影响绝对荧光量子产率率测量准确性的因素有哪些

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重原子效应对荧光和磷光影响的差别在于随着相对原子质量的增加,荧光量子产率______,而磷光量子产率______。
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重原子效应对荧光和磷光影响的差别在于随着相对原子质量的增加,荧光量子产率______,而磷光量子产率______。
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1温度是影响荧光物质的量子效率和荧光强度的重要因素,通常,随着温度的降低,其量子效率和荧光强度______,并伴随光谱的______。2荧光分析中的系间窜越是不同的______能级之间的无辐射跃迁,在跃迁过程中,电子自旋方向发生______。3化学发光分析仪器通常只有反应池和______,没有光源和单色器。4荧光激发光谱是固定______波长,以______为横坐标,______为纵坐标的谱图。
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荧光光谱仪(稳态)
发布公司:北京卓立汉光仪器有限公司
发布时间: 15:52:41
所在地区:北京市中关村科技园区通州园金桥产业基地 环科中路16号,联东U谷中试区68号B座
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关&键&词:光谱仪,荧光光谱仪,稳态荧光光谱仪,高灵敏度稳态荧光光谱仪,fluoroSENS荧光光谱仪&
稳态荧光光谱仪
&&&&&&& 模块化设计,计算机自动控制的高灵敏度稳态荧光光谱仪,通过采用专门设计优化的&单光子计数技术&,fluoroSENS具备了对&单光子级&极微弱荧光信号的捕捉和分析;水拉曼测试达到3000:1。fluoroSENS更可以实现从紫外光至近红外波段的光谱覆盖范围,能够满足包括物理,化学,生物学,医学,半导体,环境学等各种科研及应用要求。
应用领域举例:
生物化学:细胞毒性,离子浓度定量分析,细胞增殖, DNA定量,化学定量分析等。
环境监测:各种微量药物残留检测,水质评测,食品安全监管,污染物分析等。
药物开发及药理学:常规药物分析,蛋白质新药研发,生物体系中的药物作用机理,
&&&&&&&&&&&&&&&& 喹诺酮类药物,毒品检测,高通量筛选等。
食品科学与农业:食品保质期评估,细菌生长测量,杀虫剂分析,食品质量控制等。
挑战灵敏度极限--&单光子计数技术&
&& &单光子计数技术&是利用在弱光下光电倍增管输出信号自然离散化的特点,采用精密的脉冲幅度甄别技术和数字计数技术,可把淹没在背景噪声中的弱光信号提取出来。当弱光照射到光电子阴极时,每个入射光子以一定的概率(即量子效率)使光阴极发射一个电子。这个光电子经倍增系统的倍增最后在阳极回路中形成一个电流脉冲,通过负载电阻形成一个电压脉冲,这个脉冲称为单光子脉冲,而&单光子计数技术&可测得低至单个不重叠的光子能量脉冲,通过精密的鉴别手段进行工作,从而实现探测&单光子&级别微弱信号的目的。
系统灵敏度
&&& &单光子计数&技术是应用于超低光辐射条件下测量的特有技术,提供了峰值计数速率超过100M cps,标准条件下水拉曼信噪比达到3000:1的测试结果。相对常规荧光光谱仪,灵敏度提高了10-100倍,更有利于微量样品的检测,可以检出低至1 x 10-15mol/L浓度的荧光素。仪器的高灵敏度为各种普通荧光及微弱荧光信号检测提供了可靠保障。
&&&&&&& 激发光源采用150W大功率氙灯,提供紫外至近红外的高效激发能量。
&&&&&&& 荧光检测采用高灵敏度的&单光子计数&技术,检测范围185nm-900nm。
&&&&&&& 对于实验样品尤其是微量样品测试,杂散光抑制是影响信噪比的至关重要的因素。fluoroSENS的光路及结构设计,极大的降低了杂散光对信号的干扰,可达到10-5杂散光抑制比。
&&&&&&& 未经校正的光谱图由于光源及光路系统等各项因素干扰,会造成难以预测的谱线失真,进而影响最终的光谱结论。fluoroSENS使用内置标准探测器模块以及出厂测试的校正数据,为整个系统提供光谱校正支持。
&&&&&&& fluoroSENS激发谱仪(Ex)包含了标准参考探测器,在每次测量时均经过标准参考探测器校正,保证150瓦氙灯在各个波长激发能量的一致性;fluoroSENS中发射谱仪(Em)在出厂时都经过标准光源修正光谱响应度,将发射谱的光学部件与探测器的光谱响应度借由标准光源作修正得到绝对的系统光谱响应度曲线,荧光谱在各波长的强度具有可比性,提供更详实的图谱数据,作正确的分析。右图是去除了氙灯所造成的光谱信号影响,经过fluoroSENS稳态荧光光谱仪测得的荧光谱线。
&强化的软件功能
&&&&&& 专门设计的高级软件包配合fluoroSENS使用,为用户提供对硬件的完整控制、多种测量方案选择、数学算法处理等多项强大功能。
光谱解析度与激发能量控制
&&&&& fluoroSENS激发光源与荧光检测各采用一套300mm焦长的高分辨率单色仪。激发光源可通过自动光阑灵活调整5%-100%的光通量,激发波长最小带宽可达0.1荧光检测可分辨0.1nm荧光峰的精细结构。
定量测量应用
&&&&&&& fluoroSENS内置标准探测器,可以自动同步完成对激发光源能量的归一化测量,实现样品的定量化测量。
&&& SENScan软件以数据为中心设计,用户只需关注实验操作,软件将协助完成大部分数据采集与分析工作。
◆ 激发及发射波长自由选择
◆ 动力学测量
◆ 最多可安装3块光栅
◆ 自定义光谱扫描范围
◆ 不同谱图的连接、分割、选取等
◆ 探测器积分时间可控
◆ 实时光谱校正
◆ 自动样品台控制
◆ 连续可调激发光阑
◆ 可加装内置式快门,减少样品荧光损害
◆ 吸收光谱测量(需购另外硬件)
◆ 磷光寿命测量50ms-10s(需购另外硬件)
数据处理及显示
◆ 数学算法(+、-、&、/)
◆ 标准化处理
◆ 基线扣除
◆ 曲线微分计算
◆ 光谱积分运算
◆ 多种滤波运算方法
◆ 单点及多点峰值搜索
◆ 2D、3D、轮廓线等显示方式
◆ 定义扩展扫描方式
测量模式&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
◆ 信号比率&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
◆ 激发光谱扫描
◆ 发射光谱扫描
◆ 同步光谱扫描
◆ 偏振激发谱扫描
激发及发射光谱扫描
&&& 只需给出激发光或发射光扫描范围,fluoroSENS就可以自动采集荧光激发或发射光谱图。
同步光谱测量(Synchronous Scan)(图一)
&&& 在同步光谱测量中,激发单色仪及发射单色仪以用户预先设定的偏移量做同步扫描。同步光谱测量可以应用于区分和识别混合物质样品中的荧光组分。
动力学测量(Kinetic Scan)(图二)
&&& 动力学测量用于揭示样品荧光在特定激发及发射波长下,随时间的变化情况。例如长时间的磷光测量,化学反应,细胞内物质转移等。
&&& fluoroSENS提供了用户选择特定激发波长和发射波长,自由设定的曝光时间下的荧光强度特性。
轮廓线显示(图三)
&&& fluoroSENS提供的轮廓线显示,可以协助用户快速识别分析荧光光谱分布信息。
荧光量子产率测量
&&& 荧光量子产率(Quantum Yields)是荧光物质的重要发光参数,定义为荧光物质吸光后所发射的光子数与所吸收的激发光的光子数之比值。与传统的对比测试法不同,fluoroSENS采用积分球对样品进行绝对量子产率的测量,测量结果更准确可靠。采用三步测量方法,可消除激发光二次吸收对测量结果的影响,进一步提高了测量结果的准确性。
fluoroSENS主要技术参数
水拉曼信噪比
150W连续氙灯
200-2000nm
光谱分辨率
波长准确度
波长重复性
C-T光路设计(Czerny-Turner)
10&m -3mm(自动连续可调)
激发单色仪:1200g/mm,300nm闪耀波长;
发射单色仪:1200g/mm,500nm闪耀波长
0.1nm(光谱带宽连续可调)
其它规格光栅可选,可选装三块光栅
光电倍增管
探测器类型
参考探测器
185-1000nm大面积Si探测器
红外探测器选项(InGaAs,InSb探测器)
光子计数模式
模拟输入采集
单光子计数器,计数速率:100Mcps
4通道16bits模拟输入采集,采样速率:1MB/s
数据处理模式
激发光谱,荧光光谱,同步扫描,2D,3D显示
光谱计算,归一化,平滑等多种数学处理
水拉曼测试标准
激发波长:350nm;激发带宽:5nm;积分时间:1秒
产品光谱仪,荧光光谱仪,稳态荧光光谱仪,高灵敏度稳态荧光光谱仪,fluoroSENS荧光光谱仪介绍完毕
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All Rights Reserved张玉平, 魏永巨, 李娜, 秦身钧. 人血清白蛋白和牛血清白蛋白荧光量子产率的测量[J]. 分析化学, ): 779-782.
被如下文章引用:
AUTHORS: ,
KEYWORDS: Ce(III);丹皮酚;SDS;增敏;荧光猝灭&br&Cerium(III); P SDS; S Fluorescence Quenching
JOURNAL NAME:
Oct 15, 2014
ABSTRACT: 研究了丹皮酚对Ce(III)的荧光猝灭作用以及SDS对体系的增敏作用,建立了SDS增敏Ce(III)荧光猝灭法测定中药丹皮酚含量的新方法。结果表明,λex/em = 258/361 nm, pH = 3.0的试验条件下,丹皮酚含量在0.50 ?g/mL~10.00 ?g/mL范围内呈线性关系,相关系数R = 0.9987,检出限(D.L)为0.09 ?g/mL,RSD为1.69% (n = 3, c = 2.50 μg/mL),将本方法用于测定实际样品的丹皮酚含量,加标回收率在96.5%~99.8%,结果令人满意。此外,通过Stern-Volmer方程及荧光量子产率,研究了Ce(III)荧光猝灭机理。&br&The fluorescence quenching effect of paeonol on the cerium(III) and sodium dodecyl sulfate (SDS) sensitiza- tion effect of system were investigated. A new method for paeonol analysis has been established based on the fluores- cence intensity quenching of cerium(III) in SDS medium. With excitation and emission wavelengths at 258 nm and 361 nm, respectively, at pH 3.0, the linear range of calibration curve for the determination of paeonol was 0.50 μg/mL - 10.00 μg/mL with correlation coefficient of 0.9987. The detection limit was 0.09 ?g/mL and RSD was 1.69% (n = 3, c = 2.50 μg/mL). The method has been applied for the determination of paeonol in real samples with satisfactory results. The recoveries of the samples ranged from 96.5% to 99.8%. Furthermore, the cerium(III) fluorescence quenching mechanism was discussed by Stern-Volmer equation and fluorescence quantum yield.荧光量子产率_百度文库
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荧光量子产率
&&荧光量子产率的影响因素
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