为什么生物体内游离存在的核苷酸的生物学功能多是5'

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核酸的化学组成
来源:江西检验医学网  发布日期:日
核酸的化学组成
作者:佚名
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ICP证: 浙B2-(一)DNA的分布
核酸广泛分布于各类生物细胞中。在真核细胞中,95%~98%的DNA分布于细胞核中,在原核细胞中,DNA存在于细胞质中的核质区。
(二)RNA的分布
RNA主要存在于细胞质中,约占总量的90%,细胞核中也有少量的存在,约占总量的10%。
上述两大类核酸在细胞内的分布状况是与它们的功能相一致的。细胞中的DNA起着贮存和传递遗传信息的作用。细胞质中的RNA在核内接受了DNA的“指令”,到细胞质指导并直接参与蛋白质的合成。
三、核酸的化学组成
核酸的基本结构单位是核苷酸(nucleotide)。
部分水解可产生核苷酸,如经完全水解则产生磷酸、碱基和戊糖。
核酸中的碱基有两类:嘌呤碱(pyrimidine)和嘧啶碱(purine)。它们是含氮的杂环化合物,称为碱基,也称含氮碱。
(一)嘌呤碱
结合教材中嘌呤碱的结构分子式,介绍 DNA和RNA中含有的两种相同的主要嘌呤碱:腺嘌呤和鸟嘌呤,分别用A和G表示。
(二)嘧啶碱
结合教材中嘧啶碱的结构分子式,介绍核酸中的三种嘧啶碱,即胞嘧啶(cytosine)、尿嘧啶(uracil)和胸腺嘧啶(thymine),分别用C、U和T表示。RNA中含有的是胞嘧啶和尿嘧啶,DNA含有胞嘧啶和胸腺嘧啶。
核酸是按其所含戊糖不同而分为两大类的。DNA所含的戊糖是D-2'-脱氧核糖,RNA所含的戊糖是D-核糖。
任何核酸都含有磷酸,参与形成3',5'-磷酸二酯键,使核酸连成多核苷酸链。
核苷(由戊糖和碱基缩合而成,并以N-C糖苷键连接。核苷可以分成核糖核苷与脱氧核糖核苷两大类。
五、核苷酸
核苷中的戊糖羟基被磷酸酯化,就形成核苷酸。核苷酸分成核糖核苷酸与脱氧核糖核苷酸两大类。
生物体内存在的游离核苷酸多是5'-核苷酸。用碱水解RNA时,可得到2'-核糖核苷酸与3'-核糖核苷酸的混合物。
六、细胞中的游离核苷酸及其衍生物
生物体细胞中还有一些以游离形式存在的核苷酸。如腺嘌呤核苷二磷酸(ADP)和腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)。
此外,在生物细胞中,还存在着环化核苷酸,其中研究得最多的是3',5'-环腺苷酸(cAMP)。
脱氧核糖核酸的结构
一、DNA的碱基组成
Chargaff定则:1950年
1.所有DNA中 [A]=[T]; [G]=[C]。因此, [A]+[G]=[C]+[T]。
2.DNA的碱基组成具有种的特异性,即不同生物种的DNA具有自己独特的碱基组成比例(又称不对称率 dissymmetry ratio)。
3. 同一种生物DNA的碱基组成没有组织和器官的特异性。
4. 年龄、营养状况、环境等因素不影响DNA的碱基组成。
二、DNA的一级结构
核酸结构根据一级、二级、三级分级讨论。核酸的一级结构是它的共价结构和核苷酸顺序,是由数量极其庞大的四种脱氧核糖核苷酸,通过3',5'-磷酸二酯键连接起来的直线形或环形多聚体。
多核苷酸的几种缩写法:
由于DNA链是有极性的,书写碱基的顺序是从5'-端到3'-端。
三、DNA的空间结构
DNA分子双螺旋结构模型:
(一)B-DNA的结构
根据Watson和Crick所提出的模型(参见图3-14),B-DNA具有以下特征:
1. 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕。
2. 嘌呤碱基与嘧啶碱基位于双螺旋的内侧,磷酸与核糖在外侧,彼此通过3',5'-磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架。
3. 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻的碱基对之间相距的高度,即碱基堆积距离为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36°。因此,沿中心轴每旋转一周有10个核苷酸。每一圈的高度(即螺距)为3.4nm。
4.两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连而结合在一起。A与T相配对;G与C相配对,称为碱基互补。
DNA复制、转录、反转录等的分子基础都是碱基互补配对。
对某些重要特性的讨论:
1. DNA分子的长度 ;2. DNA分子结构中的碱基互变异构体;3. DNA分子的稳定性:主要因素是碱基堆积力、范德华引力。
DNA分子的可塑性
(二)A-DNA的结构
DNA是当降低湿度或在水溶液中加入乙醇,可使B-DNA转变为A-DNA。
(三)Z-DNA分子的结构
除了A-DNA和B-DNA以外,自然界中还发现有一种Z-DNA。
四、DNA的三级结构
环状DNA结构进一步扭曲成为更复杂的三级结构。包括线状DNA形成的纽结、超螺旋和多重螺旋以及环状DNA形成的结、超螺旋和连环等多种类型,其中超螺旋是最常见的,所以,DNA的三级结构主要是指双螺旋进一步扭曲形成的超螺旋。超螺旋意味着在螺旋的基础上再螺旋。
DNA超螺旋的性质是可以定量的,这种量化的研究可引用拓扑学知识,以加深对DNA分子构象和功能的了解。
讨论环形DNA的一些重要的拓扑学特性。
介绍连环数(L)、缠绕数(T)、超螺旋周数或扭曲数(W)的概念;介绍L、T、W三者之间的关系为: L=T+W。
3.3核糖核酸
一、RNA的结构
RNA是细胞内核酸的第二种主要类型,它在把DNA中的遗传信息变成功能性蛋白的过程中起中介作用。
组成RNA的核苷酸也是以3',5'-磷酸二酯键彼此连接起来的。
天然RNA只有局部区域为双螺旋结构,称为茎环结构。
二、分别讨论三类主要的RNA分子结构。
(一)tRNA
tRNA的一级结构(tRNA的一级结构有五个特征)。
(第二次课完成以上内容,重点讲授有关DNA一级结构的概念;B-DNA二级结构的概念及特点,维持二级结构的作用力)
课后要求:
①掌握核酸的组成,比较DNA与RNA核苷、核苷酸的区别。
②掌握DNA一级结构的缩写法;描述B-DNA二级结构的特点及维持
结构的稳定因素,简单描述Z-DNA、A-DNA的突出特点。
③分清DNA双螺旋与超螺旋的关系。
④结合习题集,练习有关DNA 结构的习题。
tRNA的二级结构
结合教材的图解,介绍tRNA的二级结构(呈三叶草形)的四个基本特征。
3.tRNA的三级结构
tRNA三级结构的形状象一个倒写的L字母。
(二)mRNA
mRNA是以DNA为模板合成的。mRNA的二级结构也是通过单链自身折叠而形成的茎环结构。
原核生物和真核生物的mRNA的结构有所不同,其特点区别如下:
1. 原核生物的mRNA是多顺反子,真核生物的mRNA是单顺反子(掌握顺反子的概念)。
2. 极大多数真核细胞mRNA在3'-末端有一段长约200个核苷酸的polyA。
3. 真核细胞mRNA 5'-末端还有一个特殊的帽子结构5'-m 7G -5'ppp5'-Nm-3'-P。
(三)rRNA
rRNA是核糖体的组成成分,由一级结构推导出来rRNA的二级结构都已阐明,也是通过单链自身折叠形成的茎环结构,分子越大茎环结构越复杂。
3.4 核酸的理化性质与最常用的研究方法
一、一般物理性质
介绍核酸的溶解度、分子大小、形状及粘度等。
二、核酸的紫外吸收
核酸中由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使碱基、核苷、核苷酸和核酸在240~290nm的紫外波段有一强烈的吸收峰,因此核酸具有紫外吸收特性。
介绍核酸的吸光率(absorbance)、比吸光系数的概念。
介绍实验室中如何通过A260/A280判断DNA纯度,以及利用核酸的比吸光系数计
算溶液中核酸的量。
三、核酸的沉降特性
了解溶液中的核酸分子在引力场中沉降现象及应用。
四、核酸的两性解离及凝胶电泳
介绍核酸的两性离子、等电点、电泳的概念。
介绍琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳的影响因素及异同点。
五、核酸的变性、复性
(一)变性
变性作用的概念及变性现象,强调与降解的区别。
介绍引起变性的因素,介绍热变性、增色效应、熔解温度(Tm值)等概念。
了解影响DNA的Tm值大小的因素。
(二)复性

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