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肺癌是世界各地癌症致死的主要原因流行病学发病率- 62.5/100,0002012年估计160,000人死于肺癌(NCCN, 2012)年龄-发病高峰为65-74岁；中位年龄为71岁性别-男性略多于女性女性发病率上升，男性发病率保持稳定种族-美国黑人男性发病率最高危险因素吸烟-85-90%的肺癌因吸烟所致吸烟者风险增加13倍二手烟人群患肺癌的风险增加20-30%氡/铀接触石棉接触-累加风险；估计3-4%的病例职业接触致癌物（如二氯甲基乙醚，多环芳香化合物，铬，镍，有机砷）胸部照射史遗传-有家族史并且吸烟者增加罹患肺癌的风险发病机制所有肿瘤发生于呼吸上皮或肺泡细胞两种主要类型小细胞上皮性肿瘤几乎所有病例由于吸烟引起两种亚型95%发生于肺，可以见于肺外部位（如鼻咽、胃肠道、泌尿生殖道）小细胞癌（燕麦细胞）复合性小细胞癌腺癌（非鳞状细胞）-最常见鳞状细胞癌(SCC)大细胞癌（大细胞间变性）发生于肺内衬的腺体组织非小细胞肺癌(NSCLC)-占所有肺癌的85%肺小细胞癌（SCLC）-占所有肺癌的15%其他肿瘤（少见）未分化的支气管的-腺体肿瘤，肉瘤，神经内分泌肿瘤临床表现20%病例无症状，因为其他原因做胸部X线检查时偶然发现症状与肿瘤生长部位有关Eaton-Lambert综合征视网膜剥脱失明周围神经病变亚急性小脑退化皮质变性多发性肌炎常见于肺小细胞癌重症肌无力表现常见于肺小细胞癌杵状指肥大性肺性骨关节病发生率30%常见于非小细胞肺癌常见于腺癌内分泌综合征常见于鳞状细胞癌高钙血症，低磷酸盐血症异位的甲状旁腺素抗利尿激素常见于肺小细胞癌抗利尿激素分泌异常综合征低钠血症常见于肺小细胞癌通常无库欣样表现低钾血症促肾上腺皮质激素上腔静脉综合征心包填塞胸腔积液病理性骨折肾上腺机能不全（少见）气道梗阻-呼吸困难、哮喘食管受压-吞咽困难浸润喉返神经-声音嘶哑浸润膈神经-膈肌麻痹浸润交感神经-霍纳综合征浸润肺尖-肺上沟瘤，上腔静脉综合征眼睑下垂瞳孔缩小眼球下陷单侧无汗中央型-咳嗽、气喘、咳血、喘鸣、呼吸困难、阻塞性肺炎外周型-胸膜/胸壁疼痛、咳嗽、呼吸困难浸润阻塞邻近器官远处转移副肿瘤综合征-常见，可能是肺癌首发的主要症状骨骼/结缔组织综合征神经病学/肌源性疾病综合征血液系统综合征弥散性血管内凝血非细菌性心内膜炎-消耗性心内膜炎转移性血栓性静脉炎-低钙束臂征皮肤综合征不常见皮肌炎黑棘皮症系统性综合征原因未明恶病质、厌食、发热、体重减轻、免疫力低下诊断检测适应症新生的肺肿瘤实验室检测血清检测对诊断肺癌没有帮助，然而基本的检测（如全血细胞计数，肝功能）作为转移性肿瘤的常规检测。其他检测血清中的神经元特异性烯醇化酶(NSE)对肺小细胞癌有诊断价值 &影像学检查胸部X线，CT扫描，MRI作为初步检查病理诊断通过有创检查获取组织进行诊断支气管镜活检纵隔结节活检CT引导下细针穿刺活检开胸肺活检支气管内超声引导下细针穿刺免疫组织化学诊断肺 - CK 7+/CK 20-结直肠 - CK 7-/CK 20+微小RNA (mRNA)表达 - 可用于鉴别非小细胞肺癌和肺小细胞癌非小细胞肺癌阳性/间皮瘤阴性 - CEA-P, b72.3, Ber-EP4, MOC-31, TTF-1典型的CK 7, CK 20阴性神经内分泌标记阳性如chromogranin A, CD56 (NCAM), synaptophysin, NSE低分化鳞癌和小细胞癌的鉴别p63 和 CK 5,6阳性，TTF-1 阴性支持鳞状细胞癌CK 7, CK 20, TTF-1通常阴性无需免疫组化染色特征来诊断CK7、NapsinA和TTF-1阳性，CK20阴性原发性粘液腺癌-CK7和CK20阳性，TTF-1阴性应用D5F3克隆的ALK抗体D5F3克隆 – 比ALK1克隆更敏感只能作为辅助检测并结合临床解释其结果ALK免疫组化-比RT-PCR, FISH检测ALK更有效原发性腺癌和细支气管肺泡癌鳞状细胞癌小细胞癌和神经内分泌癌非小细胞肺癌(NSCLC)腺癌和间皮瘤的鉴别非小细胞肺癌和肺小细胞癌的鉴别转移性腺癌的鉴别原发性肺肿瘤和转移性胃肠道肿瘤的鉴别-CDX2胃肠道肿瘤有特异性肺孤立性结节患者年龄≥35岁结节直径>10 mm病变增大无钙化淋巴结肿大PET扫描发现病变无以前的影像学回顾来判断结节大小的变化35%为恶性通常是X线偶然发现(0.09-0.2%)下述情况下需要组织学诊断预后标记物选择合适的治疗如酪氨酸激酶抑制剂和ALK抑制剂EGFR, KRAS, ALK (D5F3), ROS1-参考关键点章节没有足够的证据推荐对预后有帮助的标记物高水平 - 预示不依赖治疗的非小细胞肺癌有较好的生存期高水平 -&预示对胞苷类化疗反应差高水平 - 预示不依赖治疗的非小细胞肺癌有较好的生存期高水平 - 预示对铂类化疗反应差；低水平则敏感非小细胞肺癌患者预示生存期短，可能适用辅助化疗对肺小细胞癌高度特异性对非小细胞肺癌和肺小细胞癌预后的评估可能有用临床目前应用，但其预后价值未被高水平研究证实非小细胞肺癌最为敏感的肿瘤标记物（特别是鳞状细胞癌）可以作为早期和晚期非小细胞肺癌的独立预后因子，也同样适用于肺小细胞癌可以用来预测治疗反应也能用于泌尿、胃肠道和妇产科肿瘤CK19片段(CYFRA 21-1)NSE神经元特异性烯醇化酶P53 - 肿瘤抑制基因Pro GRP – 肺小细胞癌CA 125 (有用的免疫组化染色) – 非小细胞肺癌STK11 – 腺癌KRAS, NRAS, HRAS – 腺癌HER-2 – 非小细胞肺癌Tumor M2-PK (TU M2-PK) – 所有类型BCL-2 (有用的免疫组化染色) – 肺小细胞癌ERCC1 ex pression表达RRM1 ex pression 表达鉴别诊断肺孤立性结节类癌肺转移瘤肺结核酵母菌 – 球孢子菌病（Coccidiomycosis), 组织胞浆菌（Histoplasma), 隐球菌（Cryptococcus)霉&&&菌 – 曲霉菌（Aspergillus)肉芽肿错构瘤周围型肺炎支气管源性囊肿肺梗死灶性出血动静脉畸形其他恶性病变肿块淋巴瘤类癌肺炎转移性肿瘤肺纤维化间皮瘤其他肺肿瘤筛查美国评估筛查的临床试验NELSON Trial – 荷兰和比利时Danish Lung Screening TrialLUSI Trial – 德国ITALUNG – 意大利MILD Trial – 意大利国家肺癌筛查试验-对高危人群应用小剂量计算机断层扫描(LDCT) 每年进行筛查，降低了肺癌死亡率LDCT筛查由于特异性低、费用高和射线照射而没有被推荐使用U.S. trialsEuropean trials推荐筛查成本效率CT射线照射高危定义：年龄55-74岁、每年≥30包的吸烟史和戒烟<15年或年龄≥50岁和每年≥20包吸烟史和一个附加危险因子（二手烟除外）附加危险因子-吸烟史（现在或过去）；氡接触；职业暴露；癌症病史；家族史；慢性阻塞性肺病或肺纤维化；接触二手烟美国胸科协会批准了该建议。美国胸内科医生学会ACCP和美国临床肿瘤学会ASCO-推荐对适合国家肺癌筛查试验标准的高危患者进行筛查（55-74岁高危吸烟者和曾经吸烟者，每年吸烟30条吸烟史，无肺癌病史）美国国家癌症网(2012)-推荐对高危个人进行筛查对所有人群筛查存在争议监测推荐的监测（治愈后的监测方法）第一个两年每3-6个月进行体格检查、胸部X线、全血细胞计数和化学成份检查(National Comprehensive Cancer Network [NCCN]; 每6个月对非小细胞肺癌做CT复查。肺小细胞癌(SCLC)连续监测NSE对监测肺小细胞癌复发有用非小细胞肺癌CK19-对监测进展期非小细胞肺癌的治疗效果有潜在作用实验室检测项目及适应症检测名称推荐使用局限性后续检查肺细胞学显微镜检查&可用作初步诊断阴性不能排除恶性肿瘤支气管刷、冲洗液、组织活检（经气管和开胸）支气管冲洗液细胞学显微镜检查可用于初步筛查阴性不能排除恶性肿瘤支气管刷、冲洗液、组织活检（经气管和开胸）KRAS&突变检查，DNA测序&针对肺腺癌患者决定是否适用酪氨酸激酶抑制剂（TKIs），主要主要适用于单点突变检查并指导进一步的突变检查如果KRAS&阴性，检测&EGFR如果EGFR&阴性，检测ALK&和&ROS1EGFR&突变检查，DNA测序&针对肺腺癌患者决定是否适用酪氨酸激酶抑制剂（TKIs），主要适用于单点突变检查并指导进一步的突变检查 检测EGFR&外显子18,19,20 and 21突变。如果EGFR&阴性，检测ALK&和&ROS1；如果EGFR&阳性考虑检查KRASALK (D5F3) 免疫组化染色及报告&检查ALK融合蛋白。针对肺腺癌患者决定是否适用ALK抑制剂，尤其是EGFR和KRAS阴性患者。EML4-ALK&转位检测 RT-PCR&&针对肺腺癌患者决定是否适用酪氨酸激酶抑制剂（TKIs），&EGFR阴性患者，检测EML4-ALK&的转位突变涉及EML4&外显子 6 或13 和ALK&外显子 20应先做ALK免疫组化检测ROS1 免疫组化染色及报告如果结果不确切，可加做FISH&针对肺腺癌患者决定是否适用酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）抑制剂(如crizotinib),尤其是EGFR和KRAS阴性患者。CYFRA 21-1 (CK 19 片段), 血清&方法: 定量ELISA在早晚期的非小细胞肺癌患者中评估预后；监测晚期非小细胞肺癌的治疗。敏感性和特异性低不能用于筛查。不能用于判断是否存在恶性肿瘤。&Neuron Specific Enolase& NSE片段), 血清&方法: 定量 ELISA可用于监测鳞癌和非小细胞肺癌的复发敏感性和特异性低不能用于筛查。不能用于判断是否存在恶性肿瘤。&细胞角蛋白 7 (CK 7) 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告细胞角蛋白 20 (CK 20) 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告Thyroid Transc ription Factor (TTF-1) 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告Chromogranin A 免疫组化染色&&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告CD56 (NCAM) 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告Synaptophysin 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告p63 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告Cytokeratin 5,6& (CK 5,6) 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告Carcinoembryonic,Antigen, Polyclonal (CEA P) 免疫组化染色&&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告&Breast Carcinoma b72.3 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告Anti-Human Epithelial Antigen, Ber-EP4 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告Epithelial-Related Antigen, MOC-31 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告Neuron Specific Enolase, Polyclonal (NSE P 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告CDX2 免疫组化染色&肺癌辅助诊断单纯染色服务染色加会诊报告&检测名称备注EGFR 基因扩增方法：免疫荧光杂交应优先考虑&EGFR&突变分析ALK& 基因重排方法：免疫荧光杂交应优先考虑 ALK (D5F3) 免疫组化;由于涉及染色体2p (2p21 and 2p23)较小的倒位，FISH 的解读极具挑战性。&实体肿瘤基因突变套餐&方法：下代测序适用于实体肿瘤的预后判断、靶向药物治疗。&&#xe621; 上传我的文档
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关于检测alk重排非小细胞肺癌的不同免疫组化方法的比较的研究
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【请教】免疫组化阳性、阴性对照的问题
各位大虾，我做了大鼠组织的TNF-α免疫组化，是取材后送到医院病理科出钱代做的，现HE和免疫组化片子已经做好，我才意识到没有阳性和阴性对照，请问这两种对照该怎么弄，是我自己想办法还是该病理科负责给我设立？需要我自己再买相应的试剂吗？以前没有做过，所以一头雾水，请不吝赐教，多谢!免疫组化的同一批片子中要有阳性对照和阴性对照才有意义,这些应该是同时作出来的,事后无法补救.阳性对照片在购试剂时可以要求附两张试剂公司的阳性片子,如果没有,也可以自已搞,我做的时候是用肿瘤组织作阳性对照,实验动物组织不加一抗作阴性对照,你可以根据自己的实验设立阳性对照,不用再购买试剂.个人见解,希望对你有帮助.免疫组化染色中的对照片的设置非常重要，它是判断您的染色是否成功的关键依据，而且也是检测每一个抗体的质量标准，常设的对照如下：自身对照、阴性对照（空白对照、替代对照、抑制对照、
吸收实验对照）、阳性对照。A、自身对照：在同一切片上与检测的目的物对照比较。如Actin、CD34在正常组织中的血管壁肌层应为阳性，Vimentin可以间质细胞，Desmin以血管壁及肌束为对照，S-100以小神经末为对照等，如果应为阳性的组织是阳性，则技术操作正确，如为阴性，则表明技术或免疫试剂质量有问题。B、空白对照：用缓冲液替代一抗。C、替代对照：用非免疫血清替代一抗。D、抑制对照：使用与一抗相同的非标记抗体稀释特异性一抗，适于直接法。E、吸收实验对照：已知抗原与相应的第一抗体混合，发生结合沉淀，再用此沉淀抗体复合物进行免疫组化实验，结果为阴性。F、阳性对照：用以含有靶抗原的切片进行对照。谢谢楼上两位仁兄的热心指点！
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