甲状腺乳头状癌BRAF突变及RET基因重排与PDGFB表达及预后的研究--《中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编》2012年
甲状腺乳头状癌BRAF突变及RET基因重排与PDGFB表达及预后的研究
【摘要】：正目的:观察青岛地区甲状腺乳头状癌(PTC)BRAFTl799A基因突变及RET/PTC基因重排的发生情况;检测癌组织中血小板源性生长因子(PDGFB)的表达,研究基因变异与PDGFB的关系。方法:收集48例PTC新鲜组织,采用聚合酶链式反应方法分别扩增BRAF、RET/PTCl、RET/PTC3基因,产物经测序证实。采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中PDGFB的表达。结果:48例PTC中微小癌14例(29.2%);18例发生BRAF T1799A基因突变,突变率为37.5%;23例发生
【作者单位】：
【分类号】：R736.1【正文快照】：
目的:观察青岛地区甲状腺乳头状癌(P TC)BRAFT1799A基因突变及RET爪TC基因重排的发生情况;检测癌组织中血小板源性生长因子(P DGFB)的表达，研究基因变异与PDGFB的关系。方法:收集48例PTC新鲜组织，采用聚合酶链式反应方法分别扩增BRAF、RET爪TCI、RET用TC3基因，产物经测序
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甲状腺乳头状癌344例临床诊断及治疗分析
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BRAF V600E 基因突变与甲状腺乳头状癌
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博十学位论文
状腺乳头状癌发生的相关性及其部分作用机制。
研究方法：
收集73彰／t1散发的甲状腺乳头状癌患者及16例同期甲状腺
瘤患者 对照组 的临床资料及标本。采用免疫组织化学和免疫印迹
路在甲状腺乳头状癌发生中可能的作用。
通过PCR和测序技术，对73例散发的甲状腺乳头状癌患者BRAF
基因进行了突变筛查，探讨BRAF突变与甲状腺乳头状癌发病的相关
同时根据BRAF的mRNA序列选择2个靶序列并根据它们设计合
成2对SiRNA干扰序列，脂质体转染干扰序列进入甲状腺癌细胞株
SW579，运用RT．PCR和免疫荧光技术检测干扰的效果。对干扰成功
路相关蛋白的检测。
研究结果：RAS，BRAF，
水平在甲状腺乳头状癌组都明显高于甲状腺瘤组 p O．05 ；磷酸化
ERKl／2蛋白在甲状腺乳头状癌组织中呈现了明显的细胞核分布，相
表达与甲状腺乳头状癌的肿块大小、淋巴结转移以及临床分期相关 p
博十学位论文
我们在73例甲状腺乳头状癌组织筛查到了42例存在V600E突
变，突变率为．57．5％。而在良性甲状腺瘤中未发现突变。而且，BRAF
突变与甲状腺乳头状癌的淋巴转移以及临床分期相关 p O．01 。
2种siRNA干扰核苷酸转染甲状腺癌SW579细胞系后，显著地抑
SW579细胞后，发现SW579的生长增殖受到抑制，细胞周期发生改变，
G1／S期增加，同时，
高表达，可能与甲状腺乳头状癌发生及其淋巴结
正在加载中，请稍后...甲状腺乳头状癌GLUT1蛋白表达与BRAF V600E突变的相关性研究--《浙江大学》2013年硕士论文
甲状腺乳头状癌GLUT1蛋白表达与BRAF V600E突变的相关性研究
【摘要】：背景：
葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter1, GLUT1)是一种有利于癌细胞广泛摄取葡萄糖的关键蛋白,它的过度表达往往意味着肿瘤具有更高的侵袭性。在BRAF V600E基因突变的病例中,GLUT1似乎是RAF/MEK/ERK通路的激活目标。在本项研究中,我们推测在甲状腺乳头状癌中GLUT1的过度表达与BRAF V600E突变存在相关性。
研究甲状腺乳头状癌中GLUT1的表达与BRAF V600E突变之间的相关性。
选取了我院手术的46例甲状腺乳头状癌病例,采用从石蜡包埋的肿瘤组织中抽提出基因组DNA,进行PCR后直接测序的方法对BRAF V600E突变进行检测。然后采用免疫组织化学方法对成功测序的38例病例进行了GLUT1的抗体检测。GLUT1的表达有2种类型：胞浆表达和胞膜表达。其结果均采用Remmele免疫得分的方法进行评估。评估结果采用SPSS18.0统计分析软件与BRAF V600E基因的表达情况进行分析。
在46例甲状腺乳头状癌病例中BRAF基因扩增及测序成功的有38例(82.6%,38/46)。其中24例为BRAF V600E突变型(63.2%,24/38),14例为BRAF V600E野生型(37.8%,14/38)。38例病例免疫组化结果显示,GLUT1胞浆表达共25例(65.8%,25/38),其中16例同时携带有BRAF V600E突变型(16/24,66.7%),9例为BRAFV600E野生型(64.3%,9/14),SPEARMAN分析显示,GLUT1胞浆表达与BRAFV600E突变未见明显相关性.GLUT1胞膜表达共10例(26.3%,10/38),且均出现在BRAF V600E突变型的病例中(41.7%,10/24),SPEARMAN分析GLUT1胞膜表达与BRAF V600E突变有显著相关性(P=0.004)。
甲状腺乳头状癌中GLUT1的表达分为胞浆表达和胞膜表达两种,GLUT1的胞膜过度表达与BRAF V600E基因突变有显著相关性,提示BRAF V600E基因突变可能与糖酵解的启动有关,并赋予癌细胞以生长优势。
【关键词】：
【学位授予单位】：浙江大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2013【分类号】：R736.1【目录】：
致谢4-5中文摘要5-7Abstract7-10缩略词表10-11目次11-13引言13-16材料与方法16-25 1 材料与方法16-19
1.1 病例收集16
1.2 主要试剂16-17
1.3 主要仪器和设备17-18
1.4 PCR相关引物序列18-19 2 方法19-24
2.1 BRAF基因测序19-22
2.2 免疫组织化学(IHC)22-24 3 统计24-25结果25-32 1 46例甲状腺乳头状癌BRAF基因测序结果25-27 2 38例甲状腺乳头状癌病例免疫组化结果27-31 3 BRAF V600E突变与GLUT1胞浆表达、胞膜表达的相关性31-32讨论32-35结论35-36参考文献36-42综述42-56 参考文献49-56作者简历及在学期间所取得的科研成果56
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