细胞长了很多脸上长黑点是怎么回事点,求助

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培养的细胞中有出现小黑点,在细胞内部,大小不均,细胞生长速度不受影响,营养液颜色不变,是什么原因?细胞内黑点,几乎每个细胞中都能看到,在细胞中间会有一到两个稍微大些的,像是线粒体的形态,细胞内部边缘有较小一些的黑点,数量不等,营养液不受影响,且细胞生长速度不受影响,
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你仔细看看培养液中有没有,细胞不受什么影响的话:1.血清灭活,有时候会出现这样的现象,不灭活,就好了2.可能是黑胶虫,加点抗生素试试(黑胶虫的存在还有争论)3.细胞传代多了,也会有这样的情况,可以重新复苏怀疑是支原体污染的话,可以进行支原体检测
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【求助】细胞传代后出现许多小黑点
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这个帖子发布于3年零35天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
细胞传代后出现许多小黑的,洗不掉。请问是什么污染,怎么处理?有小黑的点,10倍镜下的情况。传代之前基本上没有小黑点,另一细胞,传代前的样子传代后和上面那个hepG2差不多一样了,同一个培养箱中培养的。小黑点是在培养皿上面或细胞上面贴着,不动。细胞密度小时,黑点特别多。 补充:细胞可以正常生长,两天时间换液时,培养基也并不浑浊。
不知道邀请谁?试试他们
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catone 编辑于
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你在四十倍镜下看那些小黑点,如果会动,就是所谓的"黑胶虫",每次传代又PBS多冲一遍,传密一点,几代后,细胞状态可以回来的;如果不会动,黑点不增多,细胞长得快,很可能是分泌物。
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黑胶虫污染了吧…
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关于丁香园细胞内有很多小黑点(死亡,细胞形状,培养液) - 细胞实验 - 生物秀
标题: 细胞内有很多小黑点(死亡,细胞形状,培养液)
摘要: [细胞内有很多小黑点(死亡,细胞形状,培养液)] 细胞内有很多小黑点,并且好像死亡的细胞也有点多,但是细胞形状,折光性等方面都可以,培养液也较清。不知道是什么原因? 关键词:[死亡 细胞形状 培养液]……
细胞内有很多小黑点,并且好像死亡的细胞也有点多,但是细胞形状,折光性等方面都可以,培养液也较清。不知道是什么原因?
回复我想可能有两个原因,可以参考下:1.污染,很可能是支原体,支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微.约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁(cell wall)形态呈高度多形性.可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构.其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。若受到支原体之污染时,细胞之外观较无明显变化,但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化2.就是血清中的杂质。根据HyClone公司的说明:经热处理的血清,沉淀物的形成会显著增多,这些沉淀物在倒置的显微镜下观察,像是“小黑点”,常会误认为是血清遭受污染。而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物增多,这样就会误认为是微分裂扩增回复zgx2005 说得在理,我以前也是这样分析的,并且得到了证实。回复支原体在光学显微镜下能看得到么?你养的是什么细胞?有些细胞里的小黑点属正常情况,有可能是细胞器。你的细胞长得快不?一般支原体污染的细胞表现为细胞生长缓慢。回复请问各位:
如果细胞有支原体污染,如何处理?回复支原体污染的常见原因是什么?回复造成支原体高污染率的原因为: 1.支原体size 0.1~0.8 um,无细胞壁(cell wall),可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um) 2.支原体污染时,没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化 3.过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式 4.细胞流通间缺乏品管,造成实验室间的相互污染 5.研究或操作人员忽略污染问题 而支原体污染了来源: 1. 已受污染的细胞 2. 操作人员的疏失 3. 已受污染的培养基、 4. 操作环境不良、实验器具不洁等 由于支原体为人体口腔中之正常菌丛,实验室之操作人员的污染亦可能为污染源,须十分注意。而万一细胞已受支原体污染时,最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃,以免污染其它洁净的细胞株。但是若是坚持要作去除支原体污染,有以下几种方法,只不过结果会与原始的细胞特性有差异。去除支原体污染: 1. 抗生素(antibiotic)处理:BM-cyclin(Roche),MRA(mycoplasma removal agent,ICN),Ciprofloxcin(Bayer),Enrofloxacin(Bayer) 2. Nucleic acid metabolites:5-bromouracil,Hoechst 33258,bromodeoxyuridine 3. Anti-sera 预防与控制方面可从以下各点加强注意: 设备方面: 1. 使用已作支原体测试ok之细胞株 2. 于另一隔离之区域操作未知是否有支原体污染之细胞 3. 使用不添加抗生素(antibiotic)的培养基培养细胞
检测方面:定期以标准的支原体检测方法检测细胞、培养基、、ddH2O有否被支原体污染。 实验操作人员之无菌观念与无菌操作技术之要求回复补充下:对于支原体污染的细胞,可以采取补救措施:1 (antibiotic)排除法:可以用5-10倍于常用量的冲击法,加入高浓度(antibiotic)后作用24-48小时,再换入常规培养液,有时可能有效。推荐用量:庆大霉素 200ug/ml ,四环素10ug/ml ,卡那霉素50ug/ml 。对于支原体污染抗生素(antibiotic)应用,预防性应用比污染后使用好。2 加温除菌:根据支原体耐热性能差的特点。将受支原体污染的细胞置于41度中作用5-10小时可以杀灭支原体。但由于41度对培养细胞本身也有较大的影响,故处理前,应先进行预试验,确定出最大限度杀伤支原体而对细胞影响较小的处理时间。M-Cyclin 抑制支原体及细菌生长,消除培养细胞中已感染的支原体,适用于多种培养细胞,无明显副作用;每包装(37.5mg)可用于2×2.5升培养基。产品号 产品规格 厂商 价格$ .5mg Roche 查一下?
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