半干海参和干海参区别转和湿转有什么区别

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-01-12 12:50 标签： 干型和半干型区别
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【专题讨论】大家用半干转时，不同分子量都各用多少时间呢？
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这个帖子发布于9年零245天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
小弟实验室是用的Bio-rad的半干转仪，对不同分子量转膜的时间及电流电压设置比较感兴趣，还想请各位指点讨论我们做得最多的是转22kD的蛋白，用的是恒压10V，转膜25min可以成功。请问各位有没有做过其他分子量的蛋白呢？讨论讨论吧，为以后的XDJM们提供点参考：）
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我一般用恒流转的，跟据我的经验，30kd以下的蛋白是会转过膜的，所以要控制时间,一块1.5mm的胶，100ma，30min以内，30－50kd，100ma,45min50-80kd,100ma,1h80-100kd,150ma,1h&100kd,150ma,1.5h两块胶的话，电流加倍，时间不变
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我一般用恒流转的，跟据我的经验，30kd以下的蛋白是会转过膜的，所以要控制时间,一块1.5mm的胶，100ma，30min以内，30－50kd，100ma,45min50-80kd,100ma,1h80-100kd,150ma,1h&100kd,150ma,1.5h两块胶的话，电流加倍，时间不变
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昨天做82kD的蛋白，用的是10V，转了35min。用考染染胶30min发现条带非常少，今天做检测没有发光，用丽春红染膜也发现条带非常少，几乎看不清。不知道是不是上样量少（20ug）还是转膜时间过长呢？头痛啊
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半干转六一的统一是150mA 恒流 10--90
40分钟90--120 50分钟其实一般转45分钟都没问题
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你最好买点欲染mark试几次就知道了其实你如果不怕费样品你用150mA转10分钟就能发现 30左右的已经上去了转到40分钟左右 30左右的刚转完 全 45分钟
30左右的并没有转过!我们科室为了节约时间,有时候是一块胶转几次(因为一抗不同),样品上的大量一点
大小在30附近的蛋白 每20分钟转一次 一块胶能转至少4张膜呢!
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谢谢以上各位园友的大力帮助，不知道大家是否都是用半干转还是其他什么方法呢？麻烦一并写清楚，大家才好对号入座，多谢多谢！希望更多的战友加入进来哟
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jingzikm 半干转六一的统一是150mA 恒流 10--90
40分钟90--120 50分钟其实一般转45分钟都没问题jingzikm园友所说的“一般转45min都没有问题”，意思是大概转这个时间点的话，20－100kD范围内的蛋白都会在膜上么？如果如此的话，那么我想以后的园友大部分能够参考这个时间点了另外，关于设定电流还是电压的问题，我曾经从书上看过最好是设定恒流，因此，我不知道电流设定的规则，望各位高手指点一二
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这台仪器感觉转膜效率不怎么高，试了很多种条件，恒流从20mA到100mA，不同的时间，感觉丢失比湿转要大，如果是在做不出来可以看看加大上样量看看，仅供参考！
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谢谢starkstang的建议，很不错的看法哦
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you can not judge the effect of transfer by prestained marker according to our experiences,in fact, when you put the membran on the gel,it is easy for marker to stain the gel even there is no electricity.Maybe you can stain the gel to know whether you target protein transfer to membrane.
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请问楼上的意思是用考染染胶和丽春红染膜么？在70－90之间会有很多条带，如何判断自己需要的蛋白已经没有在胶上，而在膜上了呢？
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bulailiao 我一般用恒流转的，跟据我的经验，30kd以下的蛋白是会转过膜的，所以要控制时间,一块1.5mm的胶，100ma，30min以内，30－50kd，100ma,45min50-80kd,100ma,1h80-100kd,150ma,1h&100kd,150ma,1.5h两块胶的话，电流加倍，时间不变我们都用六十毫安来转…是不是不好？
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western 的干转和半干转及湿转各有什么优势？
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western 的干转和半干转及湿转各有什么优势？转过了是什么意思？
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半干具有速度快的优势，但是分子量超过100K的不好转，湿转速度慢，但是可以延长时间大分子多数采用湿转，转过了就是转到膜外面了，
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好的，谢谢
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lzsgxl半干具有速度快的优势，但是分子量超过100K的不好转，湿转速度慢，但是可以延长时间大分子多数采用湿转，转过了就是转到膜外面了，您好，最近做一个52kd的蛋白，因为实验室条件限制，只有湿转，但是之前的师兄师姐也没做过湿转，想请教下大概需要多长时间？电压要多大啊？感激不尽^_^
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初恋小情儿 您好，最近做一个52kd的蛋白，因为实验室条件限制，只有湿转，但是之前的师兄师姐也没做过湿转，想请教下大概需要多长时间？电压要多大啊？感激不尽^_^关于蛋白技术的，最好到专业板块。/bbs/board/65
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初恋小情儿 您好，最近做一个52kd的蛋白，因为实验室条件限制，只有湿转，但是之前的师兄师姐也没做过湿转，想请教下大概需要多长时间？电压要多大啊？感激不尽^_^不同实验室转膜习惯不一样，有的习惯用恒压有的习惯用恒流，蛋白板块有个关于转膜条件的综合贴，你可以找差不多大小的蛋白转膜条件参考以后，自己再摸索一下条件！
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【求助】半干转和湿转 区别大吗？伯乐的半干转设备好贵啊
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老板要买个电泳设备，我打听了下，伯乐的 半干转的设备要单独买，特别贵，上万，而湿转的设备就包含在三件套里面，不用单独购买。我想问下，有必要单独购买半干转的那套设备吗？半干转比湿转相比有何优势？跑出的条带更漂亮？
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省时省力，省试剂。western做的不多不用买
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xiaobaihello 省时省力，省试剂。western做的不多不用买你说的省试剂就是省转移缓冲液吧。省时倒是没必要，湿转等待的时间正好去吃个饭睡个午觉
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