见的病原菌.见表5—12.表5-12脓液及穿刺液标本常见的病原菌革兰阳性细菌 革兰阴性细菌 球菌 金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌 肠球菌 杆菌 结核分枝杆菌、炭疽芽胞杆菌 产气荚膜梭菌、破伤风梭菌 溃疡棒状杆菌 变形杆菌、大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌 腐败假单胞菌 其他 放线菌、奴卡菌、念珠菌 阴沟肠杆菌 枸橼酸杆菌 粪产碱杆菌 注意事项　　1．脓液及穿刺液标本的性状观察和直接涂片,极其重要.可以指导进一步的检验方向.　　2．直接涂片有细菌,而普通需氧培养无细菌生长,应考虑以下情况：①患者正在接受抗菌药物治疗；②可能是厌氧菌感染；③标本处理不当或培养基不合适.　　3．接种的平板应培养至48小时后,仍无菌生长.可报告“培养48小时无菌生长”.
还有一点不太清楚，假如是枯草芽孢杆菌的穿刺培养的话，需要厌氧环境下培养么？
枯草芽孢杆菌的培养是需要秏氧，因此应在有氧的环境下培养
为您推荐：
其他类似问题
扫描下载二维码君，已阅读到文档的结尾了呢~~
对细胞染色应用率比较高的实验
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
细菌革兰氏染色实验报告
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer-4.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口微生物培养和鉴定实验报告_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
微生物培养和鉴定实验报告
上传于||暂无简介
阅读已结束，如果下载本文需要使用0下载券
想免费下载更多文档？
定制HR最喜欢的简历
下载文档到电脑，查找使用更方便
还剩1页未读，继续阅读
定制HR最喜欢的简历
你可能喜欢

我要回帖

更多关于 细菌的分布实验报告 的文章

 

随机推荐