在沙门氏菌血清学鉴定菌鉴定过程中,如何处理血清凝集反应中的问题?

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2015-01-22 03:18 标签： 沙门氏菌诊断血清
在沙门菌鉴定过程中,如何处理血清凝集反应中的问题?_百度作业帮
在沙门菌鉴定过程中,如何处理血清凝集反应中的问题?
在沙门菌鉴定过程中,如何处理血清凝集反应中的问题?
与多价抗血清不凝集时,可在玻璃试管内用生理盐水将细菌制成浓菌液,煮沸15-30min,冷却后再次做凝集试验,因Vi抗原能阻断0凝集反应,而煮沸处理能破坏菌体表面的Vi抗原。 仅出现单相H抗原(第一相或第二相)时,需用位相分离的方法诱导出另一相抗原后再进行检查。...沙门菌株的血清分型鉴定（一）-技术前沿-新闻中心-中国微生物菌种网
您的位置 >>
>> 正文阅读
沙门菌株的血清分型鉴定（一）
【来源/作者】北纳创联生物技术研究院 【更新日期】 9:09:38
国内许多实验室已经拥有分离检测沙门菌的能力，但是，由于在实际工作中能够被分离的阳性菌株太少而可能无法积累足够的经验，虽然实验室在日常工作中经常参加的室间比对和质量控制考核中常有涉及沙门菌血清分型项目的训练，但本书的重点内容是列举了沙门菌的最新抗原表，为实验室技术人员提供分型参考。
从事沙门菌血清分型的实验室技术人员操作前应仔细阅读沙门菌分型血清的使用说明书，并且在进行沙门菌血清分型以前作好菌株的生化鉴定分析，因为肠杆菌科中有许多菌（诸如弗劳地枸橼酸杆菌）的抗原和沙门菌的“Ｏ”抗原之间存在交叉凝集反应。仅仅使用市售的“Ａ Ｆ”或“Ａ Ｓ”多价血清是不够的，即便是已经吸收的多克隆的多价血清玻片凝集效果非常好，其特异性远比“Ｏ”因子血清要差。从效率上讲，先直接用较常见的“Ｏ”４，７，９，１０，１１，１９因子分１次或２次集中进行玻片凝集；若存在交叉凝集现象者，以肉眼判断凝集颗粒粗、背景清者为标准确定血清群；以上若均不凝集者，用剩余的“Ｏ”８因子；仍然不凝集者，再用Ａ Ｆ多价血清重新进行确认；若不凝集者，需要送给较为专业的实验室定血清群；如Ａ Ｆ多价凝集者，需要重新考虑做“Ｏ”因子或可能某个“Ｏ”因子血清发生变质。虽然“Ｏ”因子的定型是较为简单的，但是建议实验室最好能够准备２套以上的同一批号血清备用，因为在出现有疑问的结果时，要进行血清的比对试验。
“Ｈ”相位主要依靠“Ｈ”多价不同的组成进行。如果遇到“Ｈ”因子血清交叉凝集时要综合比较血清凝集的颗粒、相关血清型是否属于较为常见的型别、是否有辅助生化指标来鉴别发生交叉凝集现象血清型的差异。如果通过沙门菌单套分型血清及实验室工作人员的实践经验仍不能确认血清型者，可以送到较为专业的实验室进行确认。但是对那些初学分型，尽量在较短时间内报告血清群结果的实验室工作人员要进行鼓励，在沙门菌的检测过程中尽可能早地提供实验室信息对流行病学的价值判断很有必要。
相位诱导是沙门菌分型过程中重要的环节。在比例合适的营养琼脂和含蛋白胨肉汤配伍的软琼脂环境下进行单相或双相诱导，虽然有报道表明使用某些营养较好的肉汤，例如脑心浸液肉汤（ＢＨＩ）或专门用于沙门菌“Ｈ”相位诱导生长的专一性软琼脂（例如：ＳｗａｒｍＡｇａｒ）培养基可能会有较快的分型结果。笔者认为对国内的相关实验室而言，应该鼓励临床微生物实验室进行沙门菌的分型鉴定，对ＣＤＣ微生物实验室掌握沙门菌分型鉴定准确性的途径只能是通过鉴定菌株数量的积累来提高包括相位诱导在内的分型技能。
抗血清的玻片凝集属于单纯抗原 抗体反应。能够影响凝集效果的主要是抗原，所以，掌握好抗原或菌液的适当浓度非常重要。过多的抗原会使凝集出现“迟滞现象”，过少的抗原会产生模糊的“弱凝集”，相反，认为增加抗血清的体积能提高凝集效率者只能增加鉴定成本，“急于求成”的心态在沙门菌的分型鉴定中不适用。
在掌握好抗原 抗体比例后，不同血清之间的交叉凝集就可以鉴别了，可以通过凝集反应的强弱程度来判断和记录分型结果，这种经验的积累对提高沙门菌的分型能力是有益的。玻片凝集＋：菌体抗原凝集颗粒细，背景浑浊不清；＋＋：菌体抗原凝集颗粒较粗实，背景浑浊；＋＋＋：反应过程快，菌体抗原凝集颗粒细而均匀，背景较清；：反应过程快，菌体抗原凝集颗粒粗实，背景清亮。
诊断分型血清的不当使用习惯会缩短血清的使用周期，甚至产生错误的凝集结果。诸如使用者不注意无菌操作，用于挑取血清的接种环没有及时更换造成细微的铁屑不断沉淀于瓶底等均会降低诊断血清的使用寿命。所以，建议对诊断血清要采取妥善使用、小心保存、专人保管的态度来延长使用寿命和降低鉴定成本，对于已过期的外观清亮的血清要集中保管，在需要的时候，可以用于不同批号血清的比对试验。
【关键词】沙门菌 血清 &
&& 上一篇：
&& 下一篇：在沙门菌鉴定过程中,如何处理血清凝集反应中的问题?_百度作业帮
在沙门菌鉴定过程中,如何处理血清凝集反应中的问题?
在沙门菌鉴定过程中,如何处理血清凝集反应中的问题?
与多价抗血清不凝集时,可在玻璃试管内用生理盐水将细菌制成浓菌液,煮沸15-30min,冷却后再次做凝集试验,因Vi抗原能阻断0凝集反应,而煮沸处理能破坏菌体表面的Vi抗原。 仅出现单相H抗原(第一相或第二相)时,需用位相分离的方法诱导出另一相抗原后再进行检查。

我要回帖

更多关于 沙门氏菌诊断血清 的文章

 

随机推荐