07-0507-0507-0507-0507-0507-0507-0507-0507-0507-05最新范文01-0101-0101-0101-0101-0101-0101-0101-0101-0101-0101-0101-0101-0101-0101-01小木虫 --- 600万学术达人喜爱的学术科研平台
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SDS-PAGE电泳溴酚蓝前沿线和样品带在一条线上是什么原因啊。
做SDS-PAGE电泳时，我的酶的分子量为14.4KD左右，但是每次跑完后却发现与溴酚蓝线重合啊。。。这是为神马呢。
哈哈，真是热心的虫友，感动ing:)
新人遇到同样的问题，不知前辈如何解决的
层主解决问题没有
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扫描下载送金币为什么血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验用PH8.6的缓冲液？ 实验中用PH=8.6的缓冲溶液
全部答案（共1个回答）
（一）实验目的：
1.学习醋酸纤维薄膜电泳原理。
2.掌握血清醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质的技术。
地中海贫血一般会表现为血红蛋白电泳试验异常的，如果检查正常基本上可以排除地贫。
从碱性变成酸性，碱性PH大于7。酸性PH小于7。不同酒不同醋PH具体值不同，只能有个大概范围
分子量高的蛋白应该是跑的慢啊
缓冲碱指血中一切具有缓冲作用的碱的总和。其反映机体酸碱失衡总的缓冲能力。由于缓冲碱受血浆蛋白质和血红蛋白的影响，因此不能确切反映代谢酸和碱的内部稳定情况。抽动脉...
缓冲碱指血中一切具有缓冲作用的碱的总和。其反映机体酸碱失衡总的缓冲能力。由于缓冲碱受血浆蛋白质和血红蛋白的影响，因此不能确切反映代谢酸和碱的内部稳定情况。抽动脉...
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电泳实验报告
化学实验报告之电泳 实验目的：认识胶体粒子是带电粒子 实验原理：带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动 实验器材及药品：铁架台、u 形管、石墨碳棒、粗铜丝、滴管、导线、直流电源、fe(oh)3 胶体、定量 nacl 溶液 实验操作： 1、 将烧杯中的蒸馏水加热至沸腾， 向沸水中逐滴滴加入 6 滴 fecl3 饱和溶液。 继续煮沸至溶液呈红褐色，停止加热。观察制得的 fe
（oh）3 胶体 2、取一支 u 形管，注入 fe（oh）3 胶体到距离管口 5.0cm 处，固定在铁架台上，用滴管 给 u 形管的两端沿壁慢慢注入一定浓度的 nacl 溶液， 使 u 形管两端明显分层， 形成清晰的液 面 3、给 u 形管两端插入碳棒电极，并分别连接电源的正负极，观察现象并记录时间。 实验现象： u 形管和阴极连接的一端液面上升， 出现明显的液面差， 阴极一端颜色加深， 阳极一端颜色变浅 实验分析：在外加直流电源的作用下，fe（oh）3 胶体微粒在分散介质里向阴极作定向 移动,注意碳棒不要和胶体接触， ，否则胶体放电或电解水，nacl 溶液的浓度不要太大最好是 51 毫 摩 每 升 。 篇二：电泳 实验报告 实验十二 电泳 一、目的要求 1）掌握电泳法测ζ 电势的原理和技术； 2）从实验现象中加深对胶体的电学性质的理解，即在外电场作用下，胶粒和介质分别向 带相反电荷的电极移动，就产生了电泳和电渗的电动现象（因电而动） 。 二、基本原理 1．电泳 由于胶粒带电，而溶胶是电中性的，则介质带与胶粒相反的电荷。在外电场作用下，胶 粒和介质分别向带相反电荷的电极移动，就产生了电泳和电渗的电动现象。影响电泳的因素 有：带电粒子的大小、形状；粒子表面电荷的数目；介质中电解质的种类、离子强度，ph 值 和粘度；电泳的温度和外加电压等。从电泳现象可以获得胶粒或大分子的结构、大小和形状 等有关信息。 2．三种电势 ，固体表面相对溶液的电势，?0=f（固体表面电荷密?0：热力学电势（或平衡电势） 度，电势决定离子浓度） 。 ??：斯特恩电势。 离子是有一定大小的，而且离子与质点表面除了静电作用外，还有范德华吸引力。所以 在靠近表面 1-2 个分子厚的区域内，反离子由于受到强烈的吸引，会牢固的结合在表面，形 成一个紧密的吸附层，称为固定吸附层或斯特恩层；在斯特恩层中，除反离子外，还有一些 溶剂分子同时被吸附。反离子的电性中心所形成的假想面，称为斯特恩面。在斯特恩面内， 电势呈直线下降，由表面的?0 直线下降到斯特恩面??。??称为斯特恩电势。 ?：电动电势。 当固、液两相发生相对移动时，紧密层中吸附在固体表面的反离子和溶剂分子与质点作 为一个整体一起运动，其滑动面在斯特恩面稍靠外一些。滑动面与溶液本体之间的电势差， 称为 ?电势。 ?电势与??电势在数值上相差甚小， 但却具有不同的含义。 应当指出， 只有在固、 液两相发生相对移动时，才能呈现出?电势。 ?电势的大小，反映了胶粒带电的程度。?电势越高，表明胶粒带电越多，其滑动面与溶液本体之间的电势差越大，扩散层也越厚。当溶液中电解质浓度增加时，介质中反离子的浓 度加大，将压缩扩散层使其变薄，把更多的反离子挤进滑动面以内，使?电势在数值上变小当 电解质浓度足够大时，可使?电势为零。此时相应的状态，称为等电态。处于等电态的胶体质 点不带电，因此不会发生电动现象，电泳、电渗速度也必然为零，这时的 溶胶非常容易聚沉。 3．电泳公式 当带电胶粒在外电场作用下迁移时，胶粒受到的静电力 f1 为： f1?qe (1) 其中 q 为胶粒的电荷，e 为电场强度(或称为电位梯度) 本次实验研究的 fe(oh)3 为棒形胶粒。棒形胶粒在介质中运动受到的阻力 f2 按 stokes 定律为： f2?4??r? (2) 其中 r 为胶粒的半径，?为电泳速度，?为介质的粘度，当胶粒运动速度即电泳速度达到 稳定时，f1 =f2，结合(1)、(2)式得到： ??qe (3) 4??r 根据静电学原理可知 ??q (4) ?r 其中 r 为胶粒的半径，?为介质的界电常数， 所以有 ????e (5) 4?? 4??? (6) ?e ?? 由该式可知，若已知?、?，可通过测定?和 e 算出?电势。该式只适合于 c?g?s 单位制， 且得出?电势的单位为静电伏特。 若各物理量都采用 si 单位， r 的单位为 m； ?的单位为 m? s-1 ； ? 的单位为 pa?s；e 的单位为 v?m-1 此时公式为： ?? 三、仪器与试剂 4????9?109 伏特 (7) ?e 界面移动电泳仪；213 型铂电极两个；高压数显稳压电源；滴管 2 根；烧杯（250ml） ； -1 玻璃棒一根；fec13 溶液（10%） ；kcl 溶液（0.02 mol?l） ； 四、实验步骤 1．仪器装置图如下。 图 1. 实验装置图 2．溶胶的制备： 在不断搅拌的条件下、将 fec13 稀溶液滴入沸腾的水中水解，即可生成棕红色、透明 fe(oh)3 溶胶： fecl3+3h2 o fe(oh)3↓+3hcl 部分氢氧化铁跟盐酸作用 fe(oh)3+hcl=feocl+2h2o feocl=feo++cl－ 氢氧化铁吸附溶液中带正电荷的离子（feo+） ，胶团结构为： { [fe (oh)3 ]m ? y fe o+ , ( y-z ) cl- }z+ ? z cl分子团 选择吸附离子 紧密层 扩散层 胶粒带正电荷，因此在电场作用下向阴极移动，出现电泳现象。 3．测定电泳速度和电位梯度打开活塞，在电泳仪中装上待测 fe(oh)3 溶胶至一定高度（便于观察界面的移动） 。用滴 管将 kcl 溶液从电泳仪两臂的玻璃管壁等量缓慢加入， 出现清晰界面才可以， 否则重新灌装， 继续加入 kcl 溶液至接近支管，注意不能扰动界面，保持界面清晰并使两臂界面等高。轻轻 地将 pt 电极垂直插入 kcl 溶液，记下两边界面的高度位置。接通电源，调节电压至 180v 左 右，开始记时，观察液面的变化。 根据通电时间和界面下降的刻度计算电泳速度。 注意事项： a: 氢氧化铁胶体的电泳速度跟氢氧化铁胶粒的带电量有关， 胶粒带电量越大， 电泳速度 越大。渗析可以减少胶粒中的氯离子，增大胶粒的带电量。 b: 实验时，一旦通电，手就不能再触及电极，拆卸装置时也一定要先切断电源。 c: 要使氯化钾溶液浮在胶体的液面上， 并跟胶体之间保持清晰的界面， 实验时应注意使 胶体的密度比使氯化钾溶液的密度大。这样，使氯化钾溶液加入后不会下沉而跟胶体混在一 起。为此，氯化钾溶液的浓度不能太大。 五、数据记录与处理 从直流电源读得电压 u= v，用直尺测得两电极间的距离 l = m，计算 e=u/l= -1-1v ?m；记录界面下降高度 m，通电时间 s，计算?= m?s 将 e、?数据代入?? 据代入求出?。 m-1 ?（20℃，水）=80.37 f?4???，?为介质的界电常数，?为介质的粘度，初略地以水 的数?e ?（20℃，水）=0.001pa?s 篇三：氢氧化铁胶体电动电位的测定(电泳法) 实验报告 深 圳 大 学 实 验 报 告 课 程 名 称： 实验项目名称： 氢氧化铁胶体电动电位的测定（电泳法） 学 院： 化学与化工学院 专 业： 指 导 教 师： 报 告 人: 学号：班级： 同 组 人： 实 验 时 间： 实验报告提交时间： 教务处制 氢氧化铁胶体电动电位的测定（电泳法） 一、目的要求 (1)掌握电泳法测定 fe(oh)3 溶胶电动电势的原理和方法。(2)通过实验观察并熟悉胶体 的电泳现象。 二、基本原理 在胶体溶液中，分散在介质中的微粒由于自身的电离或表面吸附其他粒子而形成带一定 电荷的胶粒，同时在胶粒附近的介质中必然分布有与胶粒表面电性相反而电荷数量相同的反 离子，形成一个扩散双电层。 在外电场作用下，荷点的胶粒携带起周围一定厚度的吸附层向带相反电荷的电极运动， 在荷电胶粒吸附层的外界面与介质之间相对运动的边界处相对于均匀介质内部产生一电势， 为 ζ 电势。 它随吸附层内离子浓度，电荷性质的变化而变化。它与胶体的稳定性有关，ζ 绝对值越 大，表明胶粒电荷越多，胶粒间斥力越大，胶体越稳定。 本实验用界面移动法测该胶体的电势。在胶体管中，以 kcl 为介质，用 fe(oh)3 溶胶通电后移动，借助测高仪测量胶粒运动的距离，用秒表记录时间，可算出运动速度。 当带电胶粒在外电场作用下迁移时，胶粒电荷为 q，两极间的的电位梯度为 e，则胶粒受 到静电力为 f1=eq 胶粒在介质中受到的阻力为 f2=kπ η ru 若胶粒运动速率 u 恒定， 则 f1=f2 qe=kπ η ru (1) 根据静 电学原理 ζ =q/ε r (2) 将(2)代入(1)得 u=ζ ε e/kπ η (3) 利 用界面移动法测量时，测出时间 t 时胶体 运动的距离 s，两铂极间的电位差φ 和电极间的距离 l，则有 e=φ /l， u=s/t (4) 代入(3)得 s=(ζ φ ε /4π η l)?t 作 s―t 图， 由斜率和已知得ε 和η ， 可求ζ 电势。 三、仪器及试剂 fe(oh)3 胶体，kcl 辅助溶液，高位瓶，电泳管，直尺，电泳仪。 1 电极 2 kcl 溶液 3 fe(oh)3 溶胶 三、实验步骤 1．洗净电泳管和高位瓶，然后在电泳管中加入 kcl 辅助溶液，使其高度至电泳管的一 半， 将电泳管固定在铁架台上。 插入电极。 (注意两电极口必须水平) 2． 在高位瓶中加入 40ml 的 fe(oh)3 胶体溶液，赶走导管中的气泡，将其固定在铁架台上。 3．将高位瓶的毛细管由电泳管中间插入底部。缓慢打开活塞入 fe(oh)3 胶体。一直没过 电极。将导管从电泳管中慢慢取出。 4． 打开电泳仪， 将电压设置 60v， 将电泳管比较清晰的一极插入阴极中， 另一端插阳极。 5．调好测高仪的水平仪，并记录电泳管阴极溶液界面的初始位置。 6．将电泳仪置于工 作位置，同时记时，每 4 分钟记一次界面高度。 7．测量 7 个点后停止实验，关闭电泳仪开关，用细绳测量电极两端的距离，测三次，记 录数据。 8．抛弃电泳管中的试液，并冲洗干净。 、 四、数据记录与处理 实验前温度：28.3 ℃ 大气压： 101.87 kpa 实验后温度： 27.7 ℃ 大气压： 100.76 kpa 电压：60.00 v 两极间距离 l(cm): 32.90cm 已知：?=0.000894pa.s ? =78.36 u=60v l=32.90cm 根据上表作图得： 依据公式：s=(ζ φ ε /4π η l)?t 和已知的η 和ε 就可算出ζ 电位： 由图得斜率： k=ζ φ ε /4π η l＝0.0531 cm? min-1 查 得： ε =78.36 f/m η =0.8904mpa.s 测得电极间距为： l=32.90 cm 实验电压：φ =60v 将数值代入得： ζ ＝ 4.172×10-6 v 五. 结果与讨论 实验测得 fe(oh)3 的电动势ζ ＝ 4.172×10-6 v。 通过此次实验，掌握了电泳法测定 fe(oh)3 溶胶电动电势的原理和方法，同时观察和熟 悉了胶体的电泳现象。 导致误差的可能原因： (1)仪器的干净程度要求很高,否则可能发生胶体凝聚,导致毛细管堵塞。 故一定要将仪器 清洗干净。 (2)观察界面移动时,应由同一个人观察,从而减小误差。 (3)实验中辅助液的选择十分重要， 要求辅助液的电导率与溶胶的一致， 避免因界面处电 场强度的突变造成两臂界面移动速度不等产生界面模糊。 (4)fe(oh)3 胶体带正电。六、思考题： 1、要准确测定胶体的电泳速度必须注意哪些问题? 答: ①电压要足够,稳定; ②电路畅通; ③溶液保证畅通无气泡;篇四：琼脂糖凝胶电泳实验 琼脂糖凝胶电泳实验
09:43:56 来源：生物秀 评论：0 我要评论 实验二琼脂糖凝胶电泳实验 【实验目的】 （1） 学习琼脂糖凝胶电泳的基本原理； （2） 掌 握使用水平式电泳仪的方法； （3） 学习在含有甲醛的凝胶上进行 rna 电泳的方法。 【实验原 理】琼脂糖凝胶电泳是基因工程实验室中分离鉴定核酸的常规方法。核酸是两性电解质，其 等电点为 ph2-2.5，在常规的… 实验二 琼脂糖凝胶电泳实验 【实验目的】 （1） 学习琼脂糖凝胶电泳的基本原理； （2） 掌握使用水平式电泳仪的方法； （3） 学习在含有甲醛的凝胶上进行 rna 电泳的方法。 【实验原理】 琼脂糖凝胶电泳是基因工程实验室中分离鉴定核酸的常规方法。核酸是两性电解质，其 等电点为 ph2-2.5，在常规的电泳缓冲液中（ph 约 8.5） ，核酸分子带负电荷，在电场中向正 极移动。核酸分子在琼脂糖凝胶中泳动时，具有电荷效应和分子筛效应，但主要为分子筛效 应。因此，核酸分子的迁移率由下列几种因素决定： （1）dna 的分子大小。线状双链 dna 分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与 dna 分 子量对数成反比， 分子越大则所受阻力越大， 也越难于在凝胶孔隙中移动， 因而迁移得越慢。 （2）dna 分子的构象。当 dna 分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量 有关,还和它本身构象有关。 相同分子量的线状、 开环和超螺旋质粒 dna 在琼脂糖凝胶中移动 的速度是不一样的，超螺旋 dna 移动得最快，而开环状 dna 移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯 度时发现凝胶上有数条 dna 带难以确定是质粒 dna 不同构象引起还是因为含有其他 dna 引起 时，可从琼脂糖凝胶上将 dna 带逐个回收，用同一种限制性内切酶分别水解，然后电泳，如 在凝胶上出现相同的 dna 图谱，则为同一种 dna。 （3）电源电压。在低电压时，线状 dna 片段的迁移速率与所加电压成正比。但是随着电 场强度的增加，不同分子量的 dna 片段的迁移率将以不同的幅度增长，片段越大，因场强升 高引起的迁移率升高幅度也越大，因此电压增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使 大于 2kb 的 dna 片段的分辨率达到最大，所加电压不得超过 5v/cm。 （4）离子强度影响。电泳缓冲液的组成及其离子强度影响 dna 的电泳迁移率。在没有离 子存在时（如误用蒸馏水配制凝胶） ，电导率最小，dna 几乎不移动；在高离子强度的缓冲液 中 （如误加 10×电泳缓冲液） ， 则电导很高并明显产热， 严重时会引起凝胶熔化或 dna 变性。 溴化乙啶(ethidium bromide, eb)（1） 能插入 dna 分子中形成复合物，在波长为 254nm 紫外光照射下 eb 能发射荧光， 而且荧光的强度正比于核酸的含量， 如将已知浓度的标准样品 作电泳对照，就可估算出待测样品的浓度。由于溴化乙啶有致癌的嫌疑， 所以现在也开发出 了安全的染料，如 sybergreen。 常规的水平式琼脂糖凝胶电泳适合于 dna 和 rna 的分离鉴定；但经甲醛进行变性处理的 琼脂糖电泳更适用于 rna 的分离鉴定和 northern 杂交，因为变性后的 rna 是单链，其泳动 速度与相同大小的 dna 分子量一样，因而可以进行 rna 分子大小的测定，而且染色后条带更 为锐利， 也更牢固结合于硝酸纤维素膜上，与放射性或非放射性标记的探针发生高效杂交。【试剂与器材】 （一）材料 电泳仪、水平电泳槽、样品梳子、琼脂糖等 （二）试剂 1、 50?tae(1000ml)：242g tris, 57.1ml 冰醋酸， 18.6g edta。 2、 eb 溶液：100ml 水中加入 1g 溴化乙啶，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，分装， 室温避光保存。 3、 dna 加样缓冲液：0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青，50%甘油（w/v） 。 4、 rna 甲醛变性胶上样缓冲液：0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青，1mm edta(ph8.0)，50% 甘油（w/v） ，用 depc 水配制，高压灭菌备用。 5、 5?甲醛变性胶电泳缓冲液：0.1m mops(ph7.0)，40mm 醋酸钠，5mm edta(ph8.0)， 用 depc 水配制，过滤除菌，室温避光保存。淡黄色缓冲液可正常使用，深黄色应弃用。 【操作方法】 （一）常规的水平式琼脂糖电泳 制备琼脂糖凝胶：按照被分离 dna 分子的大小，决定凝胶中琼脂糖的百分含量；一般情 况下，可参考下表： 琼脂糖的含量（%） 分离线状 dna 分子的有效范围（kb） 0.3 60-5 0.6 20-1 0.7 10-0.8 0.9 7-0.5 1.2 6-0.4 1.5 4-0.2 2.0 3-0.1 1．制备琼脂糖凝胶：称取琼脂糖，加入 1x 电泳缓冲液，待水合数分钟后，置微波炉中 将琼脂糖融化均匀。 在加热过程中要不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液； 加热时 应盖上封口膜,以减少水份蒸发。 2． 胶板的制备： 将胶槽置于制胶板上,插上样品梳子,注意观察梳子齿下缘应与胶槽底面 保持 1mm 左右的间隙， 待胶溶液冷却至 50℃左右时， 加入最终浓度为 0.5 微克/毫升的 eb(也 可不把 eb 加入凝胶中,而是电泳后再用 0.5μ g/ml 的 eb 溶液浸泡染色 15 分钟)， 摇匀， 轻轻 倒入电泳制胶板上，除掉气泡；待凝胶冷却凝固后，垂直轻拔梳子；将凝胶放入电泳槽内， 加入 1x 电泳缓冲液，使电泳缓冲液液面刚高出琼脂糖凝胶面； 3．加样：点样板或薄膜上混合 dna 样品和上样缓冲液，上样缓冲液的最终稀释倍数应不 小于 1x。用 10 μ l 微量移液器分别将样品加入胶板的样品小槽内，每加完一个样品，应更 换一个加样头，以防污染，加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面。 （注意：加样前要先记下加样 的顺序和点样量） 。 4．电泳：加样后的凝胶板立即通电进行电泳，dna 的迁移速度与电压成正比，最高电压 不超 过 5v/cm。当琼脂糖浓度低于 0.5%，电泳温度不能太高。样品由负极（黑色）向正极（红 色）方向移动。电压升高，琼脂糖凝胶的有效分离范围降低。当溴酚蓝移动到距离胶板下沿 约 1cm 处时，停止电泳。 5．观察和拍照：电泳完毕，取出凝胶。在波长为 254nm 的紫外灯下观察染色后之。 （二） 在含有甲醛的凝胶上进行的 rna 电泳（选做） 配制 23 ml 甲醛电泳胶：0.336g 琼脂糖溶于 20ml depc 水中，冷却至 60?c，加入 5ml 的 5x 甲醛变性胶电泳缓冲液和 5.5ml 的甲醛，在通风橱内倒胶，冷却 30 分钟后使用。 甲醛变性胶 rna 样品的制备： 1μ l rna， 5?甲醛变性胶电泳缓冲液 0.5μ l， 甲醛 0.7μ l， 甲酰胺 2μ l，65oc 加热 15min，迅速冰浴，加 1μ l 上样缓冲液和 0.2μ l 的 eb。 步骤： 1． 用 3%过氧化氢浸泡电泳槽、胶板、梳子 30 分钟以上。 2． 胶板的制备：按常规琼脂糖电泳法。 3． 预电泳：1×甲醛变性胶电泳缓冲液，预电泳 10 min。电压为 5v/cm。 4． 小心地进行点样，记录样品次序与点样量；然后开始电泳，电压为 3-4v/cm。 5． 观察和拍照：在波长为 254nm 的紫外灯下观察电泳胶板并拍照保存图片。 【注意事项与提示】 （1）eb 是强诱变剂并有中等毒性，易挥发，配制和使用时都应戴手套，并且不要把 eb 洒到桌面或地面上。 凡是沾污了 eb 的容器或物品必须经专门处理后才能清洗或丢弃。 简单处 理方法为：加入大量的水进行稀释（达到 0.5mg/ml 以下） ，然后加入 0.2 倍体积新鲜配制的 5%次磷酸 （由 50%次磷酸配制而成） 和 0.12 倍体积新鲜配制的 0.5mol/l 的亚硝酸钠， 混匀， 放置 1 天后， 加入过量的 1mol/l 碳酸氢钠。 如此处理后的 eb 的诱变活性可降至原来的 1/200 左右。 （2）由于 eb 会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状 dna，使 dna 迁移 率降低。因此，如果要准确地测定 dna 的分子量，应该采用跑完电泳后再用 0.5μ g/ml 的 eb 溶液浸泡染色的方法。 （3）总 rna 的分析：哺乳动物的 rna 由 28s rrna、18s rrna 和 mrna 以及其它小分子 rna 组成， 28s 和 18s rrna 处为明显的亮带 （相当于 4.5kb 和 1.9kb） ， 28s/18s 应为 1.5-2.5/1； 植物、昆虫、酵母和两栖动物的 rna 带分布较小，约为 0.5-3.0kb 左右；假如 28s/18s 小于 1/1，或者出现拖带，说明 rna 已经有部分降解，如果 28s 和 18s rrna 大部分已降解，则需 重新制备。 【实验安排】 只需一天：上午配试剂倒胶，下午跑电泳并观察拍照。 【实验报告要求与思考题】 1、 附上电泳结果的图片并进行正确的标注 （如下图） （2） 的或已加有 eb 的电泳胶板。 dna 存在处显示出肉眼可辨的桔红色荧光条带。于凝胶成像系统中拍照并保存 m：1kb dna ladder；1：质粒 dna 2、琼脂糖凝胶电泳中 dna 分子迁移率受哪些因素的影响？ 3、如果样品电泳后很久都没有跑出点样孔，你认为有哪几方面的原因？ 电泳流程图： 凝胶加样缓冲液 使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三：增大样品密度；以确保 dna 均匀进入样品孔内； 使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利，含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染 料。溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青 ff 的 2.2 倍，而与琼脂糖浓度无关。以 0.5 ×tbf 作电泳液时，溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速 率约与长 300bp 的双链线状 dna 相同，而二 甲苯青 ff 的泳动则与长 4kb 的双链线状 dna 相同。在琼脂糖浓度为 0.5%～1.4%的范围内， 这些对应 关系受凝胶浓度变化的影响并不显著。 选用哪一种加样染料纯属个人喜恶。但是，对于碱性凝胶应当使用溴甲酚绿作为示踪染料，因为在碱性 ph 条件下其显色较溴酚更蓝为鲜明。篇五：dna 的提取和电泳实验报告 基因组 dna 的提取和电泳（实验五）实验报告 一、实验目的 了解 dna 提取的方法，以及琼脂糖凝胶电泳分析 dna 技术。 二、器材和试剂 1. 器材 水平琼脂糖电泳仪，离心机，水浴锅，研钵，离心管、移液枪、水稻幼苗等 2. 试剂 1. 1mol/l tris.cl(ph8.0) 的配制：称取 12.11g 的 tris，置于 80 ml 的 ddh20,加入 浓盐酸 （约 4.2 ml）,调节 ph 值至 8.0，定容至 100 ml。 2. 0.5 mol/l edta(ph8.0)的配制：18.61g na2edta?2h2o，加入 80 ml 的 ddh2o,用 naoh 颗粒调 ph 值至 8.0（约需 2 g） ，定容至 100 ml。 3. 提取缓冲液的配制： 100 mmol/l tris.cl(ph8.0), 20 mmol/ledta, 500 mmol/l nacl, 1.5%sds 4. 80/4/16 氯仿：异戊醇：乙醇 5. 6?loading buffer：0.15％溴酚蓝，0.15％二甲苯青 ff，5 mmol/l edta，50％甘 油 三、实验步骤 1. 在 15ml 的离心管中加入 5ml 的提取缓冲液，60℃水浴预热。 2. 植物叶 1-2g，剪碎，在钵体中加入石英砂，加入预热的提取缓冲液，磨成粉末状， 60℃水浴保温 20 min，其间不时缓慢摇动。 3. 5000 rpm 离心 5 分钟，仔细吸取上清液至另一离心管中， 4. 加入 5 ml 氯仿/戊醇/乙醇溶液，颠倒混匀（需带手套，防止皮肤损伤） ，室温下静 置 5-10 分钟，使水相和有机相混匀。 5. 室温下离心 5000 rpm 离心 5 分钟。 6. 仔细吸取上清液至另一离心管中，加入一倍体积异丙醇，混匀，室温下放置片刻即出 现絮状沉淀。 7. 离心 5000 rpm，离心 5 min，弃去异丙醇，室温晾干。 8. 视沉淀多少，加入 1ml 左右 ddh2o 溶解，可在 60℃水浴中放置 15 分钟以上助溶。 9. 取 dna 样品 5 μ l，加入 1 μ l6?loading buffer，混匀，加入 0.7%的琼脂糖凝胶加 样孔 中，电泳，检测 dna 的分子大小。 4、实验结果和讨论 实验分析：本次实验由于种种原因我是和植保 102 班的同学一起做的，我们组 3 人，实 验过程比较严谨，受到了老师的表扬，实验结果也很令人满意。 下面是实验过程中的注意点：1、研磨不能太久太用力，会导致 dna 片段断掉。2、实验 室的某些试剂，如氯仿，有毒性，应带手套进行。 电泳的时候不知是时间的原因还是都做得不错，结果相差不是很远（如上图） ，第五组和 第六组是我们的， 第六组是我自己加的。 实验过程中要耐心细心， 这样才能得到满意的结果。
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