毛细管电泳技术及应用中假固定相是什么意思

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毛细管电泳分析中的富集技术及其应用整
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毛细管电泳分析中的富集技术及其应用整
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毛细管电泳的应用
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你可能喜欢毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳，见表1。毛细管电泳的多种分离模式，给样品分离提供了不同的选择机会，这对复杂样品的分离分析是非常重要的。
　　表1 毛细管电泳类型
1 单根毛细管
毛细管区带电泳
毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液
毛细管等速电泳
使用两种不同的CZE 缓冲液
毛细管等电聚焦
管内装pH 梯度介质，相当于pH 梯度CZE
胶束电动毛细管色谱
在CZE 缓冲液中加入一种或多种胶束
微乳液毛细管电动色谱
在CZE 缓冲液加入水包油乳液高分子离子交换
毛细管电动色谱
在CZE 缓冲液中加入可微观分相的高分子离子
开管毛细管电色谱
使用固定相涂层毛细管，分正、反相于离子交换
亲和毛细管电泳
在CZE 缓冲液或管内加入亲和作用试剂
非胶毛细管电泳
在CZE 缓冲液中加入高分子构成筛分网络
2 单根填充管
毛细管凝胶电泳
管内填充凝胶介质，用CZE 缓冲液
聚丙烯酰胺
毛细管凝胶电泳
管内填充聚丙烯酰胺凝胶
琼脂糖毛细管凝胶电泳
管内填充琼脂糖凝胶
填充毛细管电色谱
毛细管内填充色谱填料，
分正、反相于离子交换等
阵列毛细管电泳
利用一根以上的毛细管进行CE 操作
芯片式毛细管电泳
利用刻制在载玻片上的毛细通道进行电泳
毛细管电泳/质谱
常用电喷雾接口，需挥发性缓冲液
毛细管电泳/核磁共振
需采用停顿式扫描样品峰的测定方法
毛细管电泳/激光诱导荧光
具单细胞、单分子分析潜力
2. 操作方式
　　毛细管电泳仪
　　毛细管电泳可以按操作方式重新分为手动、半自动及全自动型毛细管电泳。
　　3. 分离通道形状
　　按分离通道形状分为圆形、扁形、方形毛细管电泳等。
　　4. 缓冲液的介质
　　根据配制缓冲液的介质的不同，可以把CE分为水相毛细管电泳和非水毛细管电泳（NACE）。NACE是以有机溶剂作介质的电泳缓冲液代替以水为介质的缓冲溶液，增加了疏水性物质的溶解度，特别适用于在水溶液中难溶而不能用CE分离的物质或在水溶液中性质相似难以分离的同系物，拓宽了CE的分析领域。
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　　毛细管电泳仪是以弹性石英毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。
　　实验室仪器毛细管电泳仪所用设备
　　电源：有0～30kV可调稳压稳流电源，内径小于100μm(常用50～75μm)、长度一般为30～100cm的弹性石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。
　　检测器有：紫外、可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器，其中紫外线检测器最为常用。
　　进样方法有：电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。
　　成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。
　　毛细管电泳仪产生电泳原理：
　　毛细管电泳所用的石英毛细管柱，在pH值&3的情况下，其内表面带负电，与缓冲液接触时形成双电层，在高压电场作用下，形成双电层一侧的缓冲液由于带正电而向负极方向移动，从而形成电渗流。同时，在缓冲溶液中，带电粒子在电场作用下，以各自不同速度向其所带电荷极性相反方向移动，形成电泳。带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳和电渗流的矢量和。各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离。
　　毛细管电泳的分离模式有：
　　(1)毛细管区带电泳，用以分析带电溶质(为了降低电渗流和吸附现象，可将毛细管内壁涂层)。
　　(2)毛细管凝胶电泳，在毛细管中装入单体，引发聚合形成凝胶，主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质，如葡聚糖、聚环氧乙烷，装人毛细管中进行分析，称毛细管无胶筛分电泳，故有时将此种模式总称为毛细管筛分电泳，下分为凝胶和无胶筛分两类。
　　(3)胶束电动毛细管色谱，在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷基硫酸钠，形成胶束，被分离物质在水相和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流在毛细管内迁移，达到分离。本模式能用于中性物质的分离。
　　(4)亲和毛细管电泳，在毛细管内壁涂布或在凝胶中加入亲和配基，以亲和力的不同达到分离目的。
　　(5)毛细管电色谱，是将HPLC的固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂布固定相，以电渗流为流动相驱动力的色谱过程，此模式兼具电泳和液相色谱的分离机制。
　　(6)毛细管等电聚焦电泳，是通过内壁涂层使电渗流减到最小，再将样品和两性电解质混合进样，两个电极槽中分别为酸和碱，加高电压后，在毛细管内建立了pH梯度，溶质在毛细管中迁移至各自的等电点，形成明显区带，聚焦后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值使溶质通过检测器。
　　(7)毛细管等速电泳，采用先导电解质和后继电解质，使溶质按其电泳倘度不同得以分离。
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