在细胞爬片的玻片铺板过程中为什么要先加玻片

(1)多聚赖氨酸(PLL):武汉博士德分装Sigma产品10ml/瓶。4度存放有效期1年。
博士德说明书明确指出:多聚赖氨酸一般用干净的塑料器皿如塑料切片盒,塑料杯等稀释而不能用玻璃器皿稀释,以免影响效果;在1:10稀释液可以保存在4度里三个月内仍然可以使用。
因为多聚赖氨酸对细胞爬片的玻片有一定毒性所以在保证贴附的前提下,尽量使用低点儿的浓度
(2)无菌处理:PLL不可以高温消毒,故应过滤除均分装于无菌处理的细胞爬片的玻片凍存管内,1ml/管封口模密封,4度保存另外,准备无菌去离子水50ml
(3)配置工作液:用移液*吸取0.3ml PLL+3ml 无菌去离子水,混匀放于10ml无菌塑料离心管中封口模密封后4度存放。
(4)玻片处理:常规处理的盖玻片纱布“夹心饼式”消毒、保存。铺片于培养皿中移液*将PLL工作液“滴加於”玻片上,室温10分钟后用消毒好的纱布条吸取玻片上的PLL液。在超静台内风干后使用或者超静台内过夜晾干,次日使用
(5)常规细胞爬片的玻片消化,离心后爬片
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