细胞免疫荧光共聚焦专用共聚焦皿有哪些规格?

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细胞免疫荧光标准操作流程
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【Jounal club】共聚焦和免疫荧光有什么不同?
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这个帖子发布于9年零278天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好,请问为什么有些细胞在免疫荧光显微镜下有荧光而且可见清晰荧光分布的细胞在共聚焦显微镜下却显示不出荧光? 怎样避免这种情况?是荧光抗体的浓度不够吗?但是我用的是有效价浓度的两倍浓度的。请各位大师帮忙!!!谢谢!!!
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zwy200899 大家好,请问为什么有些细胞在免疫荧光显微镜下有荧光而且可见清晰荧光分布的细胞在共聚焦显微镜下却显示不出荧光? 怎样避免这种情况?是荧光抗体的浓度不够吗?但是我用的是有效价浓度的两倍浓度的。请各位大师帮忙!!!谢谢!!!怎么会呢?我的第一感觉是不是你的共聚焦显微镜没有调好啊?通道不对激发光不对么?因为我们通常是先在自己实验室用普通荧光显微镜看看有没有荧光,如果有荧光就去共聚焦下面做。因为共聚焦是按小时收费的,比普通荧光显微镜贵10倍左右。一般只要普通荧光显微镜下能够看到荧光,共聚焦下面肯定会有的。我只碰到过普通荧光显微镜下面看不到 而去了共聚焦下面反而可以激发出荧光的情况。或者你两次观察的时间一个在前一个在后,隔的时间较长,避光不好,导致荧光淬灭。又或者你先用荧光显微镜观察过了,荧光被激发后持续发出荧光的时间是有限的,等你再次激发的时候光就非常弱的。我就碰到过在显微镜下面看着看着荧光就慢慢变暗的时候,所以只要看到荧光,调好焦距就要抓紧拍照,不要犹豫。
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谢谢伊寒!但是我是做完共聚焦回来在科室的荧光显微镜下观察,只要有细胞就有荧光染色,但是很模糊.还有我的细胞是悬浮细胞,每次漂洗都会减少很多细胞,最好所剩无几,请问有什么方法固定悬浮细胞吗?谢谢!!!
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伊寒,能否可以跟你聊QQ?需要你的技术指导,谢谢!我的是QQ是**
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SmallDonkey 编辑于
关于丁香园免疫荧光检测专用多孔载玻片有哪些规格?_百度知道
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免疫荧光接种多少细胞合适.我要做活细胞培养,用的是35mm直径的小皿,接种多少细胞好啊?我接种细胞之后要转染,我1ml里有多少个细胞合适啊?还有接种后还要培养多长时间?我的细胞是SK-N-SH.
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免疫荧光用24孔板接种细胞就行,浓度约104/ml.
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