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常用试剂配制及显色方法
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常用试剂配制及显色方法
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【求助】常用显色剂有哪些
请教各位各位大虾，常用的显色剂有哪些，碘熏和香草醛浓硫酸的显色原理是什么，适用什么化合物，谢谢！
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常用试剂配制及显色方法
（一） 通用显色剂 1． 重铬酸钾――硫酸一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。 喷洒剂：5 克重铬酸钾溶于 100ml，40%硫酸中。喷洒后加热至 150 C 斑点出现。 2． 碘：检查一般有机物o（1）碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层 或纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度， 可提高显色的灵敏度。 （2）0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷 1%淀粉的水溶液，斑点转成 蓝色。 3．碘――碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）。 4．5%――磷钼酸乙醇溶液：喷后 120oC 烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏， 则背景变为无色。 5．20%磷酸乙醇溶液：喷后 120oC，还原性物质显兰色。 6 碱性高锰酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色。溶液 I:1%高锰酸钾溶 液。 溶液 II：5%碳酸钠溶液。 溶液 I 和溶液 II 等量混合使用。 7．中性 0.05%高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。 8．硝酸银――氢氧化铵（Tollen’s--zoffaronl）试剂，喷后 105oC 烤 5~10 分 钟，还原性物质显黑色。 溶液 I：0.1N 硝酸银溶液。 溶液 II：氢氧化铵溶液。临用前溶液 I 和溶液 II 以 1：5 混合。注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银。 9 硝酸银――高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。 溶液 I：0.1N 硝酸银溶液：2N 氢氧化铵溶液：2N 氢氧化钠（1：1：2）。临用前 配制。溶液 II：高锰酸钾 0.5g，碳酸钠 1g，加水成 100ml 溶液,临用前溶液 I 和溶液 II 等量混合。 10．四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。 溶液 I：0.5%四唑兰甲醇溶液。 I 和溶液 II 等量混合。 溶液 II：6N 氢氧化钠溶液。临用前溶液11．铁氰化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射 2N/L 盐酸溶液，则 兰色加深。 溶液 I：1%铁氰化钾溶液。 和溶液 II 等量混合。 溶液 II：2%三氯化铁溶液。临用前溶液 I12．浓硫酸：甲醇（1：1）溶液，或 5%硫酸的乙醇溶液，喷后 100oC 烤 15 分钟， 各种不同物质显不同颜色。 13．萤光显色剂溶液：试喷以下一溶液，不同的物质财富在萤光背景上可能显黑 色或其他萤光斑点。 A：0.2%2.7――二氯萤光素乙醇溶液。 B：0.01 萤光素乙醇液 C：0.1%桑色素乙醇溶液 D：0.05 罗丹明 B 乙醇溶液 E：萤光素一溴，检不饱和化合物。 （1）0.1%萤光素乙醇溶液 （2）5%溴的 CCL4 溶液。 喷洒（1）以后，放置（2）溶液的缸内，可在 UV 光下检查萤光，萤光素与溴化 合成曙红（ensln）（无萤光），而光饱和化合物则与溴加成，保留了原来的萤 光；若点样量较多，则成黄色斑点，底板成红色。 14．碱式醋酸铅试剂（可做喷洒或沉淀试剂，多种有机化合物均反应）。 取 Pbo14g 置乳钵内，加蒸馏水 10ml，研后成糊状后，倾入玻璃瓶中，乳钵 用 10ml 蒸馏水洗净，洗液并入瓶中，加醋酸铅溶液（取醋酸铅 22g，加蒸馏水 70ml 制成）70ml，用力振摇，放置七天，滤过，并自滤器中添加适量新沸过的 冷蒸馏水使成 100ml 即得。 （二）生物碱显色剂 二通用显色剂： 1．改良碘化铋钾（Dragendorff）试剂：生物碱和某些含氯化合物显橙红色。 溶液 I：碱式硝酸铋 0.85g，溶于冰乙酸 10ml 和 40ml. 溶液 II：碘化钾 0.8g 溶于水 20ml. 储存液：溶液 I 和溶液 II 等量混合（置棕色瓶中杨以长期保存）。 显色剂：储存 1ml 与冰乙酸 2ml 和水 70ml 混合，用前配制。 2．碘化铂钾（碘铂酸）试剂，不同的生物碱显不同的颜色。10%六氯化铂酸溶液 3ml 和水 97ml 混合，加 6%碘化钾溶液 100ml，混合均匀，临用前配制。 3．碘―碘化钾（Wagner）试剂：生物碱 显棕褐色。 碘 1g 和碘化钾 10g 溶于 50ml 水中，加热，加冰醋酸 2ml 用水稀释到 100ml。 4．改良碘化铋钾：碘，碘化钾（1：1）试剂；生物碱显紫棕色或灰黑色。 5．硫酸铈――硫酸试剂（改良 sonnensclein 试剂）：喷后 110 C 烤几分钟，不 同的生物碱显不同的颜色。硫酸铈 0.1g 悬浮于水 4ml 中，加三氯化乙酸 1g，加 热煮沸，放冷，逐滴加入浓硫酸直到混浊消失为止。 6．碘化氯钾（vmayer）试剂（沉淀试剂）：取 HgCL2（毒）1.35g 加蒸馏水 60ml 溶解后，量取碘化钾 5g，加碘馏水 10ml 使溶解将两液混合，加蒸馏水稀释使成 100ml 即得。 7．硅钨酸（Bertrand）试剂（沉淀试剂）：5g 硅钨酸溶于 100ml 蒸馏水中，加 稀盐酸使呈酸性反应即得。 （三）强心甙显色剂 1． 碱性 3.5――二硝基苯甲酸试剂： 强心甙显紫红色、 几分钟后褪色。 2%3.5―― 二硝基苯甲酸甲醇溶液与 2N 氢氧化钾溶液，用前按劳 1：1 混合。 2．碱性三硝基苯：在浅橙色背景上显橙红色。 溶液 I：间三硝基苯 100mg。溶于二甲基甲酰胺 40ml，加浓 HCL3~4 滴，加水至 100ml，避光能长期保存。 溶液 II：5%碳酸风溶液 先喷溶液 I，再喷溶液 II，喷后 90~103.0oC 烤 5 分钟。o3．三氯乙酸试剂：喷后 110 C 烤 7~10 分钟，紫外光下观察萤光。 试剂 I：25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液，配制后可放置数日。或用试剂 II：上 述乙醇溶液用前每 10ml 加过氧化氢溶液 4 滴或新配 3%氯铵 T 水溶液按 4：1 混 合。 4．三氯化锑试剂：喷后 100 C 烤 5 分钟，日光下或紫外光下观察。 25%或饱和的三氯化锑氯仿溶液。 5．磷酸――溴试剂 溶液 I：10%磷酸溶液。 溶液 II：溴化钾饱和溶液：25%盐酸溶液（1：1：1）。oo薄层用溶液 I 喷洒后， 125oC 烤 12 分钟 在 （薄层太湿时则烤的时间可适当延长） ， 在紫外光下观察一次，将薄层再烤热，趁热喷溶液 II，再在紫外光下观察。 6．Keller――Kllianl 试剂：（检查 α――去氧糖） 试液：100ml 冰 HAC 和 FeCL3 试液 0.5ml 混匀，试样 1ml 混匀。试样 1ml 加试液 2ml 溶解后， 沿试管壁滴入浓硫酸 2 接触面即显棕色。 渐变浅绿， 兰色。 最后 HAC 层全部染成兰色。 （四）黄酮甙显色剂 黄酮甙显色剂 黄酮类成份在紫外光下大多显出不同颜色，用氨熏，喷三氯化铝溶液或喷 氢氧化钠等碱性溶液，则颜色 变深或变色。 1．氨气 2．10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液。 3．1%或 5%碳酸钠溶液。 4．1%或 5%三氯化铝乙醇溶液。 5．2%乙酸镁甲醇溶液。 6．饱和三氯化锑的氯仿溶液，100oC 烤 5 分钟。 以上六种试剂在喷前喷后将薄层置日光与紫外光下观察。 7．1~2%三氯化铁乙醇溶液。 8．1%中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液。9．0.1N 硝酸银溶液。 10．铁氰色钾――三氯化铁试剂。 溶液 I：2%铁氰化钾溶液。 液 II 等量混合。 溶液 II：2%三氯化铁溶液。临用前溶液 I 与溶11．硼氢化钾试剂：双氢黄酮化合物显红、橙红色。 溶液 I：1~2%硼氢化钾（钠）异丙醇溶液，必须新鲜配制。溶液 II：浓盐酸 先喷 I、5 分钟后放入盐酸蒸气槽内。 12．Shinoda 试剂：在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸，黄酮醇显红紫色。制备硅 胶薄层时，加入 2%w/w 锌粉混合，薄层展开后盐酸溶液,如展开剂为酸性，可在 展开后先喷锌――丙酮混悬液，再喷盐酸溶液。 罗丹明――氨试剂。 溶液 I：0.1%罗丹明 B 的 4%盐酸溶液。 溶液 II：浓氨溶液。先喷溶液 I，然后再将薄层放入氨汽槽内。 14．对氨基苯磺酸试剂。 溶液 I：对氨基苯磺酸盐溶液。 溶液 II：5%亚硝酸钠溶液。将对氨基苯磺酸 0.3g 溶液对 8%盐酸溶液 100ml 中，到紫溶液 25ml 用冰冷却， 加预冷的溶液 II1.5ml。 15．硼酸――柠檬酸试剂 溶液 I：饱和硼酸的丙酮溶液。 先喷溶液 I，再喷溶液 II。 16．福林试剂（Folin Ciocalteu 试剂） 钨酸钠 10g 和钼酸钠 2.5g 溶于 70ml 水中， 再缓缓加 85%磷酸 5ml 和浓盐酸 10ml， 将混合液回流煮沸 10 小时，然后加硫酸锂 15g，水 5ml 及溴 1 滴，再回去流煮 沸 15 分钟，所得溶液冷却后移置 100ml 溶量瓶中并用水稀释到刻度（贮备液）， 溶液应不显绿色。 溶液 I： 20%碳酸钠溶液。 先喷溶液 I，稍干再喷溶液 II。 溶液 II： 临用前上述贮备液 1 份用水三分稀释。 溶液 II：柠檬酸丙酮溶液。（五）皂甙灶显色剂 1．25%磷钼酸乙醇溶液：喷后在 140oC 加热 5~10 分钟皂甙元均呈深兰色。 2．三氯化锑浓盐酸或氯仿溶液：喷后在 90oC 烤 10 分钟（应在通风厨中进行）， 不同的皂甙元在可见光或紫外光下显出各种颜色。 3．硫酸：甲醇（1：2）溶液，喷后加热，不同的皂甙元可显红褐色、紫色、黄 色或黑色，所显颜色与温度无关。 4．氟磺酸：乙酸（1：1）溶液，喷后 130 C 加热 5 分钟。各种皂甙元可显天兰 紫、粉红、淡棕等色，在紫外光下也显不同萤光。 5．碘蒸汽：薄层置于碘蒸汽筒中，皂甙无皆显棕黄色斑点。 6．三氯快乙酸或三氯乙酸：乙酸（1：2）溶液，喷后在 100 C 加热 20 分钟皆显 黄色。 7．2%血球生理盐水混悬液（溶血试验、检皂甙）。 取新鲜兔血（由心脏或静脉取血）适量，用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白， 并用生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后，量取沉降红血球（可以管的离心管 通接读取）用生理盐水配成 2%混悬液贮冰箱内备用（贮存期 2~3 天）。 （六）蒽醌甙显色剂 六 蒽醌及其甙本身在日光下显黄色，在紫外光下则显黄，红橙色萤光。在薄层 上用氨熏或喷氢氧化钾与碱溶液，则颜色变深或变色。 1．氨气 2．10%氢氧化钾、甲醇溶液。 3．3%氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液。 4．50%哌啶的苯溶液。 5．饱和喷酸锂溶液。 6．饱和硼砂溶液。 7．0.5%乙酸镁甲醇溶液：喷后 90oC 烤 5 分钟。 8．0.5%乙酸铝溶液，喷后紫外光下看萤光。o o9．0.5%牢固兰 B 试剂，喷后则原来氢氧化钠、锂、钾等溶液碱溶液显萤光的斑 点此时在可见光下显棕、紫或绿色。也可先喷本试剂，再喷稀氢氧化钠溶液而显 色。也用于酚类及能偶芳香胺的显色。 溶液 I：新配的 0.5%牢固兰 B 盐的水溶液。 先喷溶液 I，喷溶液 II。 （七）香豆精甙显色剂 1.0.5%碘的碘化钾溶液，香豆精各种颜色，很多其他类型的化合显色。 2．重氟化氨基苯磺酸试剂，香豆精显黄、橙、红、棕紫等颜色也用于酚类，芳 香胺反转偶合的朵环化合物的显色。 对氨基苯横酸 0.9g 克加热溶于 12N 盐酸 9ml， 用水稀释到 100ml， 取此溶液 10ml o 用冰冷却，加冰冷的 4.5%亚硝酸钠溶液 10ml，0 C 放 15 分钟（在 0oC 可保存三 天），用前加等体积 1%碳酸钠溶液。 3．重氮化对硝基苯胺试剂、香豆精显黄、红、棕、紫等颜色，也用于酚类的显 色。 对硝基苯苯胺 0.7g 溶于 12N 盐酸 9ml，用水稀释到 100ml，将此溶液逐渐 滴加到冰冷的 1%亚硝酸钠溶液 5，再用冰冷的水稀释到 100，需临用时新配。 4.4――氨基安替比林――铁氰化钾试剂：香豆素和酚类显橙红至深红色。 溶液 I：2%4――氨基安替比林乙醇溶液。 先喷溶液 I，再喷溶液 II，再用氨气熏之。 5．稀氢氧化钠：喷前喷后薄层在短波长的紫外光下观察萤光。 （八）挥发油显色剂 1．茴香醛――浓硫酸试剂：喷后 150oC 烤。挥发油中各成分显不同颜色。 浓硫酸 1ml 加到冰醋酸 50ml 中，冷后加茴香醛 0.5ml 必须临时配制。 2．萤光素――溴试剂：检出含乙烯化合物。（配法及使用见前）。 3．碘化钾――冰乙酸――淀粉试剂：斑点显兰色则为过氧化物。 溶液 I：4%碘化钾溶液 10ml 与冰乙酸 40ml 混合，再加锌粉――小勺过滤。 溶液 II：新制的 1%淀粉溶液。 溶液 II：8%铁氨化钾溶液。 溶液 II：0.1N/L 氢氧化钠溶液。先喷溶液 I，5 分钟后大量喷溶液 II，直喷到薄层透明为止。 4．对二甲氨基苯甲醛剂；检出菌与菌前体在室温或 80oC 烤 10 分钟显深兰色。 对二甲氨基苯醛 0.25 克，溶于冰乙酸 50g，85g 磷酸 5 克和水 20ml 的混合液 中，此试剂储于棕色瓶中能稳定数月。 5．异羟肟酸铁试剂：斑点显淡红色，可能是酯和内酯。 溶液 I：盐酸羟胺 5 克溶于水 12ml,乙醇稀释到 50ml,冷处。 溶液 II：氢氧化钾 10g 溶于很少量水，再用乙醇稀释到 50ml，储于冷处。 溶液 III：溶液 I 和溶液 II 以 1：2 混合，滤去氯化钾沉淀，所得滤液必须放入 冰箱中，可稳定两星期。 溶液 IV：三氯化铁（FeCL36H2O）10 克溶于 36%盐酸 20ml，与乙醚 200ml 振摇， 得均匀的溶液，密塞储存可长久使用。 先喷溶液 III，在室温先干燥后，再喷溶液 IV。 6．2.4――二硝基苯肼试剂，醛和酮化合物显黄色。 36%盐酸 10ml 加到 2.4――二硝基苯肼试剂 1 克在乙醇 1000ml 的溶液中。 7．0.3%邻联二茴香胺冰乙酸溶液，醛和酮化合物显各种颜色。 8．三氯化铁试剂：酚 性物质显兰绿色。 1~5%三氯化铁的 0.5N 盐酸溶液。 9．4――氨基安替比林――铁氰化钾试剂：酚性物质显橙红色至深红色。 溶液 I：2%4――氨基安替比林乙醇溶液。 溶液 II：8%铁氰化外溶液。 先喷溶液 I，再喷溶液 II，再用氨气熏之。 10．硝酸铈试剂：醇在黄色背景显棕色。 硝酸铈铵 6g 溶于 4N 硝酸溶液 100ml。 11．钒酸铵（钠）8――羟基喹啉试剂：醇在兰灰色背景显淡红色，有时需做加 热。1%酸铵 （钠） 溶液 1ml 和 25%8――羟基喹啉的 6%乙醇溶液， 1ml 用苯 30ml 振摇， 争出灰兰色的苯溶液使用。 12．溴甲酚绿试剂：有机酸显黄色。 双甲酮 30mg 溶于乙醇 90ml，慢慢加入 85%磷酸 10ml，配制后的试剂放置于冷处 能用几个星期，但新配的效果较好。 13．酚――硫酸试剂：喷后 110 C 烤 10~15 分钟，糖显棕色，酚 3g 及浓硫酸 5ml 溶于乙酸 95ml。 14．3.5――二氨基苯甲酸――硫酸试剂：喷后 100oC 烤 15 分钟，2――去氧糖 在日光下显红棕色，在紫外光下显黄绿色萤光。 甲基红 1g 及溴酚兰 3g 溶于 95%乙醇 1000ml。 15．溴粉兰指示剂，显黄色。0.04mol/L 溴酚兰乙醇溶液，用氢氧化钠溶液调至 微碱性。 16．溴甲酚绿指示剂：如展开剂中含乙酸，则喷前薄层在 120 C 烘烤除去，在兰 色背景上显黄色。溴甲酚绿 0.04 克溶于乙醇 100ml，加 0.1N 氢氧化钠溶液至兰 色刚刚出现。 17．溴甲酚紫指示剂，喷前薄层在 100oC 烤 10 分钟，冷到室温后，喷显色剂。 在兰色背景上显黄色。 溴甲酚紫 0.04 克溶于 50%乙醇 100ml，用 0.1N 氢氧化钠溶液调至 pH10.0。 18．溴甲酚紫柠檬酸试剂 溴甲酚紫 25ml 及柠檬酸 100mg 溶于丙酮：水（9：1）混合液 100ml。 19．焦红栖溶液：在灰或灰兰色背景上白色。 0.1%焦酚红水溶液：2%氢氧化钠溶液（1：1）混合。 20．百里酚酞碱溶液：在灰或兰色背景上显红色或白色。百里酚酞 50mg . 21．二氯靛酚试剂：喷后加热片刻，在天兰色背景上显粉红色如加热时间延生， 则钼酸转变为白色，而其色羧不变故可识别酮酸。2.6 三氯靛酚 0.1g 溶于 95% 乙醇 100ml。 22．芳香胺――还原糖试剂 芳香胺(如苯胺 5g)和还有糖（如木糖 5g）溶于 95%乙醇o o23．碘化物淀粉试剂：在白色或浅兰色背景上显深兰色，灵敏度为 2μg。 8%碘化钾溶液，2%碘酸钾溶液及 1%淀粉溶液等到量混合，用前新鲜配制。 24．硝酸铈铵――引朵乙醇 溶液。 溶液 I：10%硝酸铈铵溶液。 溶液 II：吲哚乙醇溶液。25．联苯胺――亚硝酸钠试剂：喷后在紫外光灯下 254 毫微米观察萤光。 溶液 I：联苯胺 2.5 克溶于浓盐酸 7 毫升及水 500ml。溶液 II：10%亚硝酸溶液。 临用前溶液 I3 份和溶液 II2 份混合。 （九）氨基酸显色剂 通用试剂 1．茚三酮试剂，用于氨基酸，氨及打官司基糖，喷后 110 C 加热泪盈眶至显出 颜色 。 试剂 I： 茚三酮 0.3g 溶于下丁醇 100ml 中， 加乙醇 3ml 或试剂 II， 茚三 酮 0.2g 溶于乙醇中 100ml。 为了使茚 三酮 的颜色稳定， 采用下法：o硝酸酶试剂：饱和硝酸酮溶液 1ml 与 10%硝酸溶液及 96%乙醇 100ml 混合。 方法：用茚 三酮剂显色后用硝酸酮 试剂喷，斑点由兰紫色转成红色。 2．吲哚醌试剂：吲哚醌于乙醇 100 中，加冰乙酸 10。 3． 茚三酮――硝酸酮试剂 （Moffatt--Lytle 反应） 喷后在电炉上烤至刚刚显色， 颜色在日光灯中逐渐加深，某些氨基酸首先显出颜色，用笔立刻将色点记下，许 多氨基酸赕出特殊的颜色，不同的氨基酸显出的速度也有差别，。 4．2――萘醌――4――磺酸试剂（Folin 试剂）喷后在室温干燥 不同的氨基产 生各种颜色。 1．2 萘醌――4――碘酸钠的 0.62 克溶于 5%碳酸钠溶液 100ml 制备。 5．氯气――联甲苯胺试剂。 氯化作用，薄层放在氯气中，假如氯气要从气筒中得到的放置 5~10 分钟，假 如由 1.5%高锰酸钾溶液及 10%盐酸（1：1）的混合物制得的，则需放置 5~20 分 钟，然后将薄层置空气中顾委分钟以除去过量的氯气，再喷试剂。试剂配制：邻联甲苯胺 160mg 溶于乙醇酸 30ml 中，溶液用蒸馏水 500ml 稀 释，然后 再加碘化钾 1 克。 （十）糖显色剂 1．茴香醛――硫酸试剂：喷后 100~105 C 烤，各种糖显不同颜色，浓硫酸 1ml 加到含茴香醛的乙醇溶液 50ml 中需临用前配。 2．1.3――二羟基苯萘酚――硫酸试剂：在 110 C 予热的薄层上喷试剂几分钟后 在白色背景显不同颜色，再加热，颜色加深背景也变深。 3．苯胺――二苯胺――磷酸试剂：喷后 85oC 烤 10 分钟各种糖不同颜色。 二苯胺 4g，苯胺 4ml 及 85%磷酸 20ml 溶于丙酮 200ml 中。 4．茴香胺――邻苯二甲酸试剂：喷后 100oC 烤 10 分钟。已糖显颜色。去氧已糖 显色，戊糖显红紫色，醛酸显棕色。 0.1M 对茴香胺和 0.1M 邻二甲酸的乙醇溶液。 5 苯胺――邻苯二钾酸试剂：喷后 105~110oC 烤 10 分钟，糖显红棕色。 6．α――苯胺――邻苯二钾酸试剂：喷后 100oC 烤 3~6 分钟，多数糖显兰色。 鼠李糖显橙色，所显颜色于室温稳定 2~3 天。 15%萘酚乙醇溶液 21ml，浓硫酸 13ml，乙醇 87ml，及水 8ml 混匀后使用。 7．3――二羟基嗪酚――磷酸试剂：喷后 105oC 烤 5~10 分钟，酮糖显红色，醛 糖显淡兰色。 0.2%1．3――二羟基试剂：喷后 120oC 烤 15~20 分钟，多数糖在白色背景上显 暗红色，继续加热则变成浅紫色。 8．百里酚及浓硫酸 5ml 溶于乙醇 95ml。 9．双甲酮――磷酸试剂：喷后 110oC 烤 15~20 分钟，仅酮显暗绿灰色。 10．Kellev――Killani 试剂：（检查 α――去氧糖） 配法及使用见附录二（强心甙项下） 11．3．5 二氨基苯甲酸二盐酸 1 克溶于 80%磷酸 25 毫升磷酸 25 毫升加水稀释至 60 毫升。 喷后 100oC 烤 10~15 分钟，糖显棕色，在紫外光下显黄绿色萤光。o o12．酚――硫酸试剂 酚 3 克及浓硫酸 5 毫升溶于乙醇 95 毫升。 喷后 100oC 烤 10~15 分钟，糖显棕色。 13．对硝基苯胺――过碘酸试剂。 溶液 I：饱和偏高碘酸溶液 1 份加水 2 份稀释。 溶液 II：1%对硝基苯胺乙醇溶液 4 份与盐酸 1 份混合。 先喷溶液 II：放置 10 分钟，再喷溶液 II，去氧糖显黄色，紫外先下显强萤光， 再喷 5%氢氧化钠醇溶液，颜色转绿乙二醇同样显色。 （十一）鞣质 十一） 检查鞣质的试剂除检一般酚性物试剂均能反应以外， 现列出二种较专一的沉淀如 下： 1．氯化钠明胺试剂 取明胺 1 克溶于 50 水中，然后加 1.0gNaCL 使溶解后，加水稀释至 100ml 即得。 o 保存期 2~3 个月（10 C 左右）。 2．铁铵明矾试液： 即硫酸铁铵 FeNH4(SO4)212H2O 取硫酸铁铵结晶 1 克加蒸馏水溶解后，使成 100ml 即得。
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文档资料库内容来自网络，如有侵犯请联系客服。溶液I：新配的0.5%牢固兰B盐的水溶液；1.0.5%碘的碘化钾溶液，香豆精各种颜色，很多；2．重氟化氨基苯磺酸试剂，香豆精显黄、橙、红、棕；对氨基苯横酸0.9g克加热溶于12N盐酸9ml，；3．重氮化对硝基苯胺试剂、香豆精显黄、红、棕、紫；5．稀氢氧化钠：喷前喷后薄层在短波长的紫外光下观；1．茴香醛――浓硫酸试剂：喷后150oC烤；溶液I：4%碘化钾溶液1
溶液I：新配的0.5%牢固兰B盐的水溶液。
溶液II：0.1N/L氢氧化钠溶液。 先喷溶液I，喷溶液II。 （七）香豆精苷显色剂 1.0.5%碘的碘化钾溶液，香豆精各种颜色，很多其他类型的化合显色。 2．重氟化氨基苯磺酸试剂，香豆精显黄、橙、红、棕紫等颜色也用于酚类，芳香胺反转偶合的朵环化合物的显色。 对氨基苯横酸0.9g克加热溶于12N盐酸9ml，用水稀释到100ml，取此溶液10ml用冰冷却，加冰冷的4.5%亚硝酸钠溶液10ml，0oC放15分钟（在0oC可保存三天），用前加等体积1%碳酸钠溶液。 3．重氮化对硝基苯胺试剂、香豆精显黄、红、棕、紫等颜色，也用于酚类的显色。
对硝基苯苯胺0.7g溶于12N盐酸9ml，用水稀释到100ml，将此溶液逐渐滴加到冰冷的1%亚硝酸钠溶液5，再用冰冷的水稀释到100，需临用时新配。 4.4――氨基安替比林――铁氰化钾试剂：香豆素和酚类显橙红至深红色。 溶液I：2%4――氨基安替比林乙醇溶液。
溶液II：8%铁氨化钾溶液。 先喷溶液I，再喷溶液II，再用氨气熏之。 5．稀氢氧化钠：喷前喷后薄层在短波长的紫外光下观察萤光。 （八）挥发油显色剂 1．茴香醛――浓硫酸试剂：喷后150oC烤。挥发油中各成分显不同颜色。 浓硫酸1ml加到冰醋酸50ml中，冷后加茴香醛0.5ml必须临时配制。 2．萤光素――溴试剂：检出含乙烯化合物。（配法及使用见前）。 3．碘化钾――冰乙酸――淀粉试剂：斑点显兰色则为过氧化物。
溶液I：4%碘化钾溶液10ml与冰乙酸40ml混合，再加锌粉――小勺过滤。溶液II：新制的1%淀粉溶液。 先喷溶液I，5分钟后大量喷溶液II，直喷到薄层透明为止。 4．对二甲氨基苯甲醛剂；检出菌与菌前体在室温或80oC烤10分钟显深兰色。
对二甲氨基苯醛0.25克，溶于冰乙酸50g，85g磷酸5克和水20ml的混合液中，此试剂储于棕色瓶中能稳定数月。 5．异羟肟酸铁试剂：斑点显淡红色，可能是酯和内酯。 溶液I：盐酸羟胺5克溶于水12ml,乙醇稀释到50ml,冷处。 溶液II：氢氧化钾10g溶于很少量水，再用乙醇稀释到50ml，储于冷处。 溶液III：溶液I和溶液II以1：2混合，滤去氯化钾沉淀，所得滤液必须放入冰箱中，可稳定两星期。 溶液IV：三氯化铁（FeCL36H2O）10克溶于36%盐酸20ml，与乙醚200ml振摇，得均匀的溶液，密塞储存可长久使用。 先喷溶液III，在室温先干燥后，再喷溶液IV。 6．2.4――二硝基苯肼试剂，醛和酮化合物显黄色。 36%盐酸10ml加到2.4――二硝基苯肼试剂1克在乙醇1000ml的溶液中。 7．0.3%邻联二茴香胺冰乙酸溶液，醛和酮化合物显各种颜色。 8．三氯化铁试剂：酚 性物质显兰绿色。 1~5%三氯化铁的0.5N盐酸溶液。 9．4――氨基安替比林――铁氰化钾试剂：酚性物质显橙红色至深红色。 溶液I：2%4――氨基安替比林乙醇溶液。 溶液II：8%铁氰化外溶液。 先喷溶液I，再喷溶液II，再用氨气熏之。 10．硝酸铈试剂：醇在黄色背景显棕色。 硝酸铈铵6g溶于4N硝酸溶液100ml。 11．钒酸铵（钠）8――羟基喹啉试剂：醇在兰灰色背景显淡红色，有时需做加热。 1%酸铵（钠）溶液1ml和25%8――羟基喹啉的6%乙醇溶液，1ml用苯30ml振摇，争出灰兰色的苯溶液使用。 12．溴甲酚绿试剂：有机酸显黄色。 双甲酮30mg溶于乙醇90ml，慢慢加入85%磷酸10ml，配制后的试剂放置于冷处能用几个星期，但新配的效果较好。 13．酚――硫酸试剂：喷后110oC烤10~15分钟，糖显棕色，酚3g及浓硫酸5ml溶于乙酸95ml。 14．3.5――二氨基苯甲酸――硫酸试剂：喷后100oC烤15分钟，2――去氧糖在日光下显红棕色，在紫外光下显黄绿色萤光。 甲基红1g及溴酚兰3g溶于95%乙醇1000ml。 15．溴粉兰指示剂，显黄色。0.04mol/L溴酚兰乙醇溶液，用氢氧化钠溶液调至微碱性。 16．溴甲酚绿指示剂：如展开剂中含乙酸，则喷前薄层在120oC烘烤除去，在兰色背景上显黄色。溴甲酚绿0.04克溶于乙醇100ml，加0.1N氢氧化钠溶液至兰色刚刚出现。 17．溴甲酚紫指示剂，喷前薄层在100oC烤10分钟，冷到室温后，喷显色剂。在兰色背景上显黄色。 溴甲酚紫0.04克溶于50%乙醇100ml，用0.1N氢氧化钠溶液调至pH10.0。 18．溴甲酚紫柠檬酸试剂 溴甲酚紫25ml及柠檬酸100mg溶于丙酮：水（9：1）混合液100ml。 19．焦红栖溶液：在灰或灰兰色背景上白色。 0.1%焦酚红水溶液：2%氢氧化钠溶液（1：1）混合。 20．百里酚酞碱溶液：在灰或兰色背景上显红色或白色。百里酚酞50mg溶于2%氧化溶液?1：1?混合. 21．二氯靛酚试剂：喷后加热片刻，在天兰色背景上显粉红色如加热时间延生，则钼酸转变为白色，而其色羧不变故可识别酮 酸。2.6三氯靛酚0.1g溶于95%乙醇100ml。 22．芳香胺――还原糖试剂 芳香胺(如苯胺5g)和还有糖（如木糖5g）溶于95%乙醇 23．碘化物淀粉试剂：在白色或浅兰色背景上显深兰色，灵敏度为2μg。 8%碘化钾溶液，2%碘酸钾溶液及1%淀粉溶液等到量混合，用前新鲜配制。 24．硝酸铈铵――引朵乙醇 溶液。 溶液I：10%硝酸铈铵溶液。
溶液II：吲哚乙醇溶液。 25．联苯胺――亚硝酸钠试剂：喷后在紫外光灯下254毫微米观察萤光。 溶液I：联苯胺2.5克溶于浓盐酸7毫升及水500ml。溶液II：10%亚硝酸溶液。 临用前溶液I3份和溶液II2份混合。 （九）氨基酸显色剂 通用试剂 1．茚三酮试剂，用于氨基酸，氨及打官司基糖，喷后110oC加热泪盈眶至显出颜色 。 试剂I：茚三酮0.3g溶于下丁醇100ml中，加乙醇3ml或试剂II，茚三 酮0.2g溶于乙醇中100ml。 为了使茚 三酮 的颜色稳定，
采用下法： 硝酸酶试剂：饱和硝酸酮溶液1ml与10%硝酸溶液及96%乙醇100ml混合。 方法：用茚 三酮剂显色后用硝酸酮 试剂喷，斑点由兰紫色转成红色。 2．吲哚醌试剂：吲哚醌于乙醇100中，加冰乙酸10。 3．茚三酮――硝酸酮 试剂（Moffatt--Lytle反应）喷后在电炉上烤至刚刚显色，颜色 在日光灯中逐渐加深，某些氨基酸首先显出颜色，用笔立刻将色点记下，许多氨基酸赕出特殊的颜色，不同的氨基酸显出的速度也有差别，。 4．2――萘醌――4――磺酸试剂（Folin试剂）喷后在室温干燥 不同的氨基产生各种颜色。
1．2萘醌――4――碘酸钠的0.62克溶于5%碳酸钠溶液100ml制备。 5．氯气――联甲苯胺试剂。
氯化作用，薄层放在氯气中，假如氯气要从气筒中得到的放置5~10分钟，假如由1.5%高锰酸钾溶液及10%盐酸（1：1）的混合物制得的，则需放置5~20分钟，然后 将薄层置空气中顾委分钟以除去过量的氯气，再喷试剂。
试剂配制：邻联甲苯胺160mg溶于乙醇酸30ml中，溶液用蒸馏水500ml稀释，然后 再加碘化钾1克。 （十）糖显色剂 1．茴香醛――硫酸试剂：喷后100~105oC烤，各种糖显不同颜色，浓硫酸1ml加到含茴香醛的乙醇溶液50ml中需临用前配。 2．1.3――二羟基苯萘酚――硫酸试剂：在110oC予热的薄层上喷试剂几分钟后在白色背景显不同颜色，再加热，颜色加深背景也变深。 3．苯胺――二苯胺――磷酸试剂：喷后85oC烤10分钟各种糖不同颜色。 二苯胺4g，苯胺4ml及85%磷酸20ml溶于丙酮200ml中。 4．茴香胺――邻苯二甲酸试剂：喷后100oC烤10分钟。已糖显颜色。去氧已糖显色，戊糖显红紫色，醛酸显棕色。 0.1M对茴香胺和0.1M邻二甲酸的乙醇溶液。 5 苯胺――邻苯二钾酸试剂：喷后105~110oC烤10分钟，糖显红棕色。 6．α――苯胺――邻苯二钾酸试剂：喷后100oC烤3~6分钟，多数糖显兰色。鼠李糖显橙色，所显颜色于室温稳定2~3天。
15%萘酚乙醇溶液21ml，浓硫酸13ml，乙醇87ml，及水8ml混匀后使用。 7．3――二羟基嗪酚――磷酸试剂：喷后105oC烤5~10分钟，酮糖显红色，醛糖显淡兰色。
0.2%1．3――二羟基试剂：喷后120oC烤15~20分钟，多数糖在白色背景上显暗红色，继续加热则变成浅紫色。 8．百里酚及浓硫酸5ml溶于乙醇95ml。 9．双甲酮――磷酸试剂：喷后110oC烤15~20分钟，仅酮显暗绿灰色。 10．Kellev――Killani试剂：（检查α――去氧糖） 配法及使用见附录二（强心苷项下） 11．3．5二氨基苯甲酸二盐酸1克溶于80%磷酸25毫升磷酸25毫升加水稀释至60毫升。
喷后100oC烤10~15分钟，糖显棕色，在紫外光下显黄绿色萤光。 12．酚――硫酸试剂 酚3克及浓硫酸5毫升溶于乙醇95毫升。 喷后100oC烤10~15分钟，糖显棕色。 13．对硝基苯胺――过碘酸试剂。 溶液I：饱和偏高碘酸溶液1份加水2份稀释。 溶液II：1%对硝基苯胺乙醇溶液4份与盐酸1份混合。 先喷溶液II：放置10分钟，再喷溶液II，去氧糖显黄色，紫外先下显强萤光，再喷5%氢氧化钠醇溶液，颜色转绿乙二醇同样显色。 （十一）鞣质 检查鞣质的试剂除检一般酚性物试剂均能反应以外，现列出二种较专一的沉淀如下： 1．氯化钠明胺试剂 取明胺1克溶于50水中，然后加1.0gNaCL使溶解后，加水稀释至100ml即得。保存期2~3个月（10oC左右）。 2．铁铵明矾试液： 即硫酸铁铵FeNH4(SO4)212H2O 取硫酸铁铵结晶1克加蒸馏水溶解后，使成100ml即得。
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