玉米谷氨酰胺转胺酶基因的克隆及原核表达--《食品科学》2010年03期
玉米谷氨酰胺转胺酶基因的克隆及原核表达
【摘要】：从玉米嫩叶中提取总RNA,通过RT-PCR的方法扩增出玉米谷氨酰胺转胺酶(TGase)全长基因,回收目的片段并测序,该基因编码区全长1605bp,编码535个氨基酸残基,分子量为60.9kD,与GenBank(登录号:AJ421525)上已发表的序列同源性为100%。按正确的阅读框架将玉米TGase基因片段定向克隆到表达载体pET-28a上,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,1mmol/L IPTG诱导融合蛋白表达,经凝胶分析软件测得蛋白表达量约占总蛋白的15%,以His-Tag抗体作为一抗,采用Western-blot方法检测目的蛋白,结果证明所表达的特异蛋白是带有His-Tag的重组融合蛋白,利用Ni2+-NTA琼脂糖树脂亲和层析柱纯化目的蛋白,SDS-PAGE鉴定为单一条带,测得纯化后的TGase酶活力达到16U/mg。
【作者单位】：
【基金】：
【分类号】：S513;Q943.2
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丙氨酶氨基转移酶187.1，天门冬酸氨基转移酶177.6，谷氨酰基转移酶131.5碱性磷酸酶142.2
患者信息：女 56岁
病情描述(发病时间、主要症状等)：
经常后背痛,昨天由于疼痛再次复发,就去了医院检查,得出的结果是丙氨酶氨基转移酶187.1，天门冬酸氨基转移酶177.6，谷氨酰基转移酶131.5碱性磷酸酶142.2，除了这几项偏高外,其他都正常
想得到怎样的帮助...
3.饮食清单，不要吃太多油腻、油煎食品，由于后面两个酶也增高，还建议把抗核抗体+ENA查一下。排除免疫上的毛病。2，建议住院治疗，把引起肝功能异常的原因找出来，火锅。多吃水果如桃子，多吃菌类食物、脂肪肝.多休息不要太劳累，这段时间计量不要运动.药物控制，保肝降酶药，具体得看你们那里医院。建议把病毒性肝炎那套查一下、药物、自勉肝等等。恢复正常、酒精、过度劳累，以免增加肝脏的负担。首先转氨酶是反应肝细胞损伤程度的重要指标。你转氨酶高，说明肝脏受到损害。引起转氨酶升高的原因较多：如病毒性肝炎。少喝酒：1、少吃大热的食物如狗羊肉由于年龄不小
采纳率：59%
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